三种食用百合种质资源限制生长保存及遗传稳定性研究

以3种食用百合试管苗为试材,采用限制生长保存法,研究了不同浓度生长抑制剂对食用百合试管苗保存效果的影响,并对保存后的试管苗进行遗传稳定性检测,以期建立食用百合种质资源离体保存体系。结果表明:龙芽百合试管苗用10mg·L~(-1)防落素(PCPA)处理保存300d后,试管苗生长缓慢,存活率达96.00%;川百合试管苗用2.0mg·L~(-1)青鲜素(MH)处理保存150d后,试管苗的抑制生长效果明显,结鳞率和存活率高达100.00%;兰州百合试管苗用10mg·L~(-1)多效唑(PP333)处理保存300d后,试管苗抑制作用明显,结鳞率达100.00%,存活率达94.40%。比较限制生长保存后与未保存植株的可溶性蛋白和酯酶同工酶图谱,各处理和对照图谱带相似,初步证明了以上保存方法的可行性,较好的保持了遗传稳定性。     

辽东地区立地条件对林下种植大叶芹类胡萝卜素含量的影响

在充分调查辽东地区大叶芹生长环境的基础上,以大叶芹为试材,研究了不同立地条件和环境因子对大叶芹生长的影响,以期筛选出可获得高品质大叶芹的栽植模式。结果表明:林型、坡向、坡位和坡度均对大叶芹的类胡萝卜素含量影响极显著;林下大叶芹类胡萝卜素含量明显高于全光坡耕地生长的大叶芹类胡萝卜素含量;样地处在人工落叶松林下、半阳坡、坡度为15°~20°的上坡时,其大叶芹中类胡萝卜素的含量最高。     

不同低温春化天数和赤霉素处理对解除洋桔梗莲座化的影响

以2个洋桔梗品种"雪莱香槟"(‘Ceremony Orange’)和"露西塔I白底粉边"(‘Rosita I Pink Picotee’)为试材,研究了育苗期种子低温(10℃)春化处理天数(35、28、21、14、0d)及栽培期赤霉素处理对解除洋桔梗莲座化的影响,探寻了生产上解除洋桔梗莲座化技术。结果表明:2个品种低温春化处理28d均能提高种子发芽率。定植60d后,低温春化处理35d洋桔梗‘Ceremony Orange’抽薹率最高,达72.9%;低温春化处理28d‘Rosita I Pink Picotee’抽薹率最高,达89.6%。栽培期对未经种子低温春化处理的洋桔梗‘Ceremony Orange’莲座化苗进行赤霉素处理(处理浓度为0、50、100、150mg·L~(-1)),100mg·L~(-1)赤霉素处理对促进洋桔梗节间的伸长有明显作用,抽薹率达70.5%,可以有效打破莲座化。比较2种解除莲座化的处理效果,生产上解除洋桔梗莲座化方法可首选种子低温春化处理,该方法上花时间比栽培期赤霉素处理提早2个多月;栽培期赤霉素处理可以作为种子低温春化未打破莲座化的辅助措施。     

野生蝉花液体菌种培养条件的优化

以野生蝉花菌种为试材,采用液体培养法,研究了碳源、氮源、微量营养和pH对野生蝉花菌种生长的影响,以期为标准化、规模化、产业化人工栽培蝉花提供优质种源。结果表明:将野生蝉花菌株接种到液体培养基中,在19℃,转速120r·min-1恒温振荡摇床内培养,蝉花菌种的最适液体培养基组分为可溶性淀粉20g,奶粉10g,磷酸二氢钾0.5g,硫酸镁1g,维生素B1210片,水1 000mL,最适pH 5.0~6.0。     

Inhibition of porcine circovirus type 1 and type 2 production in PK-15 cells by small interfering RNAs targeting the Rep gene

Porcine circovirus type 1 (PCV1) and type 2 (PCV2) are two genotypes of porcine circovirus. Both of them are presumed to be widespread in the swine population. Currently, there is no specific treatment for their infections. RNA interference (RNAi) is a sequence-specific RNA degradation mechanism mediated by small interfering RNA (siRNA), which represents a possible therapeutic application for the treatment of viral infections. In this study, three siRNA expression plasmids (pS-RepA, pS-RepB and pS-RepC) were generated to target three different coding regions of the Rep protein (Rep) of PCV. These siRNAs were used to inhibit PCV production in a porcine kidney cell line, PK-15 cells. Our results revealed that Rep gene expression was inhibited by pS-RepA, pS-RepB and pS-RepC to different degrees. Moreover, our study also showed that the production of PCV1 and PCV2 was reduced by these siRNAs. pS-RepC, which targets the middle region of Rep gene, proved to be the most efficient siRNA for inhibition of Rep expression and viral production. Taken together, our data suggest that RNAi could be investigated as a potential treatment for PCV infection.     

A peptide of foot-and-mouth disease virus serotype Asia1 generating a neutralizing antibody response, and an immunostimulatory peptide

The epitopes of the capsid of foot-and-mouth disease virus (FMDV) play important roles in the construction of highly immunogenic subunit vaccines. However few epitopes have been found for FMDV serotype Asia1. In this study we screened for epitopes of the VP1 and VP2 proteins of FMDV serotype Asia1 isolate, YNBS/58. Fragments consisting of amino acids 133-163 of VP1 and amino acids 1-33 of VP2 contained epitopes, and both induced lymphoproliferation in guinea pigs. Only the VP1 fragment induced neutralizing antibodies but the VP2 peptide dramatically increased the neutralizing antibody response induced by the VP1 peptide.     

非亲和性稻瘟病菌对水稻的诱导抗性

为研究稻瘟病菌Magnaporthe oryzae不同菌株间的相互作用,选择与单抗性基因系水稻IRBL5-M （携带抗性基因Pi5）表现为亲和性的菌株HN52与非亲和性的菌株HN119为研究对象,将其单独或混合接种到单抗性基因系水稻IRBL5-M中,并通过荧光显微镜观察接种后水稻叶鞘的发病情况及病斑面积,测定接种后水稻内相关抗性基因OsWRKY45、OsNPR1、OsPR10、OsMAPK2的表达量以及活性氧的变化。结果显示,相较于单独接种亲和性菌株,混合接种后单抗性基因系水稻IRBL5-M病斑发病面积减少;混合接种中亲和性菌株HN52菌丝侵染能力降低,侵染菌丝细胞间扩展率显著降低73.13%;同时单抗性基因系水稻IRBL5-M中OsWRKY45、OsNPR1、OsPR10和OsMAPK2抗性基因表达量显著增加,水稻叶片中活性氧含量增加,表明在菌株混合侵染过程中,非亲和性菌株可通过激发水稻的抗性反应来降低亲和性菌株对水稻的侵染程度。     

犬瘟热、犬细小病毒胶体金二联检测卡研制

本研究通过细胞融合、间接ELISA方法筛选出4株可稳定分泌犬瘟热病毒(canine distemper virus,CDV)和犬细小病毒(canine parvovirus,CPV)单克隆抗体的杂交瘤细胞株,以此为基础研制了一种可同时检测CDV和CPV的胶体金二联检测卡,并对其特异性、灵敏度及准确性进行了测试。结果显示：4株杂交瘤细胞可稳定传代,分泌的单克隆抗体纯度高,效价均在1:320以上。制备的胶体金二联检测卡特异性强,只与CDV和CPV产生特异性条带,而不与其他犬类病毒反应;灵敏度高,最低检测限可达到10²拷贝/μL;准确性好,与荧光定量PCR结果的符合率高于88.0%,与市面上单一病毒检测卡的符合率高于97.2%。结果表明,本研究制备的CDV、CPV胶体金二联检测卡特异性强、灵敏度高、准确性好,兼具操作简便、肉眼可判读、结果易保存和无需特殊仪器设备等优势,可用于两种疾病的临床快速诊断和大规模检测工作。     

一个调控葡萄花和果实色素形成的基因家族——MYB相关基因家族

葡萄浆果的颜色是由花色素苷的量来决定的,UFGT控制花色素苷的合成,Myb相关基因通过时空表达调节UFGT,从而使花色素苷在葡萄发育的不同阶段和不同部位表达.不同葡萄品种调节花色素苷的合成的强度和模式的差异造成了有色葡萄品种的果皮有多种颜色,白色葡萄品种果皮是由于没有花色素苷的合成.Myb相关基因家族主要有八个成员,其中MybA的三个种类VlmybA1-1,VlmybA1-2和VlmybA2以及MybB的两个种类VlmybB1-1和VlmybB1-2得到了较深入的研究.     

凉山州高原粳稻开花习性研究

凉山州高原粳稻在自然环境中抽穗后3～4d开始开花，5～8d进入开花盛期，10～12d相继结束；1日内的开花时间主要集中在12：00～16：00；每朵颍花开花历时60～110min不等；闭花授粉粒和停止发育粒教因品种而异；水稻开花与颖壳内湿度、田间温度和生态区关系密切。