水稻转录因子OsWRKY68蛋白质的表达特征及其功能特性

【目的】 水稻中有近百个WRKY转录因子家族成员,其中很多与生长发育、生物与非生物逆境胁迫应答有关。河北农业大学生命科学学院分子生物学与生物信息学实验室（molecular biology & bioinformatics lab,MBB）前期发现OsWRKY68在水稻接种白叶枯病菌后诱导表达,本研究试图进一步探究OsWRKY68的功能。【方法】 采集水稻TP309不同生长发育时期的组织样品,包括萌发期、幼苗期、分蘖期、孕穗期和开花期的根、茎、叶、叶鞘、叶枕、穗子、花药、颖壳和种子,以及非生物胁迫（4℃、44℃、48℃、淹、NaCl、PEG、恒光和恒暗）和激素处理（脱落酸、茉莉酸甲酯、水杨酸和乙烯利）的叶片,提取总蛋白质,用水稻OsWRKY68蛋白质特异抗体,通过免疫印迹（western blot,WB）技术系统调查OsWRKY68蛋白质在水稻正常发育过程中不同时期、不同组织、非生物胁迫及激素处理条件下的表达特征。构建RNAi载体,通过农杆菌介导的方法转化水稻TP309,对转基因植株进行PCR和WB鉴定,观察OsWRKY68 RNAi转基因植株的表型并测量其株高、分蘖数、穗长、小穗数和结实率等性状。【结果】 调查OsWRKY68蛋白质的表达丰度,发现OsWRKY68蛋白质在水稻正常生长发育过程中基本呈组成型表达,且在大部分组织中表达丰度差异倍数不大,但在开花期的花药中OsWRKY68表达量高于成熟穗、穗轴和颖壳;在分蘖期和孕穗期的叶鞘中不表达,仅在开花期的叶鞘中表达;在孕穗期的幼穗中,随着幼穗长度的增加其表达丰度逐渐降低。调查水稻非生物胁迫和激素处理后OsWRKY68蛋白质的表达特征,发现盐胁迫后OsWRKY68蛋白质的表达丰度随时间延长持续下降,恒光处理后OsWRKY68蛋白质表达量持续上升,3 d时明显出现一条分子质量较大的条带（记作OsWRKY68 ⁺）,且表达量逐渐增加,茉莉酸甲酯（methyl jasmonate,MeJA）和乙烯利（ethephon,ET）处理后同样也呈现OsWRKY68 ⁺蛋白质丰度的增加。对转基因植株进行鉴定和自交繁殖,对T₃代的4个OsWRKY68 RNAi转基因株系（Y316、Y317、Y326和Y337）进行PCR和WB鉴定,均表现阳性。在转基因植株中,OsWRKY68蛋白质的表达量均低于野生型TP309。对转基因植株进行表型观察和性状测量,发现与野生型相比转基因植株的株高降低、分蘖数和结实率下降等。 【结论】 OsWRKY68蛋白质在水稻正常生长发育中发挥作用,敲低OsWRKY68蛋白质的表达能影响水稻的正常生长。OsWRKY68蛋白质可能参与盐、光照、茉莉酸甲酯和乙烯介导的信号转导过程。     

Comparison of birth weight and umbilical and placental characteristics of cloned and artificial insemination-derived piglets

Somatic cell nuclear transfer (SCNT)-derived piglets have significantly higher stillbirth rate and postnatal mortality rate than artificial insemination (AI)-generated piglets. The question whether the low survival rate of SCNT piglets was related to birth weight, umbilical cord or placenta development was investigated. In this study, stillbirth rate, neonatal death rate, birth weight, umbilical cord status, placental parameters and placental gene expression patterns were compared between SCNT and AI piglets. Results showed that mortality rates at birth and during the neonatal stage of SCNT piglets were significantly higher than those of AI piglets. The incidence of abnormal umbilical cord in SCNT and SCNT-liveborn (SCNT-LB) piglets was significantly higher than in AI and AI-liveborn (AI-LB) piglets. Birth weight, placental weight, placental surface area and placental efficiency in SCNT and SCNT-LB piglets were significantly lower than those of AI and AI-LB piglets. Placental expression profiles of imprinting, angiopoiesis and nutrient transport-related genes were defective in SCNT-LB piglets compared with those in AI-LB piglets. Thus, the low survival rate of SCNT piglets may be associated with abnormal umbilical cord and placenta development. These characteristics may have resulted from aberrant expression of angiogenesis, nutrient transport, and imprinting-related genes in the placentas.     

桂皮紫萁初生叶形态发育的观察

用腐叶土培养桂皮紫萁(Osmunda cinnamomea vat.asiatica Femald)的孢子,获得有性生殖苗.观察桂皮紫萁幼孢子体最初25枚叶片形态发生的详细过程,据此讨论了叶形态与环境适应性的关系、根茎叶之间的系统演化关系以及相关的系统学意义.     

大肠杆菌毒力基因Colv、Stxs和HlyE的PCR检测(英文)

[目的]了解鸡源、猪源、食品源大肠杆菌Colv、Stxs(stx2、stx2e)、HlyE三种致病基因的存在情况。[方法]以44份鸡源、24份猪源、26份食品源的大肠杆菌菌株为试验材料,用PCR扩增方法分别对其Colv、Stxs(stx2、stx2e)和HlyE三种致病基因进行检测。[结果]检测的大肠杆菌菌株中,鸡源大肠杆菌菌株大肠杆菌素基因Colv检出率为25%,猪源大肠杆菌菌株大肠杆菌素基因Colv检出率为4.2%,食品源中没有检出;所有鸡源、猪源、食品源大肠杆菌菌株均没有检出类志贺毒素基因Stx2(Stx2e);鸡源大肠杆菌菌株溶血素E基因HlyE检出率为2.27%,猪源大肠杆菌菌株中没有检出,食品源大肠杆菌菌株溶血素E基因HlyE检出率为7.7%。[结论]大肠杆菌素基因Colv在鸡源和猪源大肠杆菌中有较高的携带率,溶血素E基因HlyE在鸡源和食品源大肠杆菌中也有一定程度的存在。     

畜禽保种群体遗传多样性的模拟

 【目的】基于微卫星标记特点,采用计算机模拟技术,探讨畜禽保种群遗传多样性的变化过程。【方法】选择30个均匀分布于基因组、具有4—10个等位基因的标记位点,位点间无相互作用;模拟产生的畜禽保种群公母比例为1﹕5、随机交配、各家系随机等量留种、群体规模保持世代恒定,世代间无重叠,群体有效大小分别为Ne=10、20、50、100和200,保种繁殖50个世代,1 000次重复。采用多态性位点数（num-p）、平均等位基因数（Na）、有效等位基因数（Ae）、观测基因杂合度（Ho）、期望杂合度（He）、稀有等位基因数（RA）、缺乏丰富位点数（NRP）作为遗传多样性度量指标。【结果】保种群体的遗传多样性总体趋势随保种世代而逐渐降低,不同群体规模遗传多样性的降低速度差异显著,相比基础群,Ne值越大,num-p、Na、Ae、Ho、He和 RA的下降速率越慢,且当Ne=100和200时,num-p基本维持50个世代不变,RA则分别增加0.86%和2.49倍;而Ne值越大,NRP的增加速率越慢。【结论】遗传漂变导致了群体内遗传多样性的丢失。小群体中遗传漂变导致的遗传多样性丢失速度比大群体更高,发生在闭锁群体水平上的有效群体规模的减少将加快基因漂变速度,从而降低保种群体内的遗传多样性。     

牛(牦牛)内寄生虫感染情况的调查及亚东璃眼蜱生活习性的观察

[目的]调查新疆疫区感染牛(牦牛)的体外寄生虫璃眼蜱优势分布种的生物学特性以及体内寄生虫的种类、感染率及危害.[方法]采用人工饲养蜱虫、寄生虫病病原(粪便)常规检查技术,进行疫区璃眼蜱优势分布种生活习性及牛(牦牛)体内寄生虫病调查.[结果]经过一循环的饲蜱试验观察和形态学鉴定:疫区璃眼蜱的优势分布种为亚东璃眼蜱,经实验室人工饲养,发现其生活史改变,74;(88/119)的幼蜱饱血后未脱落,而是蜕变为若蜱后继续吸血,由三宿主蜱变为了二宿主蜱,以上饱血若蜱蜕变期、蜕变率分别为23～33d(平均26 d)、100;;26; (31/119)的幼蜱正常饱血脱落,吸血期、蜕变期、蜕变率分别为3～9 d(平均5 d)、7～12 d(平均10 d)、83.9;(26/31).若蜱吸血期、蜕变期、蜕变率分别为6～8d(平均7 d)、25～33 d(平均29d)、88.5; (23/26);成蜱吸血期、产卵前期、产卵期、孵化期分别为4、26、20和11d.室内病原学检查结果显示:和静县巴仑台和巴音布鲁克高山草原牦牛体内寄生虫感染率分别为69.05;(29/42)、85.14;(63/74),总感染率为79.31; (92/116),且大多为混合感染,线虫感染率均高于其它寄生虫.[结论]亚东璃眼蜱是新疆优势种,可以根据其生物学习性制定相关防治措施,同时发现被检区牦牛体内寄生虫感染比较严重,急需制定切实可行的防治措施.     

微波辅助提取万寿菊颗粒中总黄酮的工艺研究

[目的]探索万寿菊中总黄酮提取的最佳工艺。[方法]设计正交试验,采用微波辅助有机溶剂法对万寿菊中总黄酮提取方法进行研究。[结果]微波辅助提取万寿菊中总黄酮的最佳工艺条件为：70%乙醇,固液比1∶8,微波功率300W,微波辅助回流1.0h,温度70℃,提取2次。[结论]采用该工艺提取万寿菊中总黄酮浸膏得率为15.86%,浸膏中总黄酮含量为44.01%,总黄酮收率达到6.98%。万寿菊颗粒渣中总黄酮的提取工艺得到优化。     

祛风化痰针刺法改善假性球麻痹吞咽功能障碍的多中心临床观察

目的系统观察祛风化痰针刺法改善假性球麻痹患者吞咽功能障碍的作用。方法将240例确诊为风痰型假性球麻痹的患者随机分为治疗组和对照组,每组各120例,分别给予祛风化痰针刺法和模拟针刺法治疗,取穴风池(双)、完骨(双)、廉泉、丰隆(双)。每天上、下午各针刺1次,连续6 d为1疗程,疗程间休息1 d,治疗4个疗程。采用洼田饮水试验方法于治疗前、治疗2、4个疗程后进行吞咽功能级别评定,4个疗程后进行疗效评定和比较。结果第2个疗程结束后两组患者的吞咽功能评级与治疗前比较有较显著的提高,差异有统计学意义(P<0.01),治疗组优于对照组(P<0.05);与治疗前比较,第4疗程结束后吞咽功能评级进一步显著提高,差异有统计学意义(P<0.01),治疗组较对照组更优,差异有统计学意义(P<0.01);治疗组的治愈率、显效率和总有效率均显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。结论祛风化痰针刺法改善假性球麻痹患者吞咽功能有肯定、持续且显著的作用,有较大的临床应用价值。     

抗逆、丰产夏谷新品种沧谷3号的选育

沧谷3号是以鲁谷10号为母本,引F3(日朝谷×80056)为父本杂交选育而成。沧谷3号根系发达,茎秆粗壮,抗倒伏、抗旱、抗病能力强,穗大金黄色,叶片功能期长,绿叶成熟,高产、稳产。2001-2002年参加华北地区夏谷区域试验,平均产量4 972.5 kg/hm2,比对照豫谷5号增产0.6%;2002年参加华北地区夏谷区域试验生产试验,平均产量4 812.0 kg/hm2,比对照增产10.1%。2002—2004年在河北省累计推广种植面积达5.5万hm2。     

基于门限自回归的我国羊肉价格波动分析

羊肉价格的适度上涨会刺激我国羊肉产业的发展,但上涨过快,则会损害我国羊肉市场的稳定,对于政策制定者来说,确定羊肉价格大幅上涨的先期指标,以在恰当时机进行合理和适度地调控是非常必要的,可通过建立两体制TAR模型为政府实施调控的时机提供参考值.选取的羊肉月度价格时间序列样本区间为1994年6月至2014年2月,TAR模型估计结果表明,我国羊肉价格同比指数序列门限值为4.678,对应的价格同比指数为107.57％;如果羊肉价格同比指数高于107.57％,羊肉价格波动幅度将会增大,此时会对羊肉市场产生较大冲击,政府需要及时采取调控措施;如果羊肉价格同比指数低于107.57％,那么价格指数的波动相对较为稳定,此时政府不必采取调控措施.另外,政府在制定调控政策时还要充分考虑政策实施效果的时滞性,避免推动羊肉价格产生较大波动.