转基因小鼠的多重PCR快速检测技术

转基因检测技术的标准化可以为转基因法规的制定和转基因产品的标识提供技术支持.采用碱裂解法快速提取鼠尾基因组DNA,用PCR方法检测其中的外源基因结构如cytomegalovirus(CMV)启动子、hGH polyA终止子及目的基因跨膜蛋白66(Transmembrane protein 66,Tmem66),筛选到阳性样品.优化了多重PCR引物退火温度及缓冲液浓度,并探讨了扩增速率对多重PCR的影响.结果表明,此多重PCR方法可得到很好的扩增效果,可用于转基因小鼠外源基因的检测,同时为哺乳动物检测标准的建立提供参考.     

人工模拟生态养殖子二代大鲵肌肉营养成分分析

利用生化手段, 对1龄人工模拟生态养殖子二代大鲵的肌肉营养成分进行了分析, 旨在评价大鲵的营养价值, 并为其配合饲料的研制提供基础资料和理论依据。结果表明, 大鲵肌肉(鲜样)中粗蛋白含量16. 93%, 粗脂肪含量2. 70%, 水分含量79. 00%, 粗灰分含量1. 14%。肌肉中含有18种氨基酸, 其中8种人体必需氨基酸总量为7. 34% , 占氨基酸总量的40. 46%; 4种鲜味氨基酸总量为7. 11%, 占氨基酸总量的39. 19%。微量元素比值合理。表明人工模拟生态养殖子二代大鲵有较高的营养价值。     

蜜蜂抗菌肽Abaecin在枯草杆菌中的分泌表达

为了在枯草芽孢杆菌中分泌表达具有生物活性的Abaecin,采用重叠延伸PCR方法拼接合成含有编码Abaecin的基因及其相关调控元件的重组表达质粒pGplat.将构建的表达质粒pGplat电击转化至枯草杆菌,筛选正常生长的菌体,摇瓶发酵,取上清液冻干作为样品.通过Western blot试验检测Abaecin在枯草芽孢杆菌中的分泌表达情况.采用琼脂扩散法检测表达产物Abaecin的抑菌活性.Western blot试验结果证实在3.9 ku处有表达产物的目的条带.琼脂扩散法结果证明表达产物Abaecin对大肠杆菌、鸡沙门氏菌等革兰氏阴性菌有抑制活性.试验表明在枯草杆菌中能有效分泌表达具有生物活性的抗菌肽Abaecin.本研究结果为开发全新高效抗生素肽类药物和饲料添加剂提供了理论依据.     

从肝细胞凋亡角度看内毒素在致肝脏损伤中的作用

细胞凋亡的发现及其研究的不断深入,使得人们得以从细胞凋亡的角度解释疾病的发生机制。无论是抗肝细胞凋亡有关的核转录因子κB和bcl-2,还是与促肝细胞凋亡有关的F as/F asL系统和肿瘤坏死因子,在内毒素诱导的肝细胞凋亡中都起着一定作用。从凋亡的角度阐明内毒素致肝脏损伤的机制将有助于进一步理解内毒素的生物学特性和治疗由内毒素引起的相关疾病。     

川西北高原农业面源污染分析与防控技术对策——以阿坝藏族羌族自治州为例

川西北高原区是四川省重要的生态功能区,生态系统先天脆弱。为提升川西北高原农业面源污染防控水平,本研究以阿坝藏族羌族自治州为例,结合实地调研情况,分析阿坝州农田种植、畜禽养殖、农村人居环境等农业农村污染情况。结果表明：（1）农田种植污染源中,南部农业县玉米等作物存在偏施氮肥和施用过量等情况,农药主要集中在南部农业县,以杀虫剂和除草剂为主;中南部玉米等作物种植区较为依赖地膜,存在残留污染风险。（2）畜禽养殖污染源中,中南部农业县养殖比较集中,专业养殖户的畜禽粪便污染风险较大。若尔盖和红原等牧区县局部区域内有过度放牧、土壤沙化和草场退化等问题。（3）农村人居环境中,部分区域农村垃圾、污水收集与处理设施、农村厕所配套设施不足。最后本研究针对阿坝州农业面源污染存在的问题,提出了针对性的污染防控技术,以期为川西北高原区农业面源污染防控提供参考。     

秸秆还田量对东北旱地土壤磷素淋溶及玉米产量的影响

为探讨东北旱地秸秆还田量对磷素在土壤中垂直分布及玉米产量的影响，采用随机区组设计进行玉米栽培试验，以常规施肥为对照（CK），在常规施肥的基础上添加秸秆，设置秸秆用量分别为0.25、0.50、0.75、1.00、1.25和1.50 kg·m^-2。分别测定不同处理0—90 cm土层土壤中全磷（total phosphorus，TP）和速效磷（available phosphorus，AP）含量、淋溶液的累积淋失量和玉米产量。结果表明，土壤TP和AP含量随着土壤深度的加深逐渐减少。与CK相比，随着秸秆还田量的增加磷素向下迁移降低，秸秆还田量对土壤剖面磷素向下迁移影响显著；淋溶液中P含量显著减少，其中TP降低12.93%～59.85%，AP降低11.22%～46.28%。秸秆还田显著影响玉米产量，秸秆还田量为0.75 kg·m^-2时产量最高，较CK增产14.61%。综上所述，秸秆还田可以增加耕层土壤速效磷含量，减少土壤磷素淋失，大幅提高玉米产量，为东北旱地秸秆还田减少磷素淋溶、控制农业面源污染提供了理论依据。     

西番莲水通道蛋白PePIP2基因克隆及表达分析

西番莲作为新兴的热带果树，在热带农业中具有非常重要的作用，然而干旱、高温等非生物胁迫严重影响其正常生长发育。相关研究表明水通道蛋白(AQP)能够提高植物的抗逆性，本研究以西番莲‘台农’(Passiflora edulia Sims)为实验材料，利用西番莲的基因组数据，通过同源克隆法从西番莲中克隆得到了一个水通道蛋白基因PePIP2，其开放阅读框(open reading frame,ORF)为861 bp，编码286个氨基酸。对其进行生物信息学分析，其分子式为C₁₄₁₇H₂₁₅₆N₃₆₀O₃₇₃S₈，预测分子量为30 459.37 Da，等电点为8.84，亚细胞定位于细胞膜上。启动子区域分析显示其含有参与胁迫应答的顺式作用元件。对其进行干旱、高盐、低温、高温胁迫下的表达分析，结果表明：PePIP2能够受到干旱、高温和低温胁迫的诱导表达，其中在土壤含水量为50%，在45℃高温处理4 h和0℃低温处理48 h，其表达量最高。在烟草中进行瞬时表达，在不同时间的干旱胁迫处理下，PePI...     

红三叶个体水平异黄酮含量的差异及其形态特征和草产量比较研究

为探索选育高异黄酮含量红三叶(Trifolium pratense L.)新种质材料的可行途径，本研究测定和林格尔县实验地中300株红三叶地上部分的异黄酮含量，采用K-means聚类分析方法，将不同异黄酮含量红三叶聚类为4个类群(T1～T4),同时对4个红三叶类群进行形态特征进行观测，以及对各农艺性状和产量指标进行测定。结果表明：300株红三叶异黄酮含量介于15.65～34.16 mg·g^-1,平均含量为24.88 mg·g^-1。不同异黄酮含量的红三叶类群在形态特征、农艺性状、草产量等方面具有显著性差异，其中高异黄酮含量红三叶群体占300株的18.67%,平均含量为29.61 mg·g^-1,具有绝对株高和自然株高差值大于15 cm(平卧型)和叶片面积小于350 mm²的形态特征；同时绝对株高、草产量也显著更高(P<0.05)。本研究为红三叶高产优质栽培和品种选育奠定了基础。     

渔业养殖监测用AUV及其控制系统

针对当前渔业养殖移动监测装备续航能力低、成本高、难于普遍应用的现状，提出并研制了一台小型便携式渔业养殖移动与定点监测用AUV。该AUV采用“类海豹式”作业模式和模块化结构，用常规GNSS代替昂贵的水下惯导系统，三个主要舱体呈“品”字型分布以增加平稳性，并以步进电机控制活塞改变外置油囊体积来实现无动力潜浮。以低功耗STM32F407芯片为控制核心，采用FreeRTOS嵌入式实时操作系统和LabVIEW开发环境，设计与开发AUV水面自主巡航和动态避障系统、数据图像采集与通信系统和岸基智慧渔业大数据人机交互界面。能耗分析和仿真实验结果分别表明该AUV能耗低，当携带锂电池电量为5.184 kWh时，续航时间可达约77 h，且能够实现自主巡航。样机试验表明能够与岸基上位机进行通信并有效采集水域水质信息及水下视频图像。渔业养殖监测用AUV搭载传感器灵活、续航时间长、功耗小、成本低、易维护和升级，能够满足不同类型渔业养殖的立体化移动和长期定点监测需求。