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AIM: To construct the eukaryotic expression vector CD80-IgG by fusing the cDNA encoding extracellular portion of murine CD80 to the 5'-terminus of cDNA encoding Fc fragment of murine immunoglobulin G1 and to express the fusion protein in Chinese hamster ovary (CHO) cells. METHODS: The two cDNAs was amplified by PCR respectively from plasmid pcDNA/B7 containing the full-length cDNA of murine CD80 from murine spleen cells, and cloned to the eukaryotic expression vector pcDNA3.0 by directional cloning. The resultant recombinant plasmid pcDNA/CD80-IgG was transfected into CHO cells with liposome transfection reagent. The stably expressing cells were obtained by G418 screening. Western blot, Dot ELISA, and flow cytometry were used to detect the expression of the fusion protein and its immunological activity. RESULTS: DNA sequencing verified the correction of the construction of recombinant plasmid pcDNA/CD80-IgG. The expressed fusion protein was detected in the supernatant of transfected CHO cells and the molecular weight of the protein was similar to what we expected. Its immunological activity was also established. CONCLUSION: The recombinant plasmid pcDNA/CD80-IgG was successfully constructed and it expressed the fusion protein CD80-IgG. 相似文献
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产气荚膜梭菌α毒素保护性抗原基因的克隆与核苷酸序列分析 总被引:14,自引:5,他引:14
将含产气荚膜梭菌α毒素基因的质粒pKMA100用限制性核酸内切酶BamHI和HindⅢ双酶切,经1.5%琼脂糖凝胶电泳分离、透析袋电洗脱法回收0.95kbα毒素基因片段,再将载体pET-28b(+)用BamHI和HindⅢ双酶切,然后将处理好的pET-28b(+)与0.95kb的α毒素基因片段通过T4DNA连接酶进行粘性末端连接,转化至受体菌BL21(DE3)中。经BamHI和HindⅢ双酶切分析和核苷酸序列分析,证明重组质粒pXETA1含有产气荚膜梭菌α毒素基因。确定了α毒素基因的全部核苷酸序列,并证明其具有正确的阅读框架。 相似文献
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在美丽乡村建设进程中,贵州少数民族村寨民宿业发展为地方经济发展与民族文化传
播提供了广阔的土壤,但同时也产生了一系列环境问题,需处理好环境与发展之间的关系,实现
民宿业的可持续发展。 相似文献
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不同处理对罗布麻无性繁殖的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
通过对吉林左家罗布麻引种驯化无性繁殖试验,对其根段进行药剂处理和栽培土质、越冬防寒的研究,得出用浓度为100 mg/kg的ABT生根粉浸泡过的罗布麻根出苗最好,栽培在煤灰土和砂土中的根段出苗及长势较好,用塑料布覆盖的罗布麻成活率最高,植株最高。 相似文献
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奥林618是用耐贮硬肉型番茄自交系61-3-18-15为母本,68-5-3-1为父本配制成的耐贮型番茄一代杂种。早熟性好,始花节位第8节左右。坐果率高,定植后60~65 d(天)收获,可连续采收7~14穗果实,以留7穗果计算,平均露地产量7 000~8 000 kg·(667 m2)-1,保护地可达10 000 kg·(667 m2)-1以上;果面光滑,大红色,亮度好,平均单果质量200 g左右,果形指数0.78,果肉厚0.9 cm,无绿肩,转色快且均匀;耐低温弱光、耐高湿;高抗晚疫病,中抗青枯病;耐贮运,常温下货架期达20~25 d(天)。适宜北方地区日光温室春提前、秋延后栽培以及南方地区露地越冬栽培和部分地区高山越夏栽培。 相似文献
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WU Jian-yu WANG Shu-qiu WANG Bai-xin ZHANG Ping QIN Xiao-yu KANG Yu-ming MA Xiao-ru LIANG Yan-feng WANG Fang-fang 《园艺学报》2010,26(2):233-237
AIM: To study the mechanism of diabetic cardiomyopathy and abnormality of oxygen free radicals. METHODS: The contents of myocardial cytosolic cytochrome C, mitochondria cytochrome C, mitochondrial calcium, NO, MDA and the activity of SOD and NOS were determined in diabetic rats induced by STZ. The pathological changes were observed under transmission electron microscope. RESULTS: Compared to the normal and ganoderma group, the levels of mitochondrial NO, iNOS, MDA, calcium and plasma Cyt-C in rat myocardium were higher (P<0.05), while mitochondrial Cyt-C and SOD were lowered in model group (P<0.05). The bouncary indistinct, disorganization, a focal loss of muscular fibril, myocardium mitochondria swelling, pulmonary vascular endothelial cellular swelling and obstructed lumen of the capillary were also observed under transmission electronic microscope. CONCLUSION: The findings indicate that oxyradical and lipid peroxidation might be associated with the damage of myocardial mitochondria in NIDDM rats. Cyt-C and mitochondrial calcium is also involved in the process. 相似文献
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