犬瘟热病毒DNA疫苗接种犬的免疫保护

用犬瘟热病毒(CDV)囊膜糖蛋白基因(H、F)和核蛋白基因(N)重组质粒DNA和聚乙烯胺(PEI)混合后肌注10只3月龄CDV抗体阴性毕格犬,间隔30 d,共免疫3次,另选择5只犬作为阴性对照.免疫3次后,采用CDV攻毒.对照组呈现出犬瘟热的典型症状和组织病理损害,攻毒3周内,有2只犬衰竭死亡,1只犬症状明显,攻毒第18天外周血淋巴细胞中病毒RNA检测为阳性.DNA疫苗免疫组除出现一过性的体温升高外,未出现明显症状,攻毒后第18天外周血淋巴细胞CDV检测仍为阴性.DNA疫苗免疫后血清ELlSA抗体和病毒中和抗体测定显示,首免后机体激发的ELISA抗体滴度很低(101.25±0.615),二免后开始缓慢升高(101.69±0.285),再次免疫后达到102.051±0.214;中和抗体也呈现以上规律,三免后血清中和抗体为101.75±0.190,攻毒后血清ELISA抗体和中和抗体滴度迅速升高(103.02±0.202和102.41±0.245).试验表明CDV基因免疫对CDV的感染具有较好的保护作用,并能清除进入机体内的病毒.CDV基因免疫只激发较低水平的体液免疫,中和抗体在攻毒前达不到临界保护线(102),但对CDV攻击能产生较好的保护,推测其免疫效力可能源于细胞免疫和记忆性B淋巴细胞.     

河南省部分地区猪流行性腹泻病毒ORF3和N基因的克隆及其遗传进化分析

为探究河南省猪流行性腹泻病毒部分毒株的遗传进化情况,采用RT-PCR对2017年2月至2018年1月在河南省部分地区猪场收集到的25份PEDV阳性病料进行ORF3和N基因的扩增,并对其进行克隆、序列比对及遗传进化分析。结果显示,PEDV毒株的ORF3基因序列是由675个核苷酸组成的,与经典毒株CV777之间核苷酸及氨基酸同源性分别为95.2%~97.5%和95.1%~96.9%。N基因之间的核苷酸与氨基酸同源性分别为96.2%~100%和93.8%~99.8%;与经典毒株CV777核苷酸与氨基酸的同源性分别为94.7%~95.8%和93.2%~96.8%。河南部分地区PEDV流行毒株与经典毒株CV777不在同一分支,说明猪场暴发猪流行性腹泻与免疫接种疫苗后依旧难以控制的原因,可能与大多数PEDV河南流行株发生变异有关。     

蚕粉复合物对小鼠若干生理指标的影响

以小鼠为试验动物 ,对以全蚕粉为主要成分的降血糖复合物 (SPC)的生理作用和药效进行了探讨。结果表明 ,该复合物可以显著降低小鼠的食后血糖 ,并能提高小鼠抗疲劳能力和耐力 ,对小鼠的生长发育、繁殖等无不良影响 ,未发现有任何毒副作用。     

蜡样芽孢杆菌芽孢萌发及其对常规灭菌方法抵抗力的研究简

芽孢杆菌属细菌在芽孢状态下,对外界环境及理化因素具有高度抵抗力。适宜的温度、湿度及营养条件能促进芽孢萌发,影响其对常规灭菌方法的抵抗力。本试验选取蜡样芽孢杆菌作为研究对象,在适宜培养条件下使其形成芽孢,通过研究萌发后芽孢对温度、H₂O₂及含氯消毒剂等条件的抵抗力,证实了适当的条件（温度37 ℃、湿度40%、pH 7.4、30 min）能有效促进蜡样芽孢杆菌芽孢萌发,致使芽孢对高温（80 ℃、2 h）、H₂O₂（1.5 mol/L、2 h）及含氯消毒剂（有效氯含量约800 mg/L、2 h）等常规灭菌方法抵抗力明显降低,并能被有效杀灭和灭活,相对有效杀灭率分别达98.4%、98.9%及99.1%,有效杀灭率分别为88.3%、88.7%及88.9%,这对进一步研究芽孢杆菌属细菌的杀菌消毒条件具有重要参考意义。     

敲低组蛋白甲基转移酶ASH1L基因对牛卵丘细胞表达谱的影响

旨在研究干扰类缺失的、小的、同源异形1(absent,small,or homeotic 1-like,ASH1L)甲基转移酶基因表达对牛卵丘细胞表达谱的影响.本研究采用经过筛选的siRNA干扰牛卵丘细胞中ASH1L基因的表达,分别收集干扰组和对照组细胞(野生型)进行RNA测序及基因差异表达、基因功能、信号通路、可变剪...     

马立克氏病病毒囊膜糖蛋白Ⅰ的原核表达及多克隆抗体的制备

提取感染MDV 814A3毒株的鸡胚成纤维细胞(CEF)总基因组,利用PCR技术扩增获得gI基因.将鉴定正确的gI基因克隆至pET-32a(+),构建原核表达载体pET-gI.将诱导表达获得的gI重组蛋白免疫新西兰大白兔,产生的抗血清能够与MDV814A3病毒发生特异性反应.本试验所制备的gI重组蛋白和多克隆抗体将在MDV检测、血清学诊断等方面具有重要应用价值.     

复方蒲公英注射液对猪弓形体病的疗效观察

猪弓型虫病又称猪弓形体病、弓原虫病。是由垄地弓行虫寄生于各种动物的细胞内引起的一种人、畜共惠的原虫病,该病以患病动物的高热,呼吸及神经系统症状,动物死亡和妊娠动物的流产、死胎、胎儿畸形为特征。暴发弓形体病时,可使整个猪场发病,死亡率可高达60％以上。目前全国各地均有本病的存在,给人类健康和畜牧业发展带来了很大的危害和威胁。本试验对猪临床发病病例经过流行病学调查、临床症状及剖检变化观察、最后经过实验室检查确诊为猪弓形虫病。应用复方蒲公英注射液进行治疗,结果有效率为100％。治愈率为95％,与对照组差异显著（P〈005）,可以在临床推广使用。     

靶向口蹄疫病毒IRES区RNA干扰位点的选择及shRNA表达载体的构建与鉴定

以口蹄疫病毒WFL株为试验株,对口蹄疫病毒的IRES序列进行了保守性分析和RNA二级结构预测,推测高度保守的FMDV复制原点区域位于容易被siRNA结合的IRESRNA二级结构的环区,因此,在该区选择确定了2个siRNA干扰靶位,设计并合成能表达其小发夹结构shRNA的表达模板,克隆到含有U6启动子的真核表达载体中,建立了靶向口蹄疫病毒IRES区的siRNA真核表达系统,为进一步研究针对该区的RNA干扰对口蹄疫病毒的抑制作用打下了基础。     

高锌对仔猪肝脏脂肪代谢的影响

本研究旨在探讨高浓度硫酸锌对仔猪肝脏脂肪代谢的影响.试验选用120头平均始重为(26.66±2.45)kg的杜×长×大三元杂交仔猪,随机分成4组(对照组、试验组Ⅰ、试验组Ⅱ和试验组Ⅲ),每组3个重复,每个重复10头猪,分别饲喂添加60、300、1 000和3 000 mg/kg锌的基础饲粮.预试期7 d,正试期16 d.结果表明,与对照组相比,1)各试验组血清总甘油三酯和低密度脂蛋白胆固醇含量均显著提高(P<0.05);2)试验组Ⅲ血清总胆固醇、C18:1脂肪酸含量显著升高(P<0.05),肝脏C18:0、C18:2脂肪酸含量显著降低(P<0.05),而C16:0脂肪酸含量无显著变化(P>0.05);3)试验组Ⅱ和试验组Ⅲ肝脏硬脂酰辅酶A去饱和酶1(SCD1)mRNA水平、血浆瘦素和胰岛素含量都显著升高(P<0.05).随着锌浓度的升高,血浆四碘甲状腺原氨酸(T4)含量显著降低(P<0.05),三碘甲状腺素原氨酸(T3)和胰高血糖素含量有上升趋势,但差异不显著(P>0.05).由此可知,饲粮中添加1 000和3 000 mg/kg锌上调了仔猪肝脏SCD1转录水平,促进了机体饱和脂肪酸(C18:0)的去饱和化,增加了机体甘油三酯和胆固醇的合成,且高锌可通过促进瘦素和胰岛素的分泌调节机体的脂肪代谢.     

猪α-干扰素表达系统及其应用的研究进展

就猪α-干扰素的分子特征、生物学特性、表达系统和猪基因工程α-干扰素的应用进行综述,以期为猪α-干扰素在广谱抗病毒活性、抗肿瘤以及免疫调节的临床应用提供参考。