抗菌肽CRAMP的安全性、稳定性及其在清除铜绿假单胞菌生物被膜中的作用

旨在考察鼠源抗菌肽CRAMP的安全性、稳定性及其在清除铜绿假单胞菌生物被膜中的作用。采用兔血红细胞悬液的溶血性和小鼠腹腔巨噬细胞(RAW264.7)的细胞毒性考察CRAMP的安全性;采用不同温度、蛋白酶、金属离子和酸碱梯度对CRAMP抗菌活性的影响,考察其稳定性;通过在6孔细胞培养板中构建铜绿假单胞菌(PAO1株)成熟生物被膜,以人源抗菌肽LL-37和3种抗菌药为对照,采用结晶紫染色法检测生物被膜量,平板菌落计数法对生物被膜活菌数进行计数,苯酚-硫酸法结合Folin-酚试剂法检测生物被膜胞外基质含量,激光扫描共聚焦显微镜(CLSM)观察CRAMP干预PAO1生物被膜形态学的变化。结果显示,CRAMP在所测试浓度下对兔血红细胞溶血率均<2%;在62.5~125 mg·L^-1时对 RAW264.7没有细胞毒性。温度(25~100 ℃)、两种盐离子(Na⁺、K⁺)以及pH为5~10时对CRAMP的抗菌活性没有影响;胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶均不同程度影响了CRAMP的抗菌活性。6孔细胞培养板中,4倍MIC 的CRAMP极显著降低了PAO1生物被膜量(减少率为76.74%,P<0.01),极显著减少了生物被膜中的活菌数量(减少了1.2个CFU·mL^-1,P<0.01),效果优于LL-37和3种抗菌药。CRAMP组的胞外基质显著低于空白对照组和LL-37组(P<0.05)。CLSM结果显示：与对照组相比较,4MIC浓度下,CRAMP组的细菌总荧光强度(PI+SYTO)显著低于空白对照组和LL-37组(P<0.05);与空白对照组相比,CRAMP组和LL-37组的死菌荧光强度/活菌荧光强度比值 (PI/SYTO)均极显著增大(P<0.01)。综上表明,CRAMP具有低溶血性、低细胞毒性,除蛋白酶作用不稳定外,具有较好的稳定性,对PAO1成熟生物被膜具有明显的清除作用,且效果优于LL-37,具有良好的药物开发前景。     

3种含笑属植物叶片挥发油化学成分的比较研究

采用同时蒸馏萃取法(SDE)分别提取多脉含笑、绢毛含笑和黄兰3种含笑植物叶的挥发油,运用毛细管气相色谱-质谱联用法结合计算机检索对其挥发油进行了化学成分分析。实验结果表明,多脉含笑共鉴定出20种化合物,占挥发性物质总含量的百分比为97.54%,主要成分为α-金合欢烯、β-橄榄烯、大根香叶烯B和朱栾倍半萜等;绢毛含笑共鉴定出36种化合物,占挥发性物质总含量的百分比为98.47%,主要成分为橙花叔醇、α-蒎烯、β-芳樟醇和二甲基-2,6-辛二烯醛等;黄兰鉴定出19种化合物,占挥发性物质总含量的95.93%,主要成分为大根香叶烯B、β-芳樟醇、罗勒烯、石竹烯、桉叶醇、β-榄香烯和异丁酸苯乙酯等;3种植物叶片挥发油主要成分含量差异较大。在3种含笑属植物叶中均含有很多高生物活性的物质,在香料工业及医药方面都有重要用途。     

四川香樟人工林生长特性研究

对四川香樟树高、胸径、材积生长规律研究结果表明：香樟生长适应性较强,27 a树高平均可达15.80 m,胸径可达35.1 cm,材积可达0.6790 m3;香樟造林初期生长相对较缓慢,在10 a～12 a时树高和胸径连年生长量到达峰值,之后开始下降但仍保持较高的年生长量;材积连年生长量和平均生长量随着树龄的增大而呈持续增长趋势,27a时,仍维持较快的增长速度;Logistic曲线对香樟树高、胸径和材积生长动态有较好的拟合效果,其回归方程分别为：y=35.4356/（1＋11.59×e-0.1942x）,y=16.429/（1＋12.6749×e-0.1906x）,y=0.9639/（1＋107.5×e-0.2043x）。     

龙湖山国家森林公园生态文化建设规划初探

本文探讨了生态文化旅游定位,和在生态旅游与渗透生态文化教育相结合的问题。并从生态文化基础设施建设和挖掘生态文化内涵等方面阐述了龙湖山国家森林公园的规划方法,并提出了森林公园生态文化建设规划原则,规划重点和布局等内容。     

处理主干和主枝对光皮树幼树早花早实的促进效果

对3年生光皮树幼树,采用环割倒贴皮、铁丝绞缢、绳索绞缢、环刻4种人工造伤方法分别对其主干和主枝进行处理.结果表明:4种处理方法对树干直径和冠幅生长的影响差异不显著;铁丝绞缢主枝法处理,其树高及开花株数和开花数量都与其他处理存在显著差异;铁丝绞缢主枝与铁丝绞缢主干法促进开花的效果差异不显著.     

鹅GHR基因荧光定量PCR险测方法的建立

采用PCR方法克隆了鹅生长激素受体(GHR)基因,构建了重组质粒pMD-18T-GHR,并将其作为标准阳性模板.通过对反应条件进行优化,以定量的10倍系列稀释的质粒pMD-18T-GHR为标准品进行荧光定量PCR扩增,建立了检测GHR的荧光定量PCR方法.结果显示,该方法构建的标准曲线线性关系良好,建立的GHR基因荧光定量PCR检测方法灵敏度高、特异性强(可以检测出低于10个拷贝/μL的样品),准确可靠.籽鹅和莱茵鹅GHRmRNA出壳到90日龄生长过程中肝脏中的表达量不同,30日龄不同组织表达量各有变化特点.     

藏獒RAPD-PCR反应体系的优化

以藏獒血液为试验材料,提取基因组DNA后,对藏獒RAPD反应体系进行了优化。结果表明,20μL的最佳反应体系为:2.5 mmol/LMg2+、0.6 mmol/L dNTP、50 ng模板DNA、1.25UTaq酶和0.3μmol/L引物;藏獒RAPD反应的最佳退火温度为36.5℃。     

蓝芩注射液体外抑菌试验

大肠杆菌、猪霍乱沙门氏菌、葡萄球菌、猪链球菌是常见病原菌，在不同诱因存在下引起发病，对这类疾病多数采用抗菌药物治疗，细菌易产生耐药性。耐药性的产生又需要加大药量或变换药物品种，这样既增加了治疗的成本，又使得畜产品中的药物残留问题更加突出。许多中药具有抗菌消炎和调节机体免疫的功能，并具有副作用小、残留低、不易产生耐药性等优点。笔者等观察了蓝芩注射液对4种病原微生物的体外抑菌作用，现报道如下。     

大关野生喜马拉雅红豆杉的生境特点及生物学特性

2002年5月在云南省大关县的2镇1乡首次发现有零星的喜马拉雅红豆杉不均匀地分布在崇山峻岭中.为给以后人工造林及经营管理提供理论依据,对喜马拉雅红豆杉的生境特点及生物学特征进行了多年和多处的实地调查与分析.结果表明:野生喜马拉雅红豆杉,其立地条件差,处于自生自灭状态;海拔越高其植株越高大,为乔木,处于林冠上层,属于优势...     

供氮水平对田间桑树叶片产量及其生理特性的影响

为了探寻龙桑一号的适宜施氮量,从而指导桑农科学施用氮肥,以桑树品种龙桑一号为试验材料,在大田条件下研究了不同供氮(纯氮)水平(0、48.3、96.6、144.9、193.2和241.5kg.hm-2)对桑树叶片产量及其生理特性的影响情况。结果表明:当施氮量为0～193.2kg.hm-2时,桑树单株枝条数、单枝叶片数、单叶面积、单叶质量和单株产叶量均随供氮水平的增加而增加,而当施氮量达到241.5kg.hm-2时,桑树单叶面积、叶片质量和单株产叶量反而有所降低;施氮量在0～144.9kg.hm-2范围内,桑树叶片中的全氮(N)和全磷(P)含量均随施氮量的增加而提高,而当施氮量超过144.9kg.hm-2时,叶片中的全氮和全磷含量随着施氮量的增加反而有所降低,这说明施氮量过高反而降低了桑树对N和P的吸收;随着供氮水平的增加,桑树叶片中的叶绿素含量、可溶性蛋白和可溶性糖含量均随施氮量的增加而增加。从氮肥对桑树产叶量及其生理特性的影响情况来看,桑树品种龙桑一号田间的最佳施氮量为144.9～193.2kg.hm-2。