中华绒螯蟹FAD6-b基因的全长克隆及原核表达分析

根据已登录的中华绒螯蟹一种Δ6去饱和酶基因(Accession Number:JX946434)及菁夜蛾去饱和酶基因(Accession Number:KJ622055.1)的保守区设计引物,通过逆转录PCR以及RACE技术克隆了中华绒螯蟹另一种Δ6去饱和酶基因FAD6-b的全长序列。经序列分析,中华绒螯蟹FAD6-b cDNA全长为2 310 bp,其中开放阅读框(ORF)为1 326 bp,共编码442个氨基酸(Accession Number:KP876058),理论分子量为50.86 ku,理论等电点为8.47,FAD6-b基因的氨基酸序列与已公布的一条中华绒螯蟹Δ6去饱和酶基因的一致性为76%。原核表达载体构建及其表达实验表明,中华绒螯蟹FAD6-b基因成功重组到原核表达载体pCold-TF DNA中,重组质粒pCold TF-fad6b在大肠杆菌BL21(DE3)pLysS中进行表达,经SDS-PAGE电泳分析表明,IPTG诱导后的重组菌出现了单一的蛋白条带,且大小与预期(105.86 ku)一致,可溶性分析显示目的蛋白主要存在于蛋白上清液中。对重组蛋白进行纯化,蛋白纯化液经电泳检测后显示出特异性单一条带,进一步证明了pCold TF-fad6b的成功构建和表达。目的蛋白经Western-blotting检测,结果表明获得的重组蛋白与6×His抗体进行了特异性结合,显示出良好的免疫学活性。     

乳山湾底质中硫化物和氧化-还原电位的分布与变化

2004年6、8和10月分别对乳山湾东流区共进行了3个航次的调查。调查结果表明,乳山湾东流区属于弱还原环境,表层沉积物中硫化物的含量基本呈北侧高、南侧低的趋势,而氧化-还原电位则呈北侧低、南侧高变化趋势。硫化物的垂直分布基本表现为随深度的增加而增加,氧化-还原电位的垂直分布基本表现为随深度的增加而降低。但是,由于受到贝类养殖的影响,出现了较多的例外情况。硫化物含量和氧化-还原电位随季节的变动较明显,硫化物含量8月最高,6月次之,10月最低;而氧化-还原电位则10月最高,6月次之,8月最低。贝类养殖对沉积环境中硫化物与氧化-还原电位有明显影响,养殖区硫化物的含量高于非养殖区,而氧化-还原电位则低于非养殖区。     

对虾养殖中新生残饵耗氧动态及其规律的研究

本文根据实验模拟研究的结果，估算了由配合饵料和贻贝肉形成残饵后３６天时间内的耗氧量，并讨论了其耗氧动态和规律。残饵耗氧量的变化范围为４．０９～１７．６１ｇ／ｋｇ·ｄ。残饵耗氧曲线随残饵形成时间的不同而显著变化，且始终呈二次曲线衰减形式，在其演变过程中，该二次曲线方程的二次项系数由负数逐渐演变为正数，并最终接近于污染虾塘底质的耗氧曲线。配合饵料和贻贝肉的耗氧曲线变化形式相近，但程度上存在较大差异。另外，本文还初步探讨了残饵的耗氧高峰期，估算了残饵在虾塘底质总耗氧量中的作用。     

光合细菌配合面包酵母与藻粉培养轮虫的实验

以面包酵母与一定量螺旋藻粉培养褶皱臂尾轮虫的过程中，添加光合细菌液进行实验。结果表明：光合细菌作为辅助性饵料，对轮虫的生长具有明显特殊的促进作用。4组实验显示：投喂适宜量光合细菌轮虫增殖明显加快，但与光合细菌添加量的增加不完全呈正比关系；投喂光合细菌新鲜培养液与老培养液轮虫增殖效果相近；投喂光合细菌只能作为辅助性饵料。当配合酵母、藻粉培育轮虫时，3者在饵料上起到了良好的互补作用，培养效果最佳。     

三种免疫添加剂对草鱼非特异性免疫功能的影响

在饲料中添加不同剂量的Vc、酵母多糖和壳聚糖,连续投喂42d,并在试验的第14、28、35和42天取样检测,研究其对草鱼血清溶菌酶活性、血清超氧化物歧化酶活性（SOD）活性、血清碱性磷酸酶（AKP）活性、补体C3、含量丙二醛（MDA）含量和血液白细胞吞噬活性共6种指标的影响。结果显示：实验组与对照组相比,饲料中添加Vc可以提高血清溶菌酶活性、SOD活性、AKP活性、补体C3含量和血液白细胞吞噬活性高,并降低MDA含量。添加酵母多糖可以提高血清溶菌酶活性、AKP活性、补体C3含量和血液白细胞吞噬活性,并降低MDA含量,但不能提高SOD活性。添加壳聚糖可以提高血清溶菌酶活性、SOD活性、AKP活性、补体C3含量和血液白细胞吞噬活性,但不能降低MDA含量。饲料中添加Vc、酵母多糖和壳聚糖均对草鱼的非特异性免疫功能具有一定的促进作用。     

微卫星标记在海洋经济贝类中的应用

微卫星标记是一种DNA分析手段,是种群遗传学研究中广泛应用的分子遗传标记。本文探讨了海洋贝类微卫星DNA的开发现状,介绍了微卫星的特点。阐述了微卫星标记技术应用于海洋贝类遗传多样性研究、遗传连锁图谱的构建、杂交子代的鉴定及杂种优势和繁殖成功率分析以及物种鉴定等方面的情况,并说明了微卫星标记技术存在的问题和发展趋势。     

Impacts of diet on hindgut microbiota and short‐chain fatty acids in grass carp (Ctenopharyngodon idellus)

Diet is known to influence intestinal microbiota in fish, but the specifics of these impacts are still poorly understood. Different protein/fibre ratio diets may result in differing structures and activities of gut microbiota. We examined the hindgut microbiome of grass carp (Ctenopharyngodon idellus) fed three different diets: fish meal (FM, high protein – low fibre), Sudan grass (SG, high fibre – low protein) and compound feed (CF, intermediate). Microbial profiles of fish fed on FM were significantly different from profiles of fish fed CF and SG (F = 18.85, p < .01). Cetobacterium, known to be positively associated with protein digestion, was the dominant microbial group in FM samples (approximately 75.7%), while Lachnospiraceae and Erysipelotrichaceae, thought to be involved in fermentation of plant polysaccharides, were dominant in CF and SG samples (46.8% and 42.9% respectively). Network analyses indicated that the abundance of Lachnospiraceae and Erysipelotrichaceae was in a significantly positive correlation (r = .895, p = .001). Short‐chain fatty acid (SCFA) levels may indicate that the digestibility of diet by microbiota in the grass carp gut decreased from FM to SG (FM>CF>SG). Overall low SCFA levels indicate that hindgut fermentation probably provides a low proportion of energy requirements in grass carp.     

日粮水平和饵料种类对真鲷能量收支的影响

以玉筋鱼为铒料生物,采用室内流水模拟实验法研究了摄食水平和饵料种类对真鲷能量收支各组分和能量收支分配模式的影响。结果表明,真鲷的生长量、总代谢量、排泄量及生态转换效率均随日粮水平升高呈减速增长趋势,二者之间的定量关系均可用对数曲线加以定量描述;不同生物饵料能造成真鲷摄食、生长、排泄和总代谢水平的显著差异,但却不能改变以比能值为单位的生态转换效率。依据各收支过程的量化结果,可得到真鲷的能量分配模式。     

关于网箱养草对养殖水体的净化效果的探讨

近年来,由于缺乏生态环境保护意识,片面强调高产值和养殖规模的扩大,一些养殖池塘受污染的程度超过其自净能力,长期积累的负面效应引起生态系统的退化。轻者导致养殖效益下降,重者导致养殖对象的大批死亡。在本实验中,将异育银鲫和菹草混养在室外池塘中,建立鱼草共生系统。监测水体主要的理化因子的变化规律,测定异育银鲫的生长情况。从而探讨网箱养草对养殖水体主要营养盐的去除效果。试验结果表明:菹草具有明显的净化作用,可以有效的吸收TP和TN,增加水体DO,稳定水体,并能促进异育银鲫的生长。     

虾夷扇贝横纹肌和平滑肌的蛋白分布及理化性质

为探讨虾夷扇贝闭壳肌中横纹肌(ST)和平滑肌(SM)蛋白分布特征及理化性质差异。对肌肉组织进行切片、苏木精—伊红染色后,在光学显微镜下观察肌肉组织形态,SDS-PAGE分析蛋白组成,通过盐溶性和Ca~(2+)-ATPase对理化性质进行了比较研究。研究表明,横纹闭壳肌的肌纤维更粗,肌细胞间更致密;Myorod蛋白仅存在于平滑闭壳肌中,在横纹闭壳肌中不存在;副肌球蛋白在平滑闭壳肌中含量为31%,横纹肌中仅为11%。2种肌肉盐溶曲线也完全不同,在0.05~1.0 mol/L盐浓度范围内平滑肌的溶解性呈S型曲线上升,而横纹肌呈直线型上升,这种差异可能与副肌球蛋白含量有关。此外,平滑肌和横纹肌肌原纤维蛋白Ca~(2+)-ATPase最适温度分别为35和30°C,活化能分别为23.4和11.3 k J/mo L。