Development of Nucleic Acid Lateral Flow Immunoassay Detection Method for Foot-and-mouth Disease Virus

In this article, through the combination of nucleic acid probes and immune chromatography, a simple, sensitive and specific detection system——nucleic acid lateral flow immunoassay (NALFIA) for amplifing foot-and-mouth disease virus (FMDV) 3D RT-PCR products was established.An ultrasensitive nucleic acid biosensor (NAB) based on streptavidin-labeled gold nanoparticles dual labels and lateral flow strip biosensor (LFSB) were used in this system.The biotinylated goat anti-rabbit IgG was marked to the NC membrane as the alleged strip and the anti-digoxin antibody was labeled to the NC membrane to capture the digoxin probe.After assemblying gold-labeled strip and detecting RT-PCR products, the detection limit of NALFIA was 0.3×10^-3 to 3×10^-3 μg/μL.The NALFIA was compared with agar gel electrophoresis analysis, the results showed that the sensitivity of NALFIA was higher than agar gel electrophoresis.There was an excellent agreement between the two methods.NALFIA was a method with high sensitive, low cost and short time.In conclusion, this method provided a good alternative to detect FMDV.     

饲养模式对绵羊冷季生产效益的影响

在肃南裕固族自治县选择草场类型一致,绵羊(Ovisaries sp.)体况相近的3个牧户分别采取暖棚全舍饲(试验组Ⅰ),放牧+补饲(试验组Ⅱ)以及全放牧(对照组)3种饲养方式,通过测定整个繁殖周期绵羊体质量变化、母羊繁殖率和羔羊成活率指标,比较不同饲养模式对绵羊生产效益的影响.结果表明,3种饲养模式下越冬母羊体质量损失...     

盐酸塞拉嗪对大鼠不同脑区Gln及AsP含量的影响

研究盐酸塞拉嗪麻醉下大鼠不同脑区兴奋性氨基酸类神经递质含量的变化,探讨盐酸塞拉嗪中枢麻醉作用的可能机理.将48只Wistar大鼠随机分成6组,分别为对照组、诱导组、麻醉组、恢复Ⅰ组、恢复Ⅱ组和恢复Ⅲ组.采用反向高效液相色谱法测定各脑区Glu和Asp的含量.结果表明:腹腔注射盐酸塞拉嗪40 mg·kg-1后,麻醉组大鼠海马和丘脑Glu、Asp的含量显著降低(P＜0.05或P＜0.01),而小脑和大脑皮质Glu、Asp的含量显著增加(P＜0.01);恢复Ⅰ组除脑干外其它各脑区Glu和Asp的含量与对照组比较差异显著(P＜0.05);恢复Ⅱ组各脑区Glu和Asp的含量均恢复显著(P＞0.05);麻醉全程,脑干内Glu和Asp含量均无显著变化(P＞0.05).结果提示,盐酸塞拉嗪对海马、丘脑、小脑和大脑皮质内Glu、Asp含量的影响可能是其产生全麻作用的重要机理之一.盐酸塞拉嗪的中枢麻醉作用,可能与降低海马和丘脑内Glu、Asp,增加小脑和大脑皮质内Glu、Asp的含量有关,海马可能是盐酸塞拉嗪作用的最敏感的脑区.     

仔猪水肿病蜂胶佐剂多价灭活苗的研制Ⅰ.疫苗制备工艺

针对仔猪水肿病发病迅速,病死率很高且很难用抗菌药物控制的特点,旨在研制一种预防该病的新型高效疫苗。采用仔猪水肿病多发病型菌株O138,O139,O141以及湖北地方病型菌株作为制苗用菌种,优化其培养条件,采用蜂胶作为制备疫苗的佐剂,对研制的疫苗进行检验。结果表明菌种在优化培养基上生长旺盛,疫苗安检小鼠及仔猪全部健活,效力检验免疫组保护率达到100％。结果表明该疫苗制备工艺切实可行,疫苗安全性好,保护力强,值得进一步研究。     

H9N2亚型禽流感病毒的遗传进化分析及F株灭活疫苗的免疫效果评价

为了解H9N2亚型禽流感病毒(AIV)变异情况及评价作为H9亚型F株禽流感灭活疫苗的免疫效果,本研究对2009年～2010年期间从免疫鸡群中分离的9个H9N2亚型AIV株进行血凝素(HA)基因序列测定和分析。这9个病毒株HA基因编码区长度均为1 683 nt,HA基因核苷酸序列同源性为90.7%～98.9%,其推导氨基酸序列同源性为92.2%～98.8%;分离株与F株的HA基因之间的核苷酸序列同源性为91.6%～99.6%,氨基酸序列同源性为92.9%～99.3%;9个分离株与F株均属于Beijing/1/94-like进化分支,但分别属于3个不同的基因亚型。免疫试验结果显示:3周龄SPF鸡接种F株灭活疫苗21 d后,产生的HI抗体效价在log2 9以上;而且免疫鸡对分离株及F株攻毒后的喉头和泄殖腔排毒产生明显的抑制作用。本研究数据表明,F株灭活疫苗可以提供对这些分离株的有效免疫保护。     

精料补饲水平对早期断奶山羊生长性能和血清生化指标的影响

本试验旨在研究精料补饲水平对早期断奶山羊牛长性能和血清生化指标的影响.试验选用32只(35±3)日龄早期断奶简阳大耳羊山羊[(8.576±1.831)kg BW],公母各占1/2,根据体重采用随机区组试验设计,将山羊分为4个组,每组8只(公母各占1/2),单栏单饲.对照组跟随母羊哺乳,试验Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ组在35日龄实施断奶,分别补饲50、150和250 g/d精料.试验期42 d.试验结果表明:1)补饲精料对断奶山羊的平均日增重有显著或极显著影响(P<0.05或P<0.01).其中,250 g/d组平均日增重最高,较对照组提高了83.80%(P<0.01);50 g/d组平均日增重最低,显著或极显著低于其他各组(P<0.05或P<0.01).试验组间粗料采食量差异不显著(P>0.05).试验组山羊总料重比差异不显著(P>0.05);但按摄入精料计算,150、250 g/d组料(精料)重比极显著高于50 g/d组(P<0.01).2)250、150 g/d组山羊总干物质、消化能、粗蛋白质摄入量极显著高于50 g/d组(P<0.01),各试验组的饲粮总的中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维摄入量差异不显著(P>0.05).3)各组山羊血清总蛋白、白蛋白、血浆尿素氮、血清IgA和IgM差异不显著(P>0.05).由此说明,补饲精料有利于提高早期断奶大耳羊山羊的营养物质摄入量,促进生长.补饲精料量(250 g/d)占食入饲料总量的(70.0±3.0)%时,可极显著提高山羊的生长性能.     

毛囊干细胞的分离方法及其应用

毛囊干细胞是皮肤组织工程理想的种子细胞,分离纯化是其研究的基础手段。毛囊干细胞能分化成毛囊、皮脂腺、表皮,在组织维持与更新及某些临床疾病的治疗中均起到重要的作用。作者介绍了近年来毛囊干细胞几种常用的分离纯化方法,包括组织块法和酶消化法等,为进一步研究毛囊干细胞的特性和应用提供参考。     

肾型传染性支气管炎病毒M基因的遗传分析及其在杆状病毒表达系统中的表达

对肾型鸡传染性支气管炎病毒分离株Ck/Jiangsu/DS10/2008株(DS10株)膜蛋白(M)基因进行扩增、克隆和序列测定,并与GenBank中的其它25株参考株的M基因进行比对分析并构建进化树,研究其遗传进化关系。另将M基因克隆至杆状病毒表达系统pFastBac1载体并转染Sf9昆虫细胞进行表达,经间接免疫荧光鉴定,用琼扩试验验证表达产物的反应性,以研究M基因表达产物的生物学活性。测序结果表明DS10的M基因全长为678bp,编码225个氨基酸。遗传进化分析表明,DS10病毒与其它不同致病型的传染性支气管炎病毒共属同一大分支。间接免疫荧光检测表明,M蛋白在Sf9细胞中得到表达,琼扩试验验证表达产物具有良好的反应性,以上结果表明所表达的M蛋白具有良好的生物学活性。本研究表达的M蛋白可为其生物学活性研究及其诊断抗原、新型疫苗开发提供基础材料。     

MTT比色法在传染性法氏囊病病毒分离中的应用

应用MTT比色法检测了病料中传染性法氏囊病病毒(IBDV)在细胞培养物中的增殖情况，并对病料中加入法氏囊提取液、鸡胚浸出液2种成分对病毒增殖的影响作了比较。结果表明，MTT比色法简便、快速、可靠，能很好地反映病毒在细胞培养物中的增殖情况。     

母鹿饲喂益生素效果初报

选取产仔前母鹿 30头在试验组饲料中添加益生素每次 2g/头。结果表明 ,加喂益生素后 ,不仅改善了母鹿胃肠内的菌群 ,增加有益菌的数目 ,增强了母鹿体质 ,而且提高了断乳仔鹿生长的各项指标