High level expression of recombinated hepatocyte growth factor in human umbilical cord mesenchymal stem cells

AIM: To construct a lentiviral vector encoding human hepatocyte growth factor (hHGF) for transfection,and to observe the expression of hHGF in human umbilical cord mesenchymal stem cells.METHODS: pUC-SRα/hHGF was subcloned into the expression vector pWPI to construct recombinant pWPI-hHGF.hHGF was identified by gene sequence.Recombinant lentivirus was produced by pWPI-hHGF,pAX2 and pMD2G altogether transient transfection into 293T cells using calcium phosphate method.The pWPI-hHGF and the contructed pWPI-GFP were transfected into human umbilical cord mesenchymal stem cells by the Lipofectamin 2000.Through counting by the fluorescent microscope,the efficiency of the transfection was identified.The expressions of hHGF and GFP in human umbilical cord mesenchymal stem cells were also detected.The concentration of hHGF in cell culture medium was determined by enzyme linked immunosorbent assay (ELISA).RESULTS: DNA sequence showed that hHGF cDNA was correctly inserted into pWPI vector.The positive rate of hHGF transfecting 293T cells was 100 %.Bright green fluorescence in the transfected cells was observed under the fluorescent microscope after 24 h transfection with lentiviral plasmid pWPI-hHGF-GFP,and the transfection rate reached 80%.The difference was distinct between the pWPI-hHGF group and control group in the secretive level of hHGF by Western blotting and the ELISA (P<0.01).CONCLUSION: The recombinant pWPI-hHGF plasmid was successfully constructed and efficient,stable and ectopic expression of hHGF was accomplished in human umbilical cord mesenchymal stem cells.     

Dynamics of the change in free blood serum amino acids of broiler chicks under the effect of lithium salts

The effect of lithium glycinate on the adaptive compensatory reaction in poultry during vaccinal stress is studied and its use as a stress protector is suggested.     

施用有机肥对凯特杏果实品质和产量的影响

以12年生的凯特杏为试材,连续3年进行了施有机肥处理对其果实品质和产量的影响试验,结果表明,在凯特杏果园施肥管理中应注重有机肥施入,即每667 m~2施2 800kg有机肥,可保证果实生长发育,增加果园产量和品质。     

AsiaⅠ型口蹄疫病毒VP1基因在昆虫细胞/杆状病毒中的表达

利用杆状病毒表达系统对Asia Ⅰ型口蹄疫病毒(foot-and-mouth disease virus,FMDV)VPl基因在Sf9昆虫细胞中进行表达,为研究Asia Ⅰ型FMDV VP1蛋白功能及建立Asia Ⅰ型FMDV血清学诊断方法奠定基础.采用PCR方法从pGEM-T-Easy-Asia Ⅰ型VP1质粒中扩增VP1基因,将其插入杆状病毒转座载体pFastBacHTA,构建的重组质粒pFast-BaeHTA-VPl再转入DH10Bae感受态细胞,经三重抗性与蓝白斑筛选,获得杆状病毒重组质粒Baemid-VPl,然后转染Sf9昆虫细胞.PCR鉴定证实VP1基因正确地插入到Bacmid中,成功构建了杆状病毒重组质粒Baemid-VP1,SDS-PAGE和West-ern-blotting检测结果表明,VP1基因在Sf9昆虫细胞中表达出约26.5 ku的VP1蛋白.将可溶性表达的融合蛋白用Ni-NTA亲和层析方法进行纯化,通过ELISA分析,能特异性地检测出Asia Ⅰ型口蹄疫病毒阳性血清.Asia Ⅰ型FMDV VP1基因在杆状病毒表达系统中的成功表达为Asia Ⅰ型FMDV VP1蛋白的抗原性及血清学抗体水平检测研究奠定了基础.     

呼伦贝尔黄花苜蓿区域试验研究

对呼伦贝尔黄花苜蓿进行区域试验研究结果表明：呼伦贝尔黄花苜蓿在各试验点种植均表现出较强的适应性，鲜草和千草产量与对照品种肇东苜蓿接近，3个试验点3年平均鲜草产量为33865．6kg/hm^2，干草产量为9146．2kg/hm^2，分别比对照的肇东苜蓿低0．6％和3．2％。方差分析表明二者无显著差异，具有良好的丰产性和持久性，对呼伦贝尔高寒地区严酷的自然条件具有很强的适应性，适宜在我国北方高寒地区大面积推广种植。     

几种豆科牧草种子萌发期的耐盐性

以浓度为0.6%、0.9%、1.2%、1.5%和1.8%的复盐(71%NaCl+3%CaCl2+4%MgSO4+22%K2SO4)溶液培养种子,根据初萌时间、发芽率下降百分比、发芽指数、活力指数、平均发芽速度、相对发芽率、相对发芽势和耐盐指数8个指标,应用隶属函数法确定九种豆科牧草苗期耐盐能力为沙打旺>中苜3号紫花苜蓿>东方山羊豆>小冠花>百脉根>扁蓿豆>鹰嘴紫云英>白三叶>黄花苜蓿。     

黄河流域传统果园发展现状及旅游发展潜力分析

全国重要农业文化遗产系统构成了令人叹为观止的优美人文景观,展现着传统农业生态多样性、生态系统适应性和珍贵的文化遗产。这些世代相传的农业系统构成了当代和未来农业创新和技术的基石。已公布的37个传统果园类全国重要农业文化遗产地,有14个沿黄河流域分布,是我国果业重要的发源地。拟以黄河流域的传统果园为研究对象,系统梳理其发展历史、现状及传统果园农耕系统,同时重点分析黄河流域主要果品的区位发展优劣势,最后结合传统果园的人文价值和区域经济发展因素等,综合探索传统果园的传承和利用途径,为我国果业发展提供传统农业系统和技术创新基础,也为传统果园的保护和传承发展以及农业管理部门挖掘和健全果园文化遗产保护机制提供参考。     

毛乌素沙地草地畜牧业经营模式的开发与示范

根据盐池县毛乌素沙地自然特点,坚持以发展种植业、畜牧业为主线,以科技创新为动力,开发出5种毛乌素沙地草地畜牧业经营模式并进行示范,以扩宽增加农民经济收入渠道,促进区域经济的发展,实现生态环境、经济、社会的协调发展。     

覆膜直播建植灌草复合草场技术研究

为了探索在旱作条件下人工灌丛草地的建植技术措施,研究采用带状覆膜直播技术种植科尔沁型华北驼绒藜和鄂尔多斯草木樨状黄芪,在雨季进行种植,播种后膜上灌水1次,每公顷灌水15t左右.结果显示,科尔沁型华北驼绒藜出苗率达到95％,翌年测定成活率达98％;其干草平均产量翌年为4 825 kg/hm2、第3年为8 941 kg/hm2、第4年为12 748 kg/hm2.鄂尔多斯草木樨状黄芪出苗率达到75％,翌年测定成活率达95％;其干草平均产量翌年为927 kg/hm2、第3年为1 421 kg/hm2、第4年为2 275 kg/hm2.该项技术解决了干旱、半干旱地区旱作人工草地植物的出苗、保苗困难问题,对提高灌丛草场土地利用率、提高草场产量和质量、增加草地持久力和耐牧性具有重要的意义.     

试论乡村兽医素质提高

禽流感疫情的暴发,唤醒了全社会对动物疫病的重视和关注,促使人们在重视人类疫病防治的同时,更加关注动物疫病特别是人畜(禽)共患疫