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182.
本试验旨在研究干扰素刺激基因15(interferon-stimulated gene 15,ISG15)敲除对猪伪狂犬病病毒(PRV)复制的影响。通过CRISPR/Cas9技术构建猪ISG15基因敲除猪肾上皮(PK-15)细胞系,利用CCK-8试剂盒检测PK-15敲除ISG15基因对细胞活力的影响,采用间接免疫荧光技术检测PK-15以及PK15-ISG15-/-细胞感染PRV的增殖差异,通过RT-qPCR检测PRV-EP0、PRV-gE、PRV-VP16和IFN-β的转录水平,Western blot检测PRV-gE和ISG15的蛋白表达水平,以及通过病毒噬斑检测对子代病毒感染力的影响。结果表明,sgRNA1和sgRNA2均成功敲除ISG15基因;CCK-8试剂盒检测细胞活力结果表明,敲除ISG15基因对PK-15细胞活力无影响;间接免疫荧光检测结果表明,PRV感染后,PK15-ISG15-/-细胞中的荧光强度明显高于PK-15细胞;RT-qPCR和Western blot结果表明,敲除ISG15可以促进PRV的转录和蛋白表达;病毒噬斑试验进一步显示,敲除ISG15可以促进PRV的复制。另外,RT-qPCR结果显示,敲除ISG15可以抑制PRV感染引起的IFN-β转录上调。本研究成功构建了PK15-ISG15-/-细胞系,并通过PRV感染试验证实ISG15基因可以抑制PRV在PK-15细胞中的增殖,并推测这种抑制作用可能与IFN通路有关。 相似文献
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184.
185.
桂林老虎猫瘟热病毒的分离鉴定 总被引:5,自引:0,他引:5
我们在作猫细小病毒分子流行病学调查过程中,从桂林送棼的考虑粪便中分离出1株虎细小病毒,并对其进行了系统鉴定,经形态学理化学血清学交叉中和试验、动物感染试验与分子生物学,证明为一株猫瘟热病毒(猫泛白细胞减少症病毒)的强毒。 相似文献
186.
受病原体感染后,植物会获得一种持久广泛的抗性,称为系统获得性抗性,受到昆虫侵害时也会获得类似的系统获得性抗性.植物系统抗虫与抗病信号分子不同,前者是茉莉酸(JA)、甲基茉莉酸(Me-JA)或系统素,而后者是水杨酸(SA).SA介导的系统抗病信号途径与JA等介导的系统抗虫信号途径并非完全独立,而是存在所谓的"交叉对话",但"交叉对话"结果是相互促进还是抑制仍不清楚.植物系统抗性信号及其互作研究无疑会完善植物保护策略. 相似文献
187.
浅析农村义务教育财政投入公平性 总被引:1,自引:0,他引:1
当前"以县为主"的农村义务教育的财政投资体制和管理体制暴露出其内在缺陷,导致政府农村义务教育经费投入不足,从而造成了"义务教育,农民买单"和各地区教育经费投入不等的不公平现象,要实现农村义务教育投入机制的公平,就要充分强调中央和省级政府的责任。 相似文献
188.
AIM:To investigate the role of endoplasmic reticulum(ER) stress in the process of hypoxia-induced neonatal rat myocardial injury through PERK signal pathway. METHODS:Neonatal rat cardiac myocytes were randomly divided into control group and hypoxia 1 h, 4 h, 8 h, 12 h and 24 h groups. Cell viability was evaluated by determining the intracellular content of ATP. Apoptosis was measured by high-content analysis(HCA) cell imaging system. The protein levels of GRP78, calreticulin, p-PERK, p-eIF2α, ATF4 and CHOP were detected by Western blotting at different time points. The primary cultured neonatal rat cardiac myocytes were treated with an agonist of PERK pathway salubrinal and the cell apoptosis was observed under hypoxia. RESULTS:In the early phase, hypoxia induced an increase in the expression of calreticulin and GPR78. In the middle phase of hypoxia, the levels of p-PERK, p-eIF2α and ATF4 were increased. In the later phase of hypoxia, increased CHOP level was also observed. Salubrinal effectively protected the cardiac myocytes from hypoxic injury. CONCLUSION:Hypoxia activates ER stress in cardiac myocytes and also activates PERK signal pathway. PERK signaling protects cardiac myocytes from hypoxic damage in the early stage and triggers apoptosis of the cells in the later phase. 相似文献
189.
2017年11月在广东省仁化县4个感染柑桔黄龙病的贡柑园中采叶片样品,进行常规PCR和实时荧光定量PCR检测,从不同病症叶片、典型症状叶片不同部位、初期感病树不同部位(正常和显症)叶片等3个方面分析了贡柑叶片中黄龙病菌"Candidatus Liberibacter asiaticus"(CLas)的分布情况。结果表明,叶片斑驳黄化症和均匀黄化症是与黄龙病最相关的症状,CLas含量很高;缺锌黄化症,具有黄龙病阳性与阴性两类样品;无明显黄化但呈革质化的叶片,CLas含量高。在斑驳黄化与均匀黄化叶片中,CLas的含量从叶尖到叶柄、从叶片到主叶脉呈现递增趋势,即以主叶脉与叶柄的含量更高。初期感病树未显症的部位也会检出黄龙病菌。 相似文献
190.