猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪圆环病毒2型基因重组质粒实时荧光定量PCR标准曲线的构建

根据猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)ORF7和猪圆环病毒2型(PCV2)ORF1的核苷酸序列设计特异性引物,经RT-PCR/PCR扩增,分别扩增出大小为308 bp和417 bp的部分基因片段。用T4连接酶将目的片段与pGEM-Teasy载体系统连接,并转化到大肠杆菌DH-5α株感受态细胞。提取的质粒经PCR、酶切和测序鉴定,证实为PRRSV和PCV2的阳性重组质粒。将重组标准质粒10倍系列稀释后作为模板,通过实时荧光定量PCR方法(Real-time PCR),建立了PRRSV、PCV2的标准曲线及其直线回归方程,并确定其最佳读板温度。该方法具有线性关系好、特异性强、敏感性高、重复性好等特点,为分析PRRSV和PCV2共感染猪体内病毒的绝对含量提供了必要的技术平台。     

猪脑心肌炎病毒的分离与鉴定

从规模化猪场疑似病例组织病料中分离到5株脑心肌炎病毒（EMCV），对其中的2株（EMCV BJC3和EMCV HB1）进行了系统鉴定。结果表明，病毒粒子大小约为27nm，呈圆形；2株病毒均不耐酸，对氯仿不敏感，对胰蛋白酶敏感性有所不同，60℃加热1h可被灭活，二价阳离子对病毒没有明显的保护作用。用EMCV多克隆抗体作间接免疫荧光，分离毒株感染的BHK-21细胞的胞浆中可见特异性荧光。对分离毒株进行了VP1和3D基因的扩增和序列测定，结果表明，2个毒株VP1基因的核苷酸序列同源性为99．49％，氨基酸序列的同源性为98．46％，与GenBank中EMCV毒株的核苷酸序列同源性介于81．61％～99．59％，氨基酸序列同源性在95．5％以上；3D基因扩增片段序列与其它毒株的核苷酸与氨基酸序列同源性均为100％。基于VP1基因的系统进化树表明，2株分离毒均位于进化树的主干上，变异度不大。由此表明，EMCV感染已在我国猪场存在。     

地下长廊蜜蜂越冬技术的研究

依据蜜蜂室内外越冬原理和蜜蜂生物学特性,按养蜂生产的需要,研究设计了一种蜜蜂越冬的地下长廊,两侧放置1～3层蜂箱,中间为通道,上部封闭,留有进出气孔调节温度,人可以进入长廊管理越冬蜂群.挖建长廊的成本低,越冬期温度稳定,越冬蜂群势削弱率降低20.1%～24.3%,饲料消耗量降低10.5%～16.2%.     

鸡胚原始生殖细胞定向诱导分化成骨细胞的研究

探讨体外培养的鸡胚胎原始生殖细胞(EPGCs)的多向分化潜能。分别从发育至19期和28期的鸡胚胎性腺中获取EPGCs,体外培养传代。通过地塞米松、β-甘油磷酸钠和维生素C诱导EPGCs向成骨细胞分化,分别进行碱性磷酸酶改良钙钴法染色鉴定、钙结节Von Kossa's染色鉴定和免疫组化鉴定。结果表明:EPGCs被诱导21 d后,定向分化成成骨细胞,诱导率达到80%,碱性磷酸酶改良钙钴法染色、钙结节Von Kossa's染色和免疫组化鉴定均呈阳性,阳性率为75%-85%。由此可得出在诱导条件下,EPGCs体外可定向诱导分化为成骨细胞。     

靶向S基因外源性microRNA抑制TGEV增殖效果的研究

应用生物信息学软件对猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)S基因进行分析,筛选出可能与S基因有相互作用的外源miRNA:amiRNA-S-28035,amiRNA-S-28038,amiRNA-S-28165。之后,利用脂质体将构建好的相应的表达载体瞬时转染至PK-15细胞;通过Q-PCR和间接免疫荧光方法检测其对S基因的抑制作用;CPE分析和TCID50测定检测其对TGEV增殖的抑制效果。结果发现,3个外源性miRNA均降低了S基因mRNA的转录和蛋白的表达,其中amiRNA-S-28038对TGEV mRNA的平均抑制率可达64.6%,最高可达69.9%,表明外源性microRNA可以通过靶向TGEV基因组来抑制TGEV的复制。研究结果为猪传染性胃肠炎的预防和治疗提供了新的思路。     

不同培养基对肠球菌的检测效果比较

肠球菌是食品、水、食品加工设备和食品生产环境等卫生状况的指示菌之一,对其进行检测的培养基种类较多。选用叠氮化钠葡萄糖肉汤和肠球菌肉汤对奶粉和水中肠球菌进行检测比较,结果表明,肠球菌肉汤具有绝对的优势,但在实际检测工作中,对不同样品进行检测时,应注意根据样品的性状合理选择培养基,以提高检测的速度和准确性。     

中文数据库水产文献资源分析

本文对我国 3个主要中文数据库文献资源以及水产文献收录量进行了统计分析。中国水产科学研究院信息研究中心开发的中国水产文献数据库目前共有记录 5 7196条 ,起始于 1983年。重庆维普资讯有限公司开发研制的中文科技期刊数据库中收录水产类记录 394 4 4条 ,清华同方公司的中国学术期刊光盘数据库收录水产类记录 3592 7条。中国水产文献数据库收录的水产文献量及时间跨度最大 ,是获取水产文献信息的首选数据库。维普库和同方库同样是我国重要的水产文献信息源。这三个数据库在水产文献信息服务中发挥了重要作用。虽然三库存在一定程度的交叉重复 ,但也存在着不同程度的互补性 ,并且在收录期刊和文献方面各具特色     

马褂木等3个树种人工林生长量及生物量调查研究

对丽水市白云山人工林群落设置标准样地进行生长量和生物量调查.林分径阶分析显示,20年生马褂木(Liriodendron chinense)和24年生福建柏(Fokienia hodginsii)径阶集中在14～18 cm,径阶分布较集中,22年生日本冷杉(Abies firma)径阶具明显的双峰结构,林分总蓄积为马褂木(347.62 m3/hm2)>日本冷杉(175.31 m3/hm2)>福建柏(127.79 m3/hm2);连年生长量分析表明,马褂木胸径的连年生长高峰在第8～12年,在第10年达到最高峰,福建柏分别在第12年和第16年出现2个生长高峰,马褂木前期生长速度明显高于其他2个树种,但之后生长速度下降较快.马褂木人工林生物量比福建柏人工林高176.61%、比日本冷杉人工林高42.15%.在各人工林乔木层总生物量中,干材(包括树皮)最大,其中尤以马褂木干材比重最大,为68.43%,对以收获木材为主要经营目标的人工林来说,马褂木相对于福建柏和日本冷杉,具有较大的木材收益.     

投资者意见分歧对盈余公告效应影响的实证研究

从投资者意见分歧的角度对盈余公告效应进行理论解释,借鉴衡量投资者意见分歧的模型对中国股票市场的盈余公告效应进行实证检验,研究结论认为:我国的股票市场表现出了明显的盈余公告效应.投资者意见分歧对盈余公告效应具有很好的解释作用.在研究期内,投资者意见分歧与股票组合的累积异常收益率呈正相关关系.