伪狂犬病病毒Ea株UL18基因的克隆、序列分析及表达

本研究以伪狂犬病病毒Ea株基因组DNA为模板,PCR扩增含ULl8全长基因的片段并克隆至pMDl8-T载体,采用双脱氧末端终止法测序.序列分析显示ULl8全长891 bp,可编码297个氨基酸.将该基因亚克隆到原核表达栽体pQE.82L的6×His标签下游,获得原核表达质粒pQE-UL18,转化大肠杆菌DH5α,经IPTG诱导在大肠杆菌中成功表达,表达的融合蛋白6 × His-UL18的分子量约为33 ku.Western blot证实,表达的融合蛋白能与抗6×His的单抗发生特异性反应.进一步将UL18基因插入真核表达栽体pEGFP-N1中EGFP基因的5'端,获得与EGFP融合表达的真核表达质粒pEGFP-UL18,转染HeLa细胞,通过激光共聚焦显微镜观察发现,转染后24 h融合蛋白EGFP-UL18主要定位于细胞浆,仅有部分定位于细胞核,而48 h时则主要定位在细胞核.但对照载体pEGFP.N1转染细胞的荧光一直呈弥散型分布于整个细胞中.     

应用流式细胞术检测脂肪肝综合征肉鸡肝细胞生长周期与凋亡

用高能低蛋白饲料饲喂1日龄三黄肉鸡7周,建立脂肪肝综合征(FLS)病理模型,以流式细胞术的方法检测肝细胞生长周期及细胞凋亡,以探讨FLS的发病机理。与对照鸡比较,5~7周龄试验鸡肝细胞S期、G2+M期和增殖指数(PI)降低,G0/G1期升高;肝细胞凋亡率4~7周龄显著升高(P<0.01)。结果表明,高能饲料在体内氧化,产生大量自由基,损伤肝细胞DNA,使肝细胞分裂增殖减缓并发生凋亡,同时低蛋白饲料缺少转运脂质的必要条件,脂肪堆积于肝细胞内,肝细胞的功能受损而发生FLS。     

标记辅助选择及其研究进展

本文对标记辅助选择的原理,常用的数学模型,标记辅助导入的方法,及其影响标记辅助选择的因素,作了比较详细的介绍,并且对其所出现的问题提出了作者的一点看法.     

草类对重金属胁迫的生理生化响应机制

随着我国工业化进程不断加快,作为工业化基本生产资料的重金属不断被释放到生物圈中,并通过食物链传递给动物或人,给人类健康带来严重危害。草类分布广泛,有一定的抵抗能力,一些草类甚至还具有重金属超富集能力,在生物修复中发挥重要作用。本文就重金属胁迫对草类种子萌发、根系活力和生物量方面的影响以及草类的抗性机制(脯氨酸、抗氧化酶系统、谷胱甘肽、隔离、菌根和水杨酸)等研究现状进行论述,并阐明草类对重金属镉、锌、铜、铬、铅和汞的富集效应及其耐性机制,以期为今后草类耐重金属胁迫品种的选育和耐重金属胁迫分子机制的研究,提供现实依据和理论基础。     

醉马草内生真菌共生体对其伴生植物种子萌发的影响

以我国西北部天然草原广泛分布的烈性毒草醉马草(Achnatherum inebrians)和其主要伴生种针茅(Stipa capillata)、硬质早熟禾(Poa sphondylodes)为供试材料,采用纸上发芽法(TP)测定醉马草地上部分的水浸提液对2种植物种子萌发和幼苗生长的影响。结果表明:带菌(E+)醉马草的水浸提液对受体植物的种子萌发和幼苗生长主要表现抑制作用(P0.05),而且抑制作用随浸提液浓度升高而加强;不带菌(E-)醉马草的水浸提液对受体植物的种子萌发没有显著的影响,只有0.2 g/mL的水浸提液对幼苗的生长有显著的抑制作用。综上所述,带菌醉马草提取液对针茅和硬质早熟禾种子萌发和幼苗生长有强烈的抑制作用,而不带菌醉马草则对2种禾草没有显著的影响。     

鄱阳湖钉螺体内吸虫尾蚴记述

作者从1999-2000年共解剖鄱阳湖草洲钉螺87146只，先后发现裸头类、矛口类、单盘类、微尾类、叉尾类、对盘类、无尾类尾蚴共15种，本文将各种尾蚴的形态特征予以简介。     

MDCC—MSB1培养基上清液中DNA活性的定性研究

将 Ｍ Ｄ Ｃ Ｃ Ｍ Ｓ Ｂ１ ４８ 小时培养物 １０００ｒ／ｍ ｉｎ 离心的上清液分别用 Ｒ Ｎ Ａ 酶、 Ｄ Ｎ Ａ 酶和蛋白酶 Ｋ 处理后,进行体外试验。结果表明,只有 Ｄ Ｎ Ａ 酶处理后的上清液失去了体外抑制 Ｍ Ｄ Ｖ“８１４”增殖的作用。将该上清液 １００００ｒ／ｍ ｉｎ 离心所得的沉淀分别用上述酶处理后进行体内试验。结果表明,只有 Ｄ Ｎ Ａ 酶处理的样品失去了体内促进 Ｍ Ｄ Ｖ 京１ 株致瘤的作用。同时,电泳分析结果证明,该上清液中确实存在 Ｄ Ｎ Ａ。     

鸭DCN基因编码区扩增、序列分析及其在大肠杆菌中的表达、蛋白纯化

采用RT-PCR方法从鸭腿肌总RNA中扩增了鸭核心蛋白聚糖基因编码区序列,进行序列分析,并将编码鸭核心蛋白聚糖成熟蛋白的核酸片段连入原核表达载体pET-32a(+)中,加入IPTG诱导其表达后,亲和层析纯化表达的蛋白。采用SDS-PAGE检测,用质谱方法对表达的蛋白进行鉴定。研究成功克隆出鸭核心蛋白聚糖基因编码区序列,序列分析表明,鸭DCN编码区序列由1074个碱基组成,编码357个氨基酸,其中信号肽有16个氨基酸。将鸭DCN蛋白划分为9个结构域(LRR1-9),结合人DCN序列进行序列分析推测结构域中LRR4、5与TGF-β可能存在一定关系。SDS-PAGE检测和质谱鉴定结果表明获得了分子量为54.7ku的鸭DCN融合蛋白。     

断奶日龄对仔猪血液生理指标的影响

选取15窝日龄相近的三元杂交仔猪 ,按14、21、28、35日龄断奶和不断奶随机分为5组 (14E、21E、28E、35E和C) ,每组3窝。主要研究断奶与不同断奶日龄对仔猪血液生理指标的影响。主要结果为 :①哺乳仔猪从21日龄后血液中白细胞水平基本稳定 ,但14日龄时血液中白细胞水平显著低于正常水平 ;21日龄前断奶可显著降低血液中白细胞数量 ,1周后迅速提高 ,但14日龄断奶仔猪直至42日龄血液中白细胞计数(WBC)仍低于正常水平。②仔猪28日龄血液红细胞计数 (RBC)、红细胞中血红蛋白浓度 (HGB)、血液血球比容 (HCT)均达到高峰值 ,RBC、HGB、HCT均不受断奶及断奶日龄影响。③哺乳仔猪14～42日龄间血液平均红血球容积 (MCV)、红血球血红蛋白量 (MCH)呈线性下降的趋势 ,断奶对MCV、MCH测值无明显影响。     

奶牛分子育种研究进展

本文概述了奶牛分子育种的研究进展,介绍了开展分子育种的必要性,分子育种研究的内容与特点、成就与现状、问题和展望.重点汇总了DNA分子多态及其与生产性状关系研究的成就,包括奶牛的泌乳性状、繁殖性状、抗病性方面候选功能基因的研究,生产性能的微卫星标记等方面.指出了奶牛分子育种研究存在的问题,据此提出了今后加快奶牛分子育种研究的思路、措施和应用前景.