海南原鸡PDCD10的克隆、表达及其蛋白的生物信息学分析

通过克隆、表达海南原鸡程序性细胞死亡分子10(Programmed cell death10,PDCD10)基因,对其蛋白进行生物信息学分析。采用RT-PCR方法克隆得到海南原鸡PDCD10基因CDS区,将扩增产物与原核表达载体pET42a连接,构建pET42a-PDCD10重组质粒,经IPTG诱导表达后,进行SDS-PAGE和Western blot分析;运用生物信息学软件对所获得基因的核苷酸序列进行分析,并预测其编码蛋白的理化性质及二级结构等。克隆获得了PDCD10639bp的CDS区核苷酸序列,融合蛋白分子量约为57ku,生物信息学分析发现,PDCD10CDS区包括1个639bp的开放读码框,编码212个氨基酸。该蛋白不含信号肽,无跨膜区,二级结构中存在大量α-螺旋。研究结果为进一步开展海南原鸡PDCD10的功能研究奠定了坚实的基础。     

乳房链球菌对克林霉素耐药基因的定位

采用试管稀释法和纸片法测定9株乳房链球菌对克林霉素的耐药性，通过PCR反应检测克林霉素的耐药性基因，并进行测序比较。发现克林霉素对乳房链球菌的抗菌活力较强，克林霉素耐药基因同时存在于乳房链球菌的染色体和质粒上。     

Evaluation of Thermal Environment of Cowshed and Correlation Analysis Between Thermal Parameter and Physiological Parameter of Dairy Cows in Central Plain of Hebei

The purpose of this study was to evaluate thermal environment of cowshed in four seasons in central plain of Hebei,and analyze the correlation between the temperature parameters and physiological indexes of dairy cows.Three dairy cow houses with different building structures were selected,the thermal parameters (ambient temperature (Ta) and relative humidity (RH)) and physiological parameters (respiratory rate,rectal temperature and body surface temperature) were detected.The results showed that the Ta,RH and index of temperature and humidity (THI) changed significantly in four seasons (P<0.05),the average daily temperature in summer was the highest (28.59 ℃),and the average daily temperature in winter was the lowest (1.55 ℃).In summer,dairy cows were suffering from mild heat stress for 15.5 h every day,and from moderate heat stress for 6.0 h.In winter,dairy cows were under mild cold stress for an average of 12.0 h per day.The Ta and THI of three cowsheds in each season had no significant differece (P>0.05),except for that in winter.Compared with the cowshed with low wall or roller blind,the average Ta in the cowshed with only roof was 0.80-1.27 ℃ higher in summer and 1.36-1.84 ℃ lower in winter.In addition,the physiological parameters of dairy cows were extremely significantly higher in summer than those in other seasons (P<0.01).The respiration frequency or rectal temperature of cows among cowsheds in summer were significantly different (P<0.05),and the seasonal difference in body surface temperature was significant (P<0.05).Correlation analysis of thermal parameters and cow physiological parameters showed that the respiratory frequency,rectal temperature and body surface temperature were positively correlated with THI and Ta (P<0.05).However,there was no significant correlation between physiological parameters and RH (P>0.05).The results provided scientific basis for environment evaluation of cows,and physiological status of dairy cows were inferred according to environmental thermal parameters,which provided data for occurrence and early warning of stress.     

厄贝沙坦及其复方制剂中痕量杂质N-亚硝基-N-甲基-4-氨基丁酸残留方法学研究

采用超高效液相色谱-三重四级杆质谱(UPLC-MS/MS)建立厄贝沙坦及其复方制剂中N-亚硝基-N-甲基-4-氨基丁酸(NMBA)的测定方法。采用Waters ACQUITY UPLC○RHSS T3色谱柱进行分离,以0.005 mol/L甲酸铵(用甲酸调pH值至3.0)为流动相A,甲醇为流动相B,梯度洗脱,质谱检测器,流速为0.3 mL/min。结果显示NMBA的线性范围为0.156 6~3.132 6 ng/mL,相关系数r>0.99,方法检出限浓度为0.047 0 ng/mL(相当于样品浓度0.01μg/g),定量限浓度为0.156 6 ng/mL(相当于样品浓度0.03μg/g),样品加标回收率在80%~130%。说明该方法可以快速、简便、灵敏、准确地测定厄贝沙坦及其复方制剂中NMBA含量。     

组合型木聚糖酶对21日龄黄羽肉鸡器官指数、内源消化酶活性以及肠道吸收功能的影响

通过对21日龄黄羽肉鸡器官指数和胃蛋白酶、胰蛋白酶、胰脂肪酶、胰淀粉酶以及血清中木糖水平进行检测,研究酶制剂对动物内脏器官所产生的影响,以及组合酶和单酶之间的差异。木聚糖酶在小麦型日粮中添加,降低了肝脏、肌胃、腺胃、十二指肠、空肠和回肠的器官指数,增加了胰腺的器官指数;降低了胃蛋白酶和胰蛋白酶的分泌水平;组合酶比单酶降低小肠器官指数更明显,单酶增加了胰脂肪酶的分泌水平,组合酶降低了胰脂肪酶的分泌水平,差异不显著(P>0.05)。小麦型日粮饲喂组血清中木糖的水平高于玉米型日粮组和加酶组,酶制剂的添加降低了血液中的木糖水平,各处理组之间差异不显著(P>0.05)。     

发酵花生秧对番鸭生产性能、屠宰性能、血清生化指标及鸭粪常规成分的影响

本研究旨在探究发酵花生秧的营养价值及其对番鸭生产性能、屠宰性能、生化指标及鸭粪污染指标的影响,探讨利用发酵花生秧进行番鸭节粮养殖的可行性。选取15日龄的公番鸭360只,随机分为4组,每组6个重复,每个重复15只。对照组饲喂基础日粮,试验Ⅰ组饲喂90%基础日粮+10%发酵花生秧,试验Ⅱ组饲喂85%基础日粮+15%发酵花生秧,试验Ⅲ组饲喂80%基础日粮+20%发酵花生秧,预饲期7 d,正式试验期48 d,测定并计算各组番鸭的生产性能、屠宰性能及各脏器指数,同时采集各组番鸭的血清、肌肉及新鲜粪样,测定血清生化指标及鸭粪常规成分的变化情况。结果表明,①与未发酵的花生秧相比,发酵后的花生秧粗蛋白质、钙水平分别上升31.82%（P<0.01）、97.40%（P<0.01）;粗纤维、磷及水分含量分别下降2.35%（P<0.05）、20.69%（P<0.05）、53.23%（P<0.01）,营养价值得到提升。②与对照组相比,试验Ⅰ、Ⅱ组料重比分别下降6.51%（P<0.01）、6.84%（P<0.01）;试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组的腿肌率分别上升20.50%（P<0.05）、25.55%（P<0.05）、9.27%（P>0.05）;肝脏指数分别上升9.90%（P>0.05）、12.23%（P<0.05）、3.18%（P>0.05）;肌胃指数分别上升17.70%（P<0.05）、30.82%（P<0.05）、36.66%（P<0.05）;腺胃指数分别上升1.37%（P>0.05）、32.99%（P<0.05）、36.43%（P<0.05）;③发酵花生秧可影响番鸭血清中TP、ALB、GLB、A/G、ALT、AST、AST/ALT、UREA、UA、CRE含量;与对照组相比,试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组鸭粪中的总氮、磷、钾、水分含量均呈下降趋势。综上,10%、20%发酵花生秧饲料能显著提高番鸭的生产性能,明显降低增重成本,对番鸭的产肉性能无明显影响,但可能对其肝脏功能、肾脏功能、免疫功能有一定的影响。     

甜高粱根际溶磷菌溶磷能力及菌株特性研究

利用蒙金娜培养基,从甜高粱根际分离具有溶磷能力的菌株,通过溶磷圈法筛选出5株溶磷能力较强的菌株,利用钼锑抗比色法和Salkowski比色法分别对溶磷特性与分泌IAA能力进行测定,结果表明,筛选的菌株分解磷酸钙的能力存在显著差异,溶磷量在107.26~233.95 μg/mL之间,各菌株均具有分泌IAA能力,IAA分泌量在15.23~27.79 μg/mL之间,接种溶磷菌后甜高粱株高、茎粗、干重都比对照明显提升。因此, 溶磷能力和分泌IAA能力较强的菌株(WD₅₁、WD₂₀) 可作为研制微生物肥料的优良菌株。     

单核细胞增多性李氏杆菌人工感染绵羊试验

将人从病羊脑分离纯化的单核细胞增多性李氏杆菌经列脉接种于健康得奴绵羊３只,结果被感染绵羊均表现出与自然感染绵羊相同的临床症状和病理变化,并从脑、心血、淋巴结中回收到了单核细胞增钨生李氏杆菌,从而证明了该分离株单核细胞增多性李氏杆菌具有较强的致病性。     

四川省一些实验动物养殖场SPF大鼠和小鼠肠内容物中金黄色葡萄球菌的检测

调查四川省一些实验动物养殖场的实验动物中金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,SA)携带情况,找出传播途径和进化规律,分析其污染原因,为保障实验动物质量提供技术支撑。按照GB/T 14926.14-2001《实验动物金黄色葡萄球菌检测方法》对2011年-2017年四川省部分实验动物中SA进行检测,对分离的SA菌株进行PCR耐药基因mecA检测,并应用金黄色葡萄球菌A蛋白(Staphylococcus protein A,SPA)和脉冲场电泳(pulsed field gel electrophoresis,PFGE)进行分子分型。结果显示,2011年-2017年共从7家实验动物养殖场采集并完成370只实验动物中SA的检测,共检出SA 31株,总分离率为12.16%,且均从SPF大鼠中分离所得。31株SA的mecA基因均为阴性。SPA可分成5个型别,其中T2360为优势型别,PFGE型别有10个带型。四川省养殖实验动物中仅SPF大鼠携带SA,不同年份检出SA基因型别基本不同,不同养殖场同一年检出的SA具有相同基因型,说明不同养殖场中的SA可能来自同一污染源,应加强SPF大鼠监控,以确保实验动物的质量。     

种牛精液冷冻和保存效果研究进展

随着养牛业的高速发展,牛精液液体保存技术的研究也在逐步深入。人工授精技术降低了养殖成本,加速了肉牛的繁殖改良,同时还促进了育种工作的进程,合理有效的使用人工授精技术能够提高牛的饲养效益。与此同时,优良的种牛精液品质也是改良的关键,有实验结果表明：遗传、气候环境、饲养管理等因素会影响牛的精液品质[1],同时强制运动也是决定种牛精液品质的关键环节[2]。合理的精液冷冻与保存不仅能发挥优良的精液品质,同时也为人工授精技术的发展提供保障。本文从牛精液新型冷冻保护剂和损伤修复、牛精液冷冻保存添加剂、牛冷冻精在人工受精中的应用、冷冻保存的发展前景等方面总结了我国牛精液冷冻保存技术的研究和发展,以期对今后种牛精液冷冻和保存技术发展有所帮助、提供参考。