与亚洲百合无花粉性状相连锁的SRAP标记

百合是世界著名的五大鲜切花之一,在国内外花卉市场上十分畅销,有着显著的经济效益。但在百合的销售和消费过程中,存在一个突出的问题是花药产生的大量花粉污染花瓣和衣物。为了解决这一问题,目前主要采用手工摘除花药的方法,此法费时费力,不仅增加了切花的成本,而且也降低了百合的商品价值和观赏性。因此,市场迫切需要无花粉或少花粉的百合品种。本研究旨在通过研究亚洲百合无花粉分离群体的SRAP标记特征,筛选与无花粉性状相连锁的SRAP标记,为培育观赏性好、无花粉污染的百合新品种提供依据。试验以亚洲百合‘H08-03’(♀)与‘Pollyanna’(♂)杂交获得的F1代分离群体为试材。其中,‘Pollyanna’的花粉量正常,编号‘H08-03’的材料无花粉,F1代中有花粉子代和无花粉子代个数分别为54和51个基因型。采用L16(45)正交设计,对影响SRAP-PCR反应体系的Mg2+、d NTPs、Taq酶、引物和模板DNA等5因素进行4个水平的优化试验,结合正交直观分析和方差分析,对影响反应较大的几个因素进行单因素实验,以确定最为合适的PCR反应各因素的浓度。之后对两步退火温度分别进行单因素分析,最终确定亚洲百合SRAP-PCR最佳的反应体系。应用建立的SRAP体系,结合BSA法,针对无花粉和有花粉基因型分别混池,对该分离群体进行连锁分析,在无花粉池和有花粉池之间筛选272对SRAP引物组合,以期找出两基因池扩增存在差异条带的引物。将扩增存在差异的引物对用于群体的单株验证,验证该引物对在打开基因池后于分离群体单株间是否存在上述同样差异。若存在同样差异,对其特异片段进行回收、克隆和测序。经正交直观分析和方差分析的结果表明:Mg2+、Taq酶、模板DNA三个因素对亚洲百合SRAP-PCR反应影响较大,对其进行单因素梯度实验后,最终确定了亚洲百合SRAP-PCR最佳的反应体系为:20μL体系,模板DNA约100 ng,1×PCR Buffer,3.5 mmol·L-2Mg2+,0.6 mmol·L-2d NTPs,上下游引物各0.5μmol·L-2,Taq酶3 U,不足部分以dd H2O补足。PCR反应程序的两步最适退火温度第一步为35℃,第二步为53℃。应用建立的SRAP体系,对272对引物进行多态性筛选,最终筛选出53对扩增多态性丰富且稳定的引物对。53对引物中获得了与无花粉性状连锁的SRAP标记3个,分别是EM2/ME3、EM2/ME9和EM17/ME14。并成功对EM2/ME3标记扩增出的特异性片段进行回收、克隆和测序,得到了该片段376 bp的碱基序列。该标记可用于亚洲百合无花粉性状的早期分子辅助育种。     

糖渍对脱水甘蓝品质的影响

以新鲜甘蓝为试材,采用9%葡萄糖浸渍,通过测定叶绿素、维生素C含量及电导率等3项指标,研究了糖渍对脱水甘蓝品质的影响,为脱水甘蓝护绿与提高其复水性提供依据。结果表明:随着糖渍时间延长,叶绿素含量增加,浸渍15 min最高,为原始含量的2.66倍;维生素C含量降低,以30min最低,为未糖渍含量的32.07%;随着浸渍时间延长,相对电导率增加,以60min最高,增加了15.2%。     

Effect of long‐term cattle grazing on seasonal nitrogen and phosphorus concentrations in range forage species in the fescue grassland of southwestern Alberta

Numerous studies have examined the nutritive quality of fodder plants in different seasons but few have related this seasonal response to long‐term grazing intensity. Our objective was to examine the effect of long‐term grazing on the concentrations of total nitrogen, δ¹⁵N, and total phosphorus in selected forage species from the fescue grassland near Stavely, Alberta. Plants were selected from paddocks that had been stocked at 0 (control), 2.4 (moderate grazing), and 4.8 (heavy grazing) animal unit months ha^–1 for 58 years. Plant material from ten species was sampled and analyzed at monthly intervals from May to September in 2007. Total N and P concentrations were not (p > 0.05) affected by grazing for most species, but total N and P concentrations in Poa. pratensis L. were higher (p < 0.05) in grazed treatments than in the control. These results reflect an altered plant phenology through defoliation and illustrate delayed phenology in P. pratensis when grazed. The higher δ¹⁵N concentration for most species in the grazed treatments than the control is an indication of accelerated nitrogen cycling through dung and urine deposition.     

杉木子叶和下胚轴的器官发生与体胚发生

以杉木实生苗的子叶和下胚轴为起始外植体,研究了基本培养基、6-BA、TDZ、苗龄等因素对器官发生和体胚发生的影响.研究结果表明：基本培养基、6-BA、TDZ及苗龄对子叶和下胚轴不定芽发生和体胚发生均产生显著影响.DCR＋6-BA 1.0mg/L＋TDZ 0.003mg/L＋NAA 0.1mg/L是子叶和下胚轴诱导不定芽发生及下胚轴诱导体胚发生的最佳培养基;DCR＋6-BA 1.0mg/L＋TDZ 0.002mg/L＋NAA 0.1mg/L对子叶诱导体胚最有效;不定芽在DCR基本培养基中可有效伸长;1/4MS＋IBA 0.2mg/L＋NAA 0.1mg/L可有效诱导不定芽生根.     

牛源多杀性巴氏杆菌血清分型及毒力相关基因的检测研究

为确定新疆北疆部分地区疑似病例中分离的牛源多杀性巴氏杆菌（Pasteurella multocida,Pm）流行的血清型、ST型及毒力相关基因的分布情况,本研究以分离的17株牛源Pm为研究对象,采用荚膜多重PCR分型法、脂多糖多重PCR分型法（LPS-mPCR）、多位点序列分型法（MLST）及PCR方法检测17株Pm分离株的荚膜型、脂多糖型、MLST型及7类共25个毒力相关基因的分布情况。结果显示,13株Pm的荚膜脂多糖型为A：L3型,ST型均为ST1型,4株Pm荚膜脂多糖型为B：L2型,ST型均为ST44;17株Pm毒力相关基因（exbB、exbD、fimA、fur、hgbA、hsf2、nanB、oma87、ompA、ompH、plpB、psl、ptfA、sodA、sodC、tonB和tbpA）的检出率高达100%,toxA基因的检出率为0。结果表明,从新疆北疆部分地区规模化牛场疑似病例中分离的Pm主要血清型为A：L3：ST1型。     

KRTAP1-4基因多态性对陇东绒山羊羊绒性状的影响

【目的】研究角蛋白关联蛋白1-4基因（KRTAP1-4）多态性对陇东绒山羊羊绒性状的影响。【方法】以382只1岁龄陇东绒山羊为研究对象,测定其产绒量、绒层高度和绒纤维的平均直径。采集试羊皮肤、肾脏、脾脏、肝脏、肺脏、心脏组织及血样,采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测KRTAP1-4基因在6个组织中的表达谱;采用聚合酶链反应 单链构象多态性（PCR-SSCP）检测KRTAP1-4基因的多态性,分析3个羊绒表型性状间的Pearson相关性及KRTAP1-4基因型与羊绒性状间的相关性。【结果】RT-PCR发现,KRTAP1-4基因只在陇东绒山羊的皮肤中表达。在陇东绒山羊KRTAP1-4基因上检测到A、B、C、D 4个等位基因和AA、AB、AC、AD、BB 5种基因型。测序结果表明,山羊KRTAP1-4基因上有1个插入/缺失位点（c.223_252insTGCCAACCGATCTCCATCCAGACCAGCTGC）、2个同义突变的单核苷酸多态性（c.333T> C和c.573C> T）,以及1个Chi序列（c.14－c.21,5′-CCACCAGC-3′）和2个Chi-like序列（c.46－c.53,5′-ACTGGTGG-3′;c.392－c.399,5′-GCACCAGC-3′）。Pearson相关性系数显示,产绒量与平均纤维直径（r=0.324,P<0.001）及绒层高度（r=0.465,P<0.001）呈中等正相关,平均纤维直径与绒层高度呈弱的正相关（r=0.201,P<0.001）。相关性分析结果表明,AA、AB和AC型山羊个体的产绒量和绒层高度极显著低于BB型个体（P<0.01）。【结论】KRTAP1-4基因可以作为产绒量和绒层高度的分子标记用于陇东绒山羊的育种实践中。     

草酸青霉和棘孢木霉对青枯劳尔氏菌的生防效果

  目的  探究自主筛选获得的2株生防菌棘孢木霉Trichoderma asperellum QZ2与草酸青霉Penicillium oxalicum QZ8对青枯劳尔氏菌Ralstonia solanacearum(简称青枯菌)的生防效果。  方法  以青枯菌作为靶标菌,通过平板培养法、生长曲线法测定2株生防菌及其发酵液对青枯菌生长的抑制作用;通过土培试验、基于稀释涂布法测定生防菌在土壤中对青枯菌的抑制效果。  结果  平板对峙培养试验发现:棘孢木霉QZ2和草酸青霉QZ8对青枯菌有显著的抑制作用(P＜0.05),抑制率分别达80.9%和45.9%;棘孢木霉QZ2与草酸青霉QZ8生防菌高温灭菌发酵液对平板培养青枯菌,同样呈显著的抑制作用(P＜0.05),抑制率分别达33.3%和34.8%。无菌滤膜处理的未高温灭菌2株生防菌发酵液的青枯菌液培养结果表明:其D(600)显著小于未添加生防菌发酵液的对照D(600)(P＜0.05),且棘孢青霉QZ8抑制效果好于草酸木霉QZ2。土壤培养结果显示:2株生防菌处理的土壤中青枯菌的活菌数量显著低于未添加生防菌的对照(P＜0.05)。  结论  棘孢木霉QZ2和草酸青霉QZ8对青枯菌均有显著的抑制效果,可作为番茄Lycopersicon esculentum青枯病的潜在生防菌。图5表2参32     

紫茎泽兰叶绿体基因RNA编辑位点的鉴定及分析

RNA编辑是陆生植物叶绿体转录后基因表达调控的一种重要方式。本试验以紫茎泽兰为材料,利用生物信息学预测结合分子克隆及测序方法对其叶绿体的RNA编辑位点进行预测和分析。结果共预测到分布于19个基因的42个编辑位点,所有位点均为C到U的转换。编辑位点的发生位置分析发现,8个位于密码子第1位,34个位于密码子第2位,而密码子第3位未发现RNA编辑事件。同时,利用RT-PCR方法对其中4个基因的编辑位点进行验证,鉴定发现10个真实发生的编辑位点。进一步分析这10个位点发生编辑后对其编码蛋白质跨膜结构域和二级结构的影响,结果表明,ndhB-467的编辑会引起蛋白质跨膜结构的增加,ndhB-149的编辑会引起蛋白质二级结构的改变。     

利用BIL群体定位水稻垩白粒率QTL

以粳稻品种南粳35和籼稻品种N22构建的回交重组自交系(BIL)群体为研究材料,于不同年份对控制水稻垩白粒率的QTL进行定位。结果表明,BIL群体中,垩白粒率在不同年份均为偏向高垩白亲本的连续分布,表现为数量性状特征;利用Win QTLcart 2.5软件共检测到6个控制垩白粒率的QTL,分别位于第2、2、3、6、8和12染色体上,单个QTL对表型的贡献率介于8.96%~12.51%,加性效应值介于8.38%~14.36%,除qPGWC-6增加垩白粒率的基因来自N22外,其余QTL增效基因均来自南粳35。利用QTLNetwork 2.0软件2a共检测到3个QTL,分别位于第5、6和8染色体上,其中qPGWC-6和qPGWC-8与Win QTLcart2.5检测的位点相同,没有检测到上位性QTL对垩白粒率的影响。     

紫菜加工研究进展

紫菜营养丰富,是天然的保健食品。主要分析了紫菜产品的加工现状及加工过程中存在的问题,并对紫菜加工有所展望。