出血性大肠杆菌O157eae-stx1/2B融合基因的构建和表达

构建表达eae和stx1／2B的融合基因，克隆eae基因的C端280个氨基酸残基(Int280)基因部分，以正确地阅读框定向插入到含有stx1／2B融合基因的质粒，构建重组质粒，将其转化于BL21(DE3)，用IPTG进行诱导表达，经SDS—PAGE电泳检测，该融合蛋白获得了高效表达。薄层扫描分析表明：目的蛋白表达量占菌体总蛋白含量的50．67％。由于该融合蛋白由eae、stx1B、stx2B等三部分抗原组成，可刺激机体产生针对紧密素和StxB的抗体，在EHEC O157亚单位疫苗设计或单克隆抗体抗制备中具有重要价值。     

4种高原乡土禾草的抗旱生理比较

采用盆栽法对梭罗草（Roegneria thoroldiana）、草地早熟禾（Poa pratensis）、垂穗披碱草（Elymus nutans）和中华羊茅（Festuca sinensis）4种高原乡土禾本科牧草幼苗的抗旱性进行了比较。结果表明,一定程度的干旱胁迫后,4种禾草的游离脯氨酸含量、可溶性蛋白含量、可溶性糖含量、过氧化氢酶活性、过氧化物酶活性等均有所增加,且叶绿素分解、细胞膜透性增大、电解质外渗率增加,牧草组织细胞受到伤害。不同牧草在干旱胁迫下生理生化指标的变化不同,综合各项指标,运用隶属函数分析表明,4种禾草抗旱性强弱的排序为梭罗草>草地早熟禾>垂穗披碱草>中华羊茅。     

湖羊胚胎和精液超低温保存效果的评价

【目的】 检验长期保存在国家家畜基因库的湖羊冷冻胚胎和冷冻精液的质量,评价超低温冷冻保存技术保种的效果。【方法】 对保存于国家家畜基因库的冷冻胚胎（保存20年）和冷冻精液（保存20和30年）进行复苏,进行相应鉴定后分别进行胚胎移植和人工授精,同时以0年冷冻精液和新鲜精液为对照,测定其受胎率和后代的羔皮性能、生长性能及繁殖性能,检验保存效果。【结果】 本试验共解冻胚胎36枚,其中,A级胚胎22枚,B级胚胎7枚,C级胚胎5枚,D级胚胎2枚,冷冻胚胎复苏利用率达到94.44%（34/36）,A级胚胎率达到61.11%（22/36）,移植34枚,产羔17只,冷冻胚胎复苏移植产羔率达50.00%;保存30年的冷冻精液复苏后平均精子活力达35%,受胎率为58.57%,平均产羔1.90只;保存20年冷冻精液复苏后平均精子活力达31%,受胎率为53.66%,平均产羔1.95只;胚胎复苏移植羊、30和20年冷冻精液后代体型外貌鉴定均符合纯种湖羊特征,没有畸形个体;羔羊一级羔皮率分别是31.25%、42.03%和23.81%,保持了当年湖羊的羔皮特性;生长发育及繁殖性能与现有湖羊群体性能基本保持一致。【结论】 利用超低温冷冻技术长期保存湖羊冷冻胚胎和冷冻精液的方法是可行的,对地方品种保种具有重要意义。     

不同浓度的组蛋白去乙酰化酶抑制剂Scriptaid对水牛胎儿成纤维细胞生长及其组蛋白乙酰化修饰的影响

研究旨在探讨组蛋白去乙酰化酶抑制剂Scriptaid对水牛胎儿成纤维细胞（BFF）生长特性、细胞毒性及其组蛋白H3K18乙酰化修饰的影响,为今后研究供体细胞的重编程及提高水牛核移植效率提供一定的理论依据。试验采用不同浓度（0、250、500、750 nmol/L）的Scriptaid分别处理BFF后观察细胞的生长形态,然后利用台盼蓝染色法检测细胞的存活率,同时通过细胞免疫组化技术分析细胞组蛋白H3K18乙酰化的表达情况。结果发现,BFF经不同浓度的Scriptaid处理后,细胞形态没有显著变化,为长梭形、立体感较强,生长曲线与对照组相似,均呈“S”型分布,且各处理组细胞的存活率与对照组之间差异不显著（P＞0.05）;此外,Scriptaid处理组的细胞组蛋白H3K18乙酰化的相对荧光强度显著高于对照组（P＜0.05）,其中500和750 nmol/L 2个处理组细胞组蛋白乙酰化水平显著高于250 nmol/L处理组（P＜0.05）,而500和750 nmol/L 2个处理组之间差异不显著（P＞0.05）。可见,适合浓度的Scriptaid对BFF细胞形态和存活率影响不大,且能显著提高BFF的组蛋白乙酰化水平。     

Effects of taurine-zinc on learning and memory abilities of vascular dementia mice

AIM:To observe the effects of taurine-zinc (TZC) on the learning and memory abilities of vascular dementia (VD) mice and to investigate the related mechanism. METHODS:The mice were randomly divided into model group, sham group, and TZC at 50 mg/kg, 100 mg/kg and 200 mg/kg groups. The mice in drug groups were given TZC by gavage at 10 mL/kg once daily. The mice in sham group and model group were given equal volume of distilled water. VD mice were established by intercepting both common carotid arteries and bleeding at caudal vein after 14 d of gavage. The levels of tumor necrosis factor-α (TNF-α) and interleukin-1β (IL-1β) were detected by ELISA. The levels of inducible nitric oxide synthase (iNOS) and nitric oxide (NO) were measured via spectrophotometer. Step-down test and Morris water maze test were used to examine the abilities of learning and memory in the mice. RESULTS:TZC at 50 mg/kg, 100 mg/kg and 200 mg/kg reduced the levels of TNF-α, IL-1β, iNOS and NO in the brain tissues. In the water maze test, TZC at 100 mg/kg and 200 mg/kg significantly decreased the error times and latency compared with model group. In the step-down test, the escape latency was prolonged and error times were lowered significantly by treatment with TZC at 50 mg/kg, 100 mg/kg and 200 mg/kg as compared with model group. CONCLUSION:TZC improves the abilities of learning and memory, which might be related to the reduction of TNF-α, IL-1β, iNOS and NO levels in VD mice.     

欧拉型藏羊杂交改良山谷型藏羊F_1代生长发育对比分析

为研究甘南地区欧拉羊杂交改良山谷型藏羊效果,对欧拉羊与山谷型藏羊杂交试验组和山谷型藏羊本交对照组所产后代的初生、3月龄、6月龄、12月龄、18月龄的体尺、体重进行了跟踪测定,并对不同年龄段杂交后代与对照组后代进行了对比分析和差异显著性检验。结果表明：杂交F1代初生、3月龄、6月龄、12月龄、18月龄的体尺、体重极显著的高于对照组（P〈0.01）,初生、18月龄管围差异显著,3月龄、6月龄、12月龄管围差异不显著（P〉0.05）。     

胸腺嘧啶依赖型金黄色葡萄球菌小菌落突变株的分离鉴定

本试验对由患慢性奶牛乳房炎奶样中分离出的1株疑似金黄色葡萄球菌小菌落突变株(SCVs)进行形态观察、金黄色葡萄球菌相关保守基因片段(nuc、nucA、16S rDNA) 多重PCR扩增鉴定、药敏试验、生理生化特性研究及补偿试验。结果显示分离出1株金黄色葡萄球菌SCVs,该菌含有金黄色葡萄球菌菌种特异性基因nuc和nucA;与金黄色葡萄球菌质控菌株ATCC 25923的抑菌圈大小明显不同;菌落形态主要表现为菌落细小、生长缓慢、溶血能力下降;凝固酶活性下降;耐盐能力降低;革兰氏染色为革兰氏阳性球菌,呈葡萄状排列;补偿试验鉴定该金黄色葡萄球菌SCVs为胸腺嘧啶依赖型。结果表明成功分离鉴定出1株胸腺嘧啶依赖型金黄色葡萄球菌SCVs,为由金黄色葡萄球菌SCVs引起的奶牛慢性乳房炎的预防和控制及其致病机制的研究奠定前期基础。     

Relationship between expression of somatostatin and DNA ploidy in breast cancer

AIM: To investigate the relationship between somatostatin and the pathologic type, estrogen receptor,DNA ploidy of nuclei in tumor cells of breast cancer.METHODS: 67 cases of primary breast cancer and 25 cases of benign breast tumor were examined by immunohistochemical stretomyces avidin peroxidase method. 26 cases of breast cancer selected at random were analyzed by flow cytometry.RESULTS: Somatostatin expressed significantly higher in low malignant breast cancer than that in high malignant breast cancer (P<0.05). Most of cancers with positive staining of somatostatin were diploidy,most of cancers with negative staining were aneuploidy,there had significant difference between two groups (P<0.05).CONCLUSION: Somatostatin may delay the progress of breast cancer,and somatostatin levels in cancer tissues may become a useful indicator for assessing prognosis of patients with breast cancer.     

柴术抗激散对早期断奶仔猪生产性能和血清应激相关激素水平的影响

本试验旨在研究柴术抗激散对早期断奶仔猪生产性能和血清应激相关激素水平的影响。选用(28±2)日龄"杜×长×大"断奶仔猪48头,随机分为4个处理组,每个处理组3个重复,每个重复4头猪,分别饲喂添加0、1%、2%、3%柴术抗激散的日粮,试验期28 d。结果显示,日粮中添加2%和3%的柴术抗激散能显著提高断奶仔猪的平均日采食量和平均日增重(P＜0.05),显著降低料重比(P＜0.05),极显著降低腹泻率(P＜0.01),可显著降低35和56日龄仔猪的血清皮质醇水平(P＜0.05),显著提高35和56日龄仔猪血清生长激素、胰岛素、三碘甲状腺素、胃泌素水平(P＜0.05)。由此可知,日粮中添加柴术抗激散可有效缓解断奶应激对仔猪造成的伤害,且在日粮中添加2%的柴术抗激散效果最好。     

氨基酸添加方式和营养液杀菌方式对生菜产量与品质的影响

研究了生菜水培过程中,用混合氨基酸替代20％硝态氮时,不同的氨基酸添加方式和营养液的杀菌方式对生菜产量和品质的影响。试验于生菜采收前12 d开始进行,试验设置4个处理:A．替代氨基酸1次全部加入;B．每3 d添加氨基酸替代总量的1／4,共添加4次;C．氨基酸分次添加(添加方式同B处理),每次添加前营养液通臭氧0．5 h杀菌; D．氨基酸分次添加(添加方式同B处理),每次添加前把营养液加热到60-70℃保持10 min进行杀菌,然后迅速把营养液温度降低到常温。结果表明,在不杀菌的情况下,1次添加的产量和品质优于分次添加,但在降低硝酸盐含量方面,分次添加优于1次添加;在分次添加的情况下,杀菌与不杀菌相比,杀菌可以明显提高生菜的产量和品质,加热杀菌对生菜产量和品质的影响优于臭氧杀菌,臭氧杀菌处理的生菜根系活力、叶绿素等指标高于加热杀菌,但2种杀菌方式之间差异不大。