鸡PD-1单克隆抗体的制备及生物学功能研究

试验旨在筛选并制备鸡PD-1单克隆抗体,对该单克隆抗体的免疫学特性、结合活性及其对鸡PD-1/PD-L1信号通路激活的阻断作用进行初步研究。运用杂交瘤细胞融合技术筛选杂交瘤细胞株,采用ELISA方法、Ig抗体亚型鉴定试剂盒、Western blotting鉴定抗体的免疫学特性,利用间接免疫荧光技术及流式细胞术检测筛选单抗与鸡PBMCs的结合情况,应用该单抗与IBDV感染7 d后的鸡PBMC细胞作用,利用实时荧光定量PCR技术检测IL-2、IL-6和IFN-γ等细胞因子的表达情况。结果显示,试验获得1株特异、稳定分泌鸡PD-1单克隆抗体的杂交瘤细胞株,命名为PD-1-D05。该单克隆抗体的亚型属于IgG1,杂交瘤细胞培养上清和腹水的效价分别为1：2¹¹和1：2.048×10⁵。ELISA和Western blotting检测结果表明,PD-1-D05单抗能与免疫原发生特异性反应,与pET-28a （+）、Rosetta菌株蛋白提取液上清及无关蛋白无交叉反应。间接免疫荧光及流式细胞术检测结果显示,PD-1-D05单克隆抗体能与鸡PBMC特异性结合,且IBDV感染7 d后的PBMC经单抗处理后,IL-2表达量显著升高（P<0.05）,IFN-γ转录水平显著下降（P<0.05）,IL-6表达水平较IBDV攻毒组细胞虽有所下降,但并无统计学差异（P>0.05）。结果表明,试验成功筛选并制备了能够稳定分泌鸡PD-1单克隆抗体的细胞株,所获得的PD-1单克隆抗体具有良好的免疫学特性,该单抗能够特异性识别鸡PD-1分子并与鸡PBMC细胞特异结合,并在一定程度上恢复由于IBDV感染导致的PD-1/PD-L1信号通路激活引发的免疫调节相关细胞因子IL-2、IFN-γ的异常表达。     

检测肥育猪CAST蛋白的免疫印迹方法研究

为了研究3个不同蛋白质水平(10%、18%、26%)饲粮对肥育猪的钙蛋白抑制蛋白酶(CAST)的影响,对CAST蛋白提取、电泳、转膜等条件进行优化。试验表明:CAST被激活的条件是将蛋白提取液于上样缓冲液95℃煮15min后,立即在冰块上冷却,防止蛋白降解;采用分离胶浓度为10%进行电泳,可以明显检测到68kD、107 kD的CAST;采用预染Marker和DAB染色液可针对性地检测到目的蛋白的位置;利用上述程序检测到了猪CAST两种类型的表达,取得了较满意的结果。     

Isolation and identification of oligomers from partial degradation of lime fruit cutin

Complementary degradative treatments with low-temperature hydrofluoric acid and methanolic potassium hydroxide have been used to investigate the protective biopolymer cutin from Citrus aurantifolia (lime) fruits, augmenting prior enzymatic and chemical strategies to yield a more comprehensive view of its molecular architecture. Analysis of the resulting soluble oligomeric fragments with one- and two-dimensional NMR and MS methods identified a new dimer and three trimeric esters of primary alcohols based on 10,16-dihydroxyhexadecanoic acid and 10-oxo-16-hydroxyhexadecanoic acid units. Whereas only 10-oxo-16-hydroxyhexadecanoic acid units were found in the oligomers from hydrofluoric acid treatments, the dimer and trimer products isolated to date using diverse degradative methods included six of the seven possible stoichiometric ratios of monomer units. A novel glucoside-linked hydroxyfatty acid tetramer was also identified provisionally, suggesting that the cutin biopolymer can be bound covalently to the plant cell wall. Although the current findings suggest that the predominant molecular architecture of this protective polymer in lime fruits involves esters of primary and secondary alcohols based on long-chain hydroxyfatty acids, the possibility of additional cross-linking to enhance structural integrity is underscored by these and related findings of nonstandard cutin molecular architectures.     

浙江省平原农田林网化的研究

根据浙江省平原地区的特点,依照农作物对农田林网控制的要求,提出了平原农田林网化的规划设计原则、要求和浙江省的分区规划方案。     

环秦岭区域植烟土壤养分状况及其与烟叶品质的关系

  目的  研究云贵高原地区烟田土壤肥力评价的尺度效应,为精准施肥和不同层级土壤管理决策提供科学依据。  方法  贵州省六盘水市钟山、水城和盘州3个烟区分别采集了100、180和220个典型烟田的耕层（0 ~ 20 cm）土样,选取pH、有机质（OM）、碱解氮（AN）、有效磷（AP）、速效钾（AK）、交换性镁（Mg^{2 +} ）、水溶性氯（Cl⁻）、有效硼（B）和有效锌（Zn）9个肥力指标,分别基于市域（L,500个样点）尺度和烟区尺度（S,3个烟区各自样点）,利用主成分分析法确定了各肥力指标的权重,采用加权和法计算了烟田土壤综合肥力指标（Integrated Fertility Index,IFI）,采用简单克里格插值法形成了IFI空间分布图。  结果  ①土壤肥力指标受烟区、环境变量（海拔、年均气温和降雨量）、土壤类型和成土母质的影响。不同尺度计算出的土壤肥力指标权重之间存在明显差异,土壤肥力指标权重的相对差异随样点数量的增加而升高。②L和S尺度下,3个烟区IFI均值大于0.5。钟山和盘州L尺度的IFI显著高于S尺度（P < 0.05）,水城无显著差异。在IFI较高级别以下（< 0.6）范围内,3个烟区L尺度下的烟田数量均少于S尺度。③不同尺度下IFI的空间分布格局差异在不同烟区表现不同,相较于L尺度,S尺度下钟山东北部高值区（0.8 ~ 1）减少,西北部及东南部低值区（0 ~ 0.4）增加。水城和盘州分布格局较相似,水城S尺度下的图斑更为破碎,盘州S尺度下中值区（0.4 ~ 0.6）面积增加。④样点数量和密度影响着烟区L和S尺度下IFI的图斑数量差异,样点越多,越适合采用L尺度进行评价。  结论  云贵高原烟田土壤肥力评价过程存在明显的尺度效应,进行土壤肥力评价应考虑空间尺度,明确土壤肥力空间分异,服务于精准施肥和土壤改良。     

Effect of methyl jasmonate on phenolics, isothiocyanate, and metabolic enzymes in radish sprout (Raphanus sativus L.)

The effect of spraying exogenous plant hormone methyl jasmonate (MeJA) upon radish sprout (Raphanus sativus L.) was investigated in aspects of total phenolic content (TPC), isothiocyanate content, antioxidant activity of the radish extract, and enzymatic activities of phenylalanine ammonia lyase (PAL) and myrosinase. The MeJA treatment significantly increased the TPC that resulted in the increased DPPH* (2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl) free radical scavenging capacity. In addition, the PAL activity also increased by 60% at 24 h after MeJA treatment. However, the same treatment decreased the amount of 4-methylthio-3-butenylisothiocyanate (MTBITC), a major isothiocyanate in radish sprout and the activity of myrosinase, an enzyme related to produce isothiocyanates.     

激素对蝴蝶兰快速繁殖的影响

将蝴蝶兰原球茎在培养期间置于MS附加 6 BA ,NAA ,IBA ,2 .4 D等激素的培养基 ,诱导分化、增殖。结果表明 ,无菌母株在MS附加高浓度 6 BA(5 .0mg·L-1)和NAA(2 .5mg·L-1)条件下培养 2 5～ 30d后 ,转接到单独使用 6 BA(2 .0mg·L-1)的培养基中 ,并继代 2～ 3次 ,可连续不断地分化、增殖原球茎 ;若 6 BA浓度继续下调并与适当浓度NAA相配合 ,则有利于原球茎生长 ;低浓度 6 BA与IBA配合使用有利于分化苗生根。     

关中地区温室越冬茬番茄黄化曲叶病毒病分子鉴定及流行规律

为了明确关中地区越冬茬番茄黄化曲叶病毒病发生和流行规律,通过分析该病发生与番茄品种、定植期及传播介体烟粉虱之间的关系,并采用PCR技术对田间病原进行分子鉴定。结果表明,番茄黄化曲叶病毒病在8月中下旬至11月上中旬开始侵染,翌年3月中下旬发生再侵染,秋季病情减轻;烟粉虱种群数量与病害发生程度呈线性正相关;不同番茄品种对番茄黄化曲叶病毒(Tomato yellow leaf curl virus,TYLCV)的抗性差异显著,其中大番茄品种布鲁尼1288和DRW7728,小番茄品种千禧和美红对该病表现为免疫;分子检测结果表明,4个样品中均扩增出543 bp的特异片段,与NCBI数据库Gen Bank的TYLCV序列(登录号为GU084381、KC138544.1、KC138543.1和JX456642.1)的相似性达99%。研究表明,关中地区番茄病毒病为番茄黄化曲叶病毒病,番茄品种、定植期及烟粉虱发生动态是影响该病发生的主要因素。     

番木瓜ERF家族与果实成熟相关成员的分析

通过比较分析番木瓜ERF家族成员的系统进化关系、基本理化性质、保守基序、启动子顺式元件,结合分析番木瓜在乙烯利和乙烯抑制剂1–甲基环丙烯(1-MCP)处理下以及不同成熟期果肉的RNA-seq数据,筛选出22个ERF家族成员进行表达差异分析,最终比较得出两个处理数据中显著差异表达基因有18个,推测这些基因可能在番木瓜果实成熟过程中起重要作用。     

‘库尔勒香梨’果实外观描述概况及其调控研究进展

该文对‘库尔勒香梨’果实不同外观特征的名称进行了综述,包括花萼脱落的果实、花萼宿存的果实,萼端凹陷的果实、萼端突起的果实,"公梨""母梨",粗皮果、畸形果。并提出统一名称的合理建议。还对‘库尔勒香梨’果实外观调控研究进展加以综述。