牛抵抗素多克隆抗体的制备及ELISA检测方法的建立

用纯化的可溶性重组牛抵抗素蛋白免疫健康家兔,制备了多克隆抗体,并对多克隆抗体进行了纯化、效价测定、特异性检测,初步建立了检测牛抵抗素的间接ELISA方法。     

分子生物学技术在猪瘟诊断中的应用

猪瘟是由猪瘟病毒引起的一种急性、发热性、接触性传染病,可引起各种年龄猪发病.随着对猪瘟病毒研究的深入,猪瘟在一定程度上得到有效的控制.但是近年来,世界各国流行的猪瘟在流行病学、临床症状和病理变化等方面出现了一些新的变化,猪瘟的防控出现了许多新的情况.早已宣布消灭了猪瘟的一些欧洲国家又报道有猪瘟发生.我国猪瘟的发病率亦呈上升趋势,严重威胁着我国养猪业的发展,给养猪业造成极大的经济损失.论文综述了猪瘟分子生物学诊断技术的研究进展,为猪瘟的及时诊断提供参考.     

内毒素对肝脏p53表达及Ca2+浓度的影响

为探讨内毒素在致大鼠肝损伤过程中对肝脏p53表达及Ca2+浓度的影响,将48只SD大鼠随机分2组:Ⅰ组为NS对照组;Ⅱ组为ET致病组,2组大鼠分别于第3、4、8、12h每组各处死6只,采集肝脏分别用于p53表达的Western-blotting检测和Ca2+浓度的FCM检测。结果显示,Ⅱ组p53的表达明显高于Ⅰ组(P<0.01),且Ⅱ组一直呈上升趋势;Ⅱ组Ca2+的荧光指数明显高于Ⅰ组(P<0.01),且一直呈上升趋势。结果表明,ET能有效上调肝细胞p53蛋白的表达及Ca2+浓度。     

不同湿度和氨水平对肉仔鸡抗氧化性能及肉品质的影响

本研究旨在探讨鸡舍内不同湿度和氨浓度对肉仔鸡机体抗氧化性能和肉品质的影响.试验选用健康、体质量相近的21日龄AA雄性肉仔鸡192只,随机分为2组.一组为高氨组(暴露于70 mg·kg-1氨气,H),另一组是低氨组(暴露于30 mg·kg-1氨气,L).其中每一组的一半分别置于60％湿度(对照组,C),另一半置于35％湿度(处理组,T),这样组成4个试验组,对照1:60％湿度+30 mg·kg-1氨水平组(C+L)、对照2:60%湿度+70 mg·kg-1氨水平组(C+H)、处理1:35％湿度+30 mg·kg-1氨水平组(T+L),以及处理2:35％湿度+70 mg· kg-1氨水平组(T+H),试验期21 d.试验结束时测定肉仔鸡生产性能,血液及肌肉抗氧化性能和肉品质相关指标.试验结果表明,高氨(70 mg· kg-1)水平显著降低肉仔鸡结束体质量,平均日采食量,日增体质量,血液及肌肉中总抗氧化力及肉仔鸡宰后45 min时的胸肌a*值(P＜0.05);增加了胸肌存放5d时硫代巴比妥酸反应物水平(TBARS)含量,胸肌滴水损失率,宰后45 min时的胸肌b*值(P＜0.05)和L*值(P=0.054)及肌肉剪切力(P=0.075).低湿(35％相对湿度)处理降低了肉仔鸡试验结束体质量(P＜0.05),平均日采食量(P＜0.05)及平均日增体质量(P=0.072),胸肌中超氧化物歧化酶及谷胱甘肽过氧化物酶活性(P＜0.05)及宰后45 min时的胸肌L*值(P=0.053);增加了肌肉剪切力(P=0.057)和胸肌存放5及7d时的TBARS含量(P＜0.05).与低氨对照组(C+L)相比,高氨低湿组处理组(T+H)肉仔鸡的试验结束体质量、平均日采食量、平均日增体质量、血清总抗氧化力、胸肌中总超氧化物歧化酶及谷胱甘肽过氧化物酶活性,胸肌宰后45 min a*值均显著降低(P＜0.05),而宰后5及7d肌肉中TBARS含量、肌肉中滴水损失及肌肉剪切力均显著提高(P＜0.05).本研究结果揭示肉仔鸡舍内高氨(70 mg·kg-1)及低湿度均显著降低了肉仔鸡生产性能、机体抗氧化能力及肌肉品质,且低湿度环境加剧了高氨的不良影响.     

非肌肉肌球蛋白Ⅱ型重链A单克隆抗体的制备及其靶位点区域的鉴定

为制备非肌肉肌球蛋白Ⅱ型重链A(NMHC-II A)的单克隆抗体(MAb),本研究将编码NMHC-Ⅱ A羧基端1 651～1 960氨基酸的表达重组质粒转化到大肠杆菌感受态细胞Rosseta中诱导表达,重组蛋白纯化后免疫BALB/c小鼠,分离小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞用PEG 4000介导融合。ELISA方法检测筛选阳性杂交瘤细胞,制备腹水并纯化MAb,以间接免疫荧光和免疫沉淀方法鉴定MAb的特异性,western blot检测MAb靶位点区域。结果表明,通过筛选得到1株稳定分泌抗体的杂交瘤细胞系,其抗体亚型为IgG1,细胞培养上清和腹水效价分别为1∶2 560和1∶1.0×106;该MAb能够特异性结合相应抗原,并结合Marc-145细胞;western blot结果显示该抗体与NMHC-Ⅱ A的1 812～1 894氨基酸位点结合。该抗体的制备为研究NMHC-Ⅱ A在猪繁殖与呼吸综合征病毒感染细胞中的作用奠定了基础。     

贵州小型猪消化道嗜银细胞的分布及形态学观察

为了观察贵州小型猪(Sus scrofa domestica var.mino Guizhounensis Yu.)消化道嗜银细胞的分布及形态,试验应用改良的Pascual双重银染法显示贵州小型猪消化道黏膜的嗜银细胞。结果表明:除食管外,贵州小型猪消化道各部位均有嗜银细胞的分布,主要位于固有层腺泡上皮细胞之间,黏膜上皮细胞之间很少;细胞分布密度以胃体最高,其次为贲门、胃窦,结肠最低;嗜银细胞形态以锥体形最常见,此外还可见圆形、卵圆形、梭形或不规则形等;细胞的突起可指向腺泡腔、腺泡上皮细胞或固有层的结缔组织。说明贵州小型猪胃肠黏膜内有分布广泛、形态多样的嗜银细胞,可能是贵州小型猪胃肠道强大而复杂的内分泌功能的组织学基础。     

不同淹水频率洪泛区湿地土壤氨挥发研究

在向海洪泛区湿地以不同淹水频率划分垂直河道方向的5个典型样区(常年淹水洪泛区、一年一遇洪泛区、五年一遇洪泛区、十年一遇洪泛区和百年一遇洪泛区),应用通气法在芦苇生长季,分别于7,9和11月对各样地土壤氨挥发速率进行测定,结果表明,研究区9月土壤氨挥发速率最高,11月次之,7月土壤氨挥发速率最低,且差异显著,7,9,11月实验期土壤氨挥发平均速率分别为0.175,1.155,0.651 mg/(m²·h);7月不同淹水频率的样地间氨挥发速率无显著差异,9月沿淹水频率增加方向土壤氨挥发速率呈现“U”型,即淹水频率最低和最高的样地土壤氨挥发速率高,五年一遇洪泛区湿地土壤氨挥发速率最低,11月的变化趋势则与9月相反,五年一遇和一年一遇洪泛区湿地土壤氨挥发速率较其他样点略高;此外,放牧等干扰明显加剧了土壤氨挥发。     

H6亚型禽流感病毒荧光定量RT-PCR检测方法的建立

本研究旨在建立一种快速、特异、敏感的H6亚型禽流感病毒(AIV)实时荧光定量RT-PCR检测方法。针对H6亚型AIV的血凝素(HA)基因序列保守区设计1对引物,并优化反应条件。结果表明,该方法的最低检测限为1.07×101拷贝质粒DNA,与常规PCR相比,灵敏度高出1 000倍;扩增产物的熔解曲线分析只出现1个单特异峰,无引物二聚体,Tm值为(80.81±0.08)℃,组内变异系数为0.08%～0.99%,组间变异系数为1.85%,可重复性好;对H1、H3、H5、H7、H9亚型禽流感病毒及新城疫病毒等其他呼吸道病原体无扩增;检测快速,从样本处理到报告结果仅需3.5 h。     

发酵床垫料饲养荷斯坦牛试验报告

选择饲养密度、品种一致的荷斯坦牛,分为试验组和对照组,对照组砖面平养,试验组采用发酵床垫料,饲养试验中对产量、环境卫生等指标进行测定。结果显示,试验组的产奶量、料奶比等指标明显好于对照组;试验组牛舍NH3浓度低于对照组,粪便降解充分,奶牛均匀躺卧在垫料上。说明建立的试验方法可行,为生物环保养殖技术应用于奶牛生产提供参考依据。     

两种方法所获鸭破骨细胞数量及活性比较

对直接从鸭骨髓腔机械分离的成熟破骨细胞（osteoclasts,OC）和由鸭骨髓来源单核细胞融合成的OC样多核巨细胞（multinucleatedgiantcells,MNGCs）进行培养,分别进行抗酒石酸酸性磷酸酶（tartrate-resistantacidphosphatase,TRAP）染色并计数,扫描电镜观察象牙片吸收陷窝,比较了2种方法获得0C的骨吸收功能。结果显示,2种方法均能分离培养出TRAP阳性且具有骨吸收功能的多核OC,但直接分离获得的成熟OC骨吸收功能更强。