氨基酸代谢与免疫反应

炎症反应和感染性疾病均可改变机体的蛋白质和氨基酸需要,导致动物采食量下降、生长受阻和肌肉消耗,这主要是因细胞因子(如IL-1、IL-6、TNF-α)的增加而改变了蛋白质代谢。在免疫反应中,氨基酸将发生重分配并主要用于合成参与炎症和免疫反应的蛋白质以及参与免疫细胞增殖和其他免疫反应的重要化合物。免疫系统的活化可干扰机体正常的生理反应并导致对某些特殊氨基酸的需要量增加。本文主要综述了某些特殊氨基酸(通常是必需氨基酸)在免疫反应中的重要作用。     

钼对大鼠肝微粒体苯胺羟化酶活力的影响

为研究钼对大鼠肝微粒体中苯胺羟化酶的影响,将50只大鼠随机分为5个组,4个试验组每天分别灌服剂量为8.325、16.65、33.3、66.6 mg/kg的钼酸胺,对照组每天灌服三重蒸馏水,持续灌服2周,然后处死5个组所有大鼠,采用钙沉淀法制备大鼠肝微粒体,再用对氨基酚量法测定苯胺羟化酶的活力.结果显示,4个试验组的苯胺羟化酶的活力分别为2.724 4±0.037 5、2.681 8±0.187 8、2.347 4±0.095 3、2.304 6±0.110 9 nmol/(mg·min),对照组为1.921 0±0.074 3 nmol/(mg·min).与对照组相比,4个试验组苯胺羟化酶的活力都极显著升高(P＜0.01),并且随着剂量增大而逐渐上升.由此证明,钼酸胺口服剂量在8.325 mg/kg～66.6 mg/kg范围内能使大鼠苯胺羟化酶的活力增强.     

新城疫病毒F48E9感染CEF细胞特异性表达基因的筛选鉴定

分别以NDV F48E9和La Sota株感染鸡胚成纤维细胞,于感染后8 h提取NDV感染CEF细胞总RNA,通过mRNA差异显示技术筛选病毒感染诱导表达的特异性基因.主要方法是先以锚定引物经反转录后,然后以9～10 bp随机引物为上游引物,以锚定引物Oligod(T)18为下游引物,进行PCR扩增,PCR产物采用8%的尿素变性PAGE胶电泳进行分离鉴定.对于特征性差异带进行第二次PCR扩增,克隆后测定其核苷酸序列.结果我们发现数个差异条带,选取差异带在500 bp以内的条带,经测序后显示经NDV F48E9感染后,有一条差异条带特异性表达的基因所编码的蛋白与Receptor(TNFRSF)-interacting serine-threonine kinase 2有47 %同源,是一个新基因,其蛋白功能不明确,有可能和细胞的凋亡有关.     

缺氧与肉鸡肺动脉平滑肌细胞c-fos和 c-myc基因表达的关系

利用细胞培养、原位杂交、免疫组化、图像分析等技术研究缺氧与肉鸡肺动脉平滑肌细胞癌基因c-fos和c-myc表达的关系,进一步阐明缺氧与以肺动脉增殖重塑为特征的肉鸡腹水综合征的关系。结果显示,缺氧显著引起肺动脉平滑肌细胞内癌基因c-fos和c-mycmRNA的表达(c-fosmRNA:常氧组为144.6±20.2,缺氧组为198.1±32.8,P<0.01;c-mycmRNA:常氧组为125.4±18.8,缺氧组为167.1±22.4,P<0.01)。缺氧显著引起肺动脉平滑肌细胞内癌基因c-fos和c-myc蛋白的表达(c-fos蛋白:常氧组为150.9±33.2,缺氧组为225.9±37.0,P<0.01;c-myc蛋白:常氧组为162.1±28.5,缺氧组为228.8±33.4,P<0.01)。结果表明缺氧能够明显诱发肉鸡肺动脉平滑肌细胞内癌基因c-fos、c-myc的转录和表达,是启动肺动脉平滑肌细胞增殖的重要原因。本研究阐明缺氧是以肺动脉重塑为特征的肉鸡腹水综合征的主要诱因。     

H5N2与H5N1禽流感油乳灭活疫苗免疫鹅群对H5N1流行株攻毒的保护效力及母源抗体对免疫效力的干扰

应用H5N2和H5N12种类型禽流感油乳灭活疫苗分别免疫鹅群,观察比较了二者对H5N1型高致病性禽流感病毒的攻毒保护效力。结果表明,在同等剂量免疫条件下,从发病率、死亡率和泄殖腔排毒规律3项指标综合评价来看,H5N1灭活苗水禽免疫组对高致病性禽流感H5N1流行株攻毒的保护效率较H5N2灭活苗理想,且水禽禽流感母源抗体对灭活苗免疫具有一定的干扰作用。     

重组H5N3亚型禽流感细胞毒灭活疫苗免疫佐剂效果的评价

为评价佐剂对疫苗免疫效果的影响,本试验以反向遗传学技术拯救的重组H5N3亚型禽流感病毒为种毒,对国产矿物油以及赛比克公司提供的MontanideTM ISA 70M VG(简称7OM)和MontanideTM ISA 206 VG(简称206)3种佐剂制备的灭活疫苗进行了SPF鸡免疫攻毒试验.结果表明国产矿物油佐剂组与70M佐剂组都能对SPF鸡100%保护,206佐剂组仅能保护40%,攻毒的SPF鸡发病,但不死亡;从抗体水平上比较发现70M佐剂组稍好于国产矿物油佐剂组,但两组之间差异不显著,而这两组与206佐剂组差异极显著.这3种佐剂组免疫鸭均能够诱导产生较高的抗体水平,70M佐剂组优于国产矿物油佐剂组和206佐剂组,但3者差异不显著.用70M系的8种佐剂MontanideTM ISA 70 essai Mi(i-1-8)(简称70Mi)佐剂乳化的疫苗免疫SPF鸡,结果表明70M佐剂组效果最好.攻毒后免疫鸡不排毒,而且无临床症状;统计学分析显示70M佐剂组与所有70Mi佐剂组差异均显著.这些结果表明70M佐剂可以作为新型疫苗佐剂用于禽流感疫苗的制备.     

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调查了中国西北和东部地区不同生境的拂子茅属Calamagrostis植物中Neotyphodium属内生真菌的分布。采样范围包括新疆、青海、甘肃、江苏、安徽、浙江、上海7省（市、区）,共采集拂子茅属植物样品426株。调查发现西北3省（区）所有276个拂子茅属植物样品中都不含有内生真菌;而采集自东部的样品中,南京的无性系拂子茅属植物和黄山的拂子茅C. epigeios含菌率为100%。但是,采自南京抽穗的拂子茅却完全不含内生菌。通过研究分离菌株的形态学特征,发现南京与黄山的菌株都具有Neotyphodium属内生真菌的典型特征,而它们之间在菌落形态、生长速度、孢子大小等方面又存在较明显差异。以上结果说明我国拂子茅属植物及其中的禾本科植物内生真菌具有一定的生物多样性,拂子茅属植物中的内生真菌含量受地理环境以及宿主植物种类的影响十分明显。     

烟台市奶牛业现状调查与发展对策

烟台市奶牛业在改革开放以后，特别是在过去6～7年内有了较快发展，奶牛头数由1978年的不足500头发展到2001年的27000头，牛奶产量达87320t。人均年消费牛奶13．5kg。对烟台市三个奶牛场和三个奶农户抽样调查，5月中下旬奶牛日平均产奶量为24kg，年单产约在6000kg左右，与京、津、沪大型奶牛场的7000kg至9000kg有一定差距，杂交改良牛年单产依杂交改良代数和饲养管理水平不同，约在1500～4000kg。存在的主要问题是奶牛总存栏量少，育种体制不健全，饲料配合欠科学，个体户缺乏组织，产、加、销没有形成在市场经济条件下的利益共同体等。鉴此，应利用现代生物技术，加快现有品种改良，提高奶产业的产、加、销科学组织化程度，创立烟台品牌乳品加工企业等，使烟台市奶牛业向优质、高产、高效方向发展。     

鸡MDV meq基因对鸡胚成纤维细胞p53基因表达的影响

利用TaqMan探针技术,采用实时荧光相对定量RT-PCR的方法检测了鸡马立克氏病病毒（MDV）meq基因对鸡胚成纤维细胞（Chicken embryo fibroblasts,CEF）p53基因表达的影响,并用本室改进的TRAP法测定了端粒酶活性。结果显示,meq基因激活了CEF中原癌基因p53的表达,并且48 h的表达量是72 h的18.8倍;在对CEF和转染前后48、72 h的细胞端粒酶活性测定时也发现,端粒酶活性在转染后48 h是转染后72 h的16倍。流式细胞仪检测发现meq基因使S期细胞比例较转染前有所上升,进一步印证了meq基因是MDV中致瘤的主要因素。     

调节胚胎代谢对蛋鸡激素、抗氧化及产蛋性能的影响

应用VE、VC及普鲁卡因作为胚胎调节剂对蛋鸡胚胎生长发育进行调控。225枚种蛋随机分为3组,即对照组,不采取任何处理;试验1组,采用（78%VE14μL＋25%VC20μL）/枚;试验2组,采用（78%VE14μL＋25%VC20μL＋2%普鲁卡因56μL）/枚;于入孵前,距离种蛋钝端1/4近气室处,经酒精消毒,将调节剂液注射到种蛋胚盘附近,探讨其对蛋鸡内分泌水平、抗氧化性能、免疫性能及生产性能的影响。结果表明：与对照组相比,15周龄蛋鸡激素水平,1组卵泡刺激素（FSH）、促黄体生成素（LH）水平均极显著提高（P〈0.01）;2组甲状腺素（T4）水平显著提高（P〈0.01）。39周龄时,1、2组T4水平显著升高（P〈0.05或P〈0.01）,2组孕酮（P）、胰高血糖素水平显著提高（P〈0.05）;抗氧化性能,试验组血清和肝脏中丙二醛（MDA）含量均不同程度地降低,其中2组血清MDA显著降低（P〈0.05）,其余指标差异不显著;脂类代谢方面,试验2组蛋黄胆固醇降低16.58%（P〈0.05）,1组蛋黄粗脂肪降低13.51%（P〈0.05）。对新城疫（ND）疫苗免疫的影响,试验组在注射ND疫苗后7、14、28 d抗体效价不同程度地提高,其中1组在14、28 d时抗体效价差异极显著（P〈0.01）。此外,0 d,1组的抗体效价比2组提高58.35%,差异显著（P〈0.05）;28 d,1组的抗体效价比试验2组提高29.03%（P〈0.01）;其他时间点2个试验组间差异不显著。在22~39周龄,试验1、2组平均蛋重和总产蛋量都不同程度地提高,1组尤为显著（P〈0.01或P〈0.05）,而试验组料蛋比均显著性降低（P〈0.05）。因此,通过调节胚胎代谢能明显改善出壳后蛋鸡的内分泌水平及抗氧化性能,提高产蛋性能。