布鲁氏菌M5-90△WboA基因缺失株的构建及免疫效果的初步评价

为获得毒力较弱并能区分自然感染和疫苗免疫的布鲁氏菌候选疫苗株,本研究用PCR方法扩增WboA基因的上下游同源臂序列,构建重组质粒pGEM-7zf-△WboA-Sac,电转化布鲁氏菌M5-90感受态细胞,筛选布鲁氏菌疫苗株M5-90的WboA基因缺失株,并对获得的M5-90△WboA遗传稳定性、毒力、免疫保护性、抗体水平等指标进行检测.实验结果表明M5-90△WboA株的毒力比M5-90株明显减弱,差异极显著(p＜0.01),体液免疫和细胞免疫结果表明M5-90△WboA株与亲本M5-90株相比差异不显著(p＜0.05),M5-90△WboA株和亲本株的保护率分别为10％和20％,表明M5-90△WboA株与M5-90株具有相似的保护性.凝集试验和western blot试验显示M5-90△WboA株免疫小鼠的血清反应结果为阴性.本研究构建的布鲁氏菌基因缺失株M5-90△WboA具有较好的遗传稳定性,毒力比亲本株更弱,免疫保护性与亲本株相当,并能以血清学检测方法区分野毒株感染和缺失疫苗株免疫的动物.     

伪狂犬病病毒野毒荧光定量PCR检测方法的建立

根据伪狂犬病病毒gE基因的序列,设计和合成了一对特异的可用于检测伪狂犬病病毒野毒的PCR引物和一条Taqman荧光探针,采用Li ght Cycl e 480荧光定量PCR仪,建立了一种可实时定量检测伪狂犬病病毒野毒的荧光定量PCR技术。该方法的线性范围为1.0×102～1.0×1010拷贝,灵敏度可达4拷贝。检测速度快,仪器的运行时间仅为1 h。对13株猪伪狂犬病病毒野毒进行了检测,结果均为阳性;与伪狂犬病gE基因缺失疫苗、猪细小病毒和鸭瘟病毒无非特异性反应。与病毒分离培养比较,该方法具有快速、灵敏、特异、定量、重复性好等优点,可望用于临床上伪狂犬病病毒野毒与疫苗毒的区分,伪狂犬病病毒野毒的检测和病毒分布的研究等。     

鸡的气雾免疫

气雾免疫,省工省力,且对呼吸道有亲嗜性的疫苗特别有效(例如鸡新城疫Ⅱ、Ⅳ系弱毒疫苗和传染性支气管炎弱毒疫苗等),所以近年来采用气雾免疫的鸡群正在逐渐增多。     

雏鸡感染IBDV后法氏囊显微和超微结构的观察

运用光镜、电镜技术，观察了雏鸡实验感染传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）后，其法氏囊显微和超微结构的动态变化。光镜观察表明，在感染早期，淋巴滤泡髓质部的淋巴细胞发生坏死，间质轻度水肿。感染后４ｄ，淋巴滤泡皮质内的毛细血管呈一典型的出血带环绕髓质，髓质部的淋巴细胞多已坏死、崩解。继之，整个淋巴滤泡呈网络状或囊状空泡。感染６ｄ以后，固有膜内的网状细胞和毛细血管大量增生，新的淋巴滤泡形成。电镜观察证明，在感染早期，淋巴细胞质内的内质网与核膜扩张，线粒体嵴紊乱或空泡化。继之，淋巴细胞核液化，细胞坏死、崩解。巨噬细胞和多核巨细胞大量出现，其胞浆内含有大量吞噬体和吞噬泡。     

如何检疫上市白条鸡

在上市白条 鸡中，经常碰到 掺杂的病死鸡、 注水鸡，如何检 验，现介绍如下： １看皮肤看 翅膀内侧，健康 鸡宰后毛孔闭 合，脱毛干净，皮 肤完整，平滑细 腻，色泽鲜艳，粉 红色或白色，有 光泽，有弹性，翅 内侧血管不显露；如脱毛不净，皮肤破损，呈紫红色而无光泽，毛囊出血，翅内血管显露清晰，则是死鸡或急宰放血不良的病死鸡。２看放血刀口正常宰杀鸡喉部放血不整齐，血液侵染较深；如无放血刀口或有刀口其切面平直，又无血液浸染，是死鸡或死后又拉一刀。３看头部健康鸡宰后鸡头洁净，鸡冠和肉髯呈玫瑰色，眼有光泽微闭合，若鸡头…     

不同复合酶对断奶仔猪生产性能和饲料养分利用率影响的比较研究

选用25～27日龄断奶的"长×大"二元杂交断奶仔猪96头[平均体重为(7.31±0.14)kg],以研究不同复合酶对断奶仔猪生产性能和饲料养分消化率的影响。试验仔猪按完全随机区组设计分为4个处理,每个处理3个重复,每个重复8头仔猪,试验期14 d。对照组饲喂基础日粮,试验组A、B、C在基础日粮中分别添加不同的复合酶A、B、C。试验结果表明:基础日粮中添加复合酶A、B、C后,断奶仔猪的平均日增重分别提高了7.58%(P<0.05)、10.15%(P<0.05)和5.74%(P<0.05),料重比分别降低了5.47%(P<0.05)、8.59%(P<0.05)和6.25%(P<0.05),有机物、粗蛋白和磷的消化率显著提高(P<0.05),粗蛋白的消化率分别提高了2.96%、3.3%和2.26%。在3种复合酶中,以复合酶B的效果为最好,其次为复合酶A和C。     

稀释液中添加谷氨酰胺对绒山羊冷冻精液品质的影响

在绒山羊冷冻精液稀释液中分别添加0mmol/L、2.5mmol/L、5.0mmol/L、7.5mmol/L和10.0mmol/L五个梯度的谷氨酰胺,以确定冷冻效果最好的谷氨酰胺添加浓度,优化绒山羊冷冻稀释液配方。结果表明:添加5.0mmol/L谷氨酰胺组精子的活率、顶体完整率和生存指数均极显著或显著地高于其他试验组(P0.01,P0.05),而畸形率极显著或显著低于其他试验组(P0.01,P0.05);在脂质过氧化反应和抗氧化酶活性方面,添加5.0 mmol/L组MDA浓度极显著低于其他试验组(P0.01),而CAT活性极显著高于其他试验组(P0.01)。总之,在稀释液中添加5.0mmol/L谷氨酰胺,在冷冻—解冻过程中能起到很好的保护精子的作用。     

微滴式数字PCR定量检测鸡毒支原体方法的建立

为建立微滴式数字PCR（droplet digital PCR,ddPCR）定量检测鸡毒支原体（Mycoplasma gallisepticum,MG）方法,以MG的mgpc基因序列为目的序列,在其保守区域内设计合成了1对特异性引物和1条探针,通过各反应条件优化,建立了检测MG的ddPCR方法,并测定了建立方法的特异性、敏感性以及重复性。结果显示：建立方法的最佳引物浓度为20 μmol/μL,探针浓度为10 μmol/μL,退火温度为55 ℃;该方法只检出MG,没有检出鸡滑液囊支原体、禽衣阿华支原体、禽流感病毒、鸡新城疫病毒、鸡传染性支气管炎病毒、鸡传染性喉气管炎病毒、禽脑脊髓炎病毒、禽偏肺炎病毒、禽呼肠孤病毒、鸡沙门氏菌和鸡大肠杆菌,且相互间没有交叉反应;本方法最低检测MG重组质粒标准品的检测限为3.9拷贝/μL。重组质粒标准品浓度在3.9~41 025拷贝/μL范围内,绘制的ddPCR绝对定量曲线与测得值呈良好的线性关系（R2 = 0.999）;3次重复检测试验结果的变异系数均小于5%。对采集的60份病鸡喉拭子、气囊拭子及肺样品进行MG检测,结果ddPCR方法的阳性检出率（15.0%）高于荧光定量PCR方法（13.3%）。结果表明,本研究建立的ddPCR方法定量检测MG特异性强,灵敏度高,重复性好,为绝对定量检测MG提供了技术手段。     

我国畜间布鲁氏菌病流行特点及因为分析

畜间布鲁氏菌病近年来在我国呈高发态势,已严重威胁畜牧生产和人类健康。本文通过搜集整理大量数据,结合疫情报告资料和定点监测调查资料,对我国近20年畜间布病流行情况及特点进行总结,系统分析造成我国畜间布病疫情上升的原因,为制定科学防控对策奠定基础。     

饲粮中色氨酸对0～3周龄肉仔鸡生长性能及血液生化指标的影响

试验旨在研究探讨在玉米-豆粕型饲粮中添加不同水平色氨酸对0～3周龄AA肉仔鸡生长性能和血液生化指标的影响。试验采用单因素完全随机分组设计,选择1日龄AA肉仔鸡180只,随机分为5个处理组,每个处理6个重复。试验期间各组饲粮中色氨酸添加水平分别为0、0.03%、0.06%、0.09%、0.12%。试验结果表明:①色氨酸添加水平为0.06%时,可显著增加仔鸡平均日采食量和平均日增重(P0.05),但料重比变化不显著(P0.05);②肉仔鸡的血液生化指标,各试验组大部分数据和对照组比较差异显著(P0.05),其中III组的总蛋白含量最高,总胆固醇、尿素氮、葡萄糖的含量最低;IV组的甘油三酯含量最低。综合分析,在0～3周龄肉仔鸡玉米-豆粕型日粮中添加0.06%水平的色氨酸为宜。