Identification of organic acid-related genes and their expression profiles in two pear (Pyrus pyrifolia) cultivars with difference in predominant acid type at fruit ripening stage

‘Yandangxueli’ is a pear cultivar with predominant citric acid in the ripe fruit, different from most of pear cultivars such as ‘Gengtouqing’ in which malic acid is the predominant acid type. It was found that ‘Yandangxueli’ accumulated citric acid for three times against that in ‘Gengtouqing’ at fruit ripening stage. To investigate the mechanism of citric acid accumulation in ‘Yandangxueli’, organic acids content, gene expression and enzyme activity were studied in both cultivars. Five genes, Pp:mtCs, Pp:cyAco, Pp:cyIdh, Pp:mtMdh and Pp:cyMe which encoded citric synthase (CS), cytosolic aconitase (cyACO), NADP-dependent isocitrate dehydrogenase (NADP-IDH), NAD-dependent malate dehydrogenase (NAD-MDH) and NADP-dependent malic enzyme (NADP-ME) respectively, were identified from pear fruit. Their expression profiles and the corresponding enzyme activities were determined throughout fruit development in both cultivars. Results from these enzymes indicated that there were no strict relationship between gene expression, enzyme activity and citric acid accumulation. Expression analysis for two Py:vVAtp genes encoding vacuolar H⁺-ATPase A subunit and one Py:vVpp gene encoding Vacuolar H⁺-pyrophosphatase showed that they were all with up-regulated expression at the later development stage of ‘Yandangxueli’ but with down-regulated expression in ‘Gengtouqing’. Therefore, it is concluded that the different ability in citric acid transportation and storage might be involved in the high citric acid content in ‘Yandangxueli’.     

果园间伐对梨叶片叶绿素荧光特性的影响

在15年生梨树高光效开心树形果园进行了间伐试验,测定并比较了间伐与未间伐果园梨树树体东、西侧叶片的叶绿素荧光参数,通过PSII的电子传递速率(ETR)、PSII的实际光合量子产量(Y(II))、调节性能量耗散的量子产量(Y(NPQ))以及非调节性能量耗散的量子产量(Y(NO))对光合有效辐射(PAR)的响应曲线,并得出PAR-ETR响应曲线的拟合参数。结果表明,与未间伐果园相比,成龄梨园间伐后梨树树体东、西侧叶片的ETR(最高可稳定至130μmol/(m2·s)左右)和Y(II)(最高可稳定至0.3左右)较高,Y(NPQ)较低(最低稳定在0.2左右),Y(NO)保持在一定范围内(0.5~0.7),且具有较高的最大电子传递速率(ETRmax)(最高可达152.4μmol/(m2·s)左右)、最小饱和光强(Ik)(最高可达510.3μmol/(m2·s)),表明间伐能够提高果园梨树叶片的光能利用效率。     

Dvl1及其突变体腺病毒载体的构建与在MSCs中表达鉴定

Dvl1及其结构缺失突变体ΔDIX（dsh and axin）和ΔDEP（dsh,Egl-10 and pleckstrin）腺病毒载体的构建并验证其在MSCs（mesenchymal stem cells）中的表达情况。将目的基因定向克隆至pAdTrack-CMV穿梭载体上,并经PmeⅠ线性化后在BJ5183细菌中与pAdEasy-1骨架质粒同源重组,获得重组腺病毒载体,在QBI-293A细胞中包装及扩增,实时荧光定量PCR和Western bolt验证Dvl1在MSCs中的表达情况。经PCR、PacⅠ单酶切鉴定及测序分析,成功构建Ad-Dvl1、Ad-ΔDIX和Ad-ΔDEP腺病毒载体,目的基因序列与GenBank报道一致,并选出150 MOI为最适感染MSCs的感染复数,成功构建了Ad-Dvl1、Ad-ΔDIX和Ad-ΔDEP腺病毒载体,并获得高滴度的病毒子,qPCR和Western blot证实Dvl1在MSCs中高表达并增加了β-catenin在细胞中的累积,为进一步研究Dvl1在MSCs迁移过程的作用奠定了基础。     

白藜芦醇和褪黑素对绵羊胎儿成纤维细胞转染及卵母细胞体外成熟的影响

试验旨在利用白藜芦醇(Re)和褪黑素(MT)提高绵羊胎儿成纤维细胞电穿孔转染(电转)效率、优化卵母细胞体外成熟体系,以提高转基因动物生产效率。将绵羊胎儿成纤维细胞分为6组:对照组、添加白藜芦醇高、中、低(R^-5、R^-6、R^-7)3种浓度组及白藜芦醇和褪黑素联合添加组(R^-5M^-5、R^-6M^-7),通过电转效率和细胞凋亡情况确定电转体系优化方案;通过对细胞周期、线粒体膜电位及活性氧(ROS)的检测研究其作用机制。将绵羊卵母细胞分为对照组及白藜芦醇和褪黑素(R^-5M^-5、R^-6M^-7)联合添加组,通过绵羊卵母细胞体外成熟后卵丘细胞扩展、第一极体排出及体外受精胚胎的卵裂率检测其对卵母细胞体外成熟的作用。研究结果显示,分离的绵羊胎儿成纤维细胞P3代增殖旺盛,细胞生长曲线呈典型的S型;与对照组相比,所有试验组胎儿成纤维细胞的电转效率均显著提高(P<0.05),R^-5M^-5组电转效率最高;R^-6M^-7组显著降低细胞凋亡率(P<0.05),R^-5、R^-6、R^-5M^-5和R^-6M^-7组均显著促进细胞增殖(P<0.05);R^-6、R^-7、R^-5M^-5和R^-6M^-7组G1期细胞增加,S期细胞相对减少,但差异均不显著(P>0.05);R^-6、R^-7、R^-5M^-5和R^-6M^-7组成纤维细胞内ROS水平均显著降低(P<0.05),R^-6、R^-5M^-5和R^-6M^-7组线粒体膜电位均显著增加(P<0.05);R^-6M^-7组显著促进绵羊卵丘细胞扩展、提高卵母细胞第一极体排出率和体外受精胚胎发育能力(P<0.05)。综上,白藜芦醇和褪黑素可以优化绵羊胎儿成纤维细胞电转体系,提高卵母细胞体外成熟效率,为白藜芦醇和褪黑素在转基因动物生产中的应用提供参考依据。     

拔节期氮肥运筹对不同滴灌量下冬小麦光合特性及产量的影响

为探明拔节期氮肥运筹对不同滴灌量下冬小麦光合特性及产量的影响,在大田滴灌技术条件下,以‘新冬41号’为试验材料,研究4种拔节期氮肥运筹处理[N0(0 kg/hm²)、N1(90 kg/hm²)、N2(180 kg/hm²)、N3(270 kg/hm²)]对3种不同滴灌量[W1(1500 m³/hm²)、W2(3000 m³/hm²)、W3(3450 m³/hm²)]下冬小麦叶绿素含量（SPAD值）、叶面积指数(LAI)、叶片光合特性及产量的影响。结果表明,在3种滴灌量下各氮肥处理冬小麦拔节至乳熟期叶片SPAD值均呈“先增后降”的变化规律,最大值均在灌浆期;LAI呈现“先增后降”的变化规律,在孕穗期达最大。在同一施氮水平下,滴灌量增加,叶片的净光合速率(Pn)、蒸腾速率(Tr)、气孔导度(Gs)均增加,而胞间CO₂浓度(Ci)则降低。滴灌量较低时（W1处理）,增加拔节期施氮量能有效提高滴灌冬小麦的有效穗数、穗粒数、千粒重、产量和收获系数;水分充足时（W2、W3处理）,增加拔节期施氮量反而不利于产量的提高。综合考虑各项产量指标及氮肥利用效率得出,在滴灌量3000 m³/hm²条件下,拔节期施氮量180 kg/hm²时,滴灌冬小麦籽粒产量较高,氮肥利用率最大,可供生产参考。     

减氮施肥对菠菜生长发育及品质的影响

以菠菜为试材,采用随机区组方法,研究尿素不同施肥处理对菠菜生长发育的影响,以期达到菠菜生产合理施肥的目的 .结果 表明:适量的减氮施肥对菠菜植株生长发育及生理指标影响不显著,但过量的减施会显著影响菠菜的株高和产量.随着施氮量的减少,菠菜的维生素C和可溶性糖含量均显著增加.可溶性蛋白质含量有所下降,品种间菠菜硝酸盐含量下降及草酸含量下降,分别达到显著水平.综合比较,以"夏丽"品种在减氮20％处理下效果最佳.     

FGF4在肺癌细胞体内和体外中表达差异的研究

FGF4已经被证明是癌基因,它涉及肿瘤的生长和转移,为了解FGF4的表达与肿瘤微环境的关系。我们利用FGF4抗体通过免疫组化对一名肺癌患者癌旁,癌组织,癌组织小鼠移植瘤,二次移植瘤以及原代培养的细胞爬片进行FGF4检测,探究其表达差异。通过对比癌组织与对照组（癌旁组织）,FGF4在癌巢中高表达;同样,移植瘤与二次移植瘤的癌巢中与癌旁组织比较,FGF4表达相对较高;但是将癌组织进行原代培养后,免疫组化检测细胞爬片FGF4,发现仅有5%±0.21%的肿瘤细胞表达FGF4,对照蛋白Cytokine作为肿瘤标记物,则在100%的肿瘤细胞中表达。研究提示免疫组化检测到FGF4在体内和体外表达不同,提示肿瘤细胞FGF4的表达与肿瘤微环境调控密切相关,肿瘤微环境对肿瘤细胞的FGF4的调控有着重要作用。     

浅谈苄·二氯对抛栽水稻的药害及预防措施

针对当前兴业县高峰镇抛秧田应用面积最广的除草剂苄·二氯因使用不当造成水稻药害的现状,进行深入的调查研究,找出造成药害的原因,提出切实可行的预防措施。     

进口越南屠宰用活猪重大动物疫病传入风险评估

为分析进口越南屠宰用活猪传入重大动物疫病的风险,探讨进口越南屠宰用活猪的可行性,参照世界动物卫生组织以及澳大利亚、新西兰等的进口风险分析技术,采用定性评估方法,开展非洲猪瘟、口蹄疫、猪瘟、猪繁殖与呼吸综合征等4种进境一类重大动物疫病传入释放评估、接触发生评估和后果评估。评估认为,非洲猪瘟、口蹄疫、猪瘟、猪繁殖与呼吸综合征等疫病具有"高"传入风险,可随活猪引进病原体,并且能够对我国养猪业产生不利影响,因此目前不能接受其进口。针对"高"传入风险,需要制定严格的降低疫病传入风险管理措施,包括严格产地要求、加强境外预检、指定口岸入境、强化隔离检疫、建立生物隔离区。本研究对我国动物产品进口贸易政策及检疫措施的制定提供了有力参考。