分散固相萃取-超高效液相色谱-串联质谱法检测大豆中6种典型农药残留

本研究建立了分散固相萃取-超高效液相色谱-串联质谱法同时检测大豆中灭草松、三氟羧草醚、氯虫苯甲酰胺、甲氨基阿维菌素苯甲酸盐、吡唑醚菌酯、精喹禾灵及其代谢物喹禾灵酸的多残留分析方法,为监测大豆生产中的农药应用风险提供方法。该方法具有简单、快捷、准确、灵敏度高的特点。样品经1%甲酸-乙腈振荡提取后,分散固相萃取净化,流动相为甲酸铵-水溶液(含0.01% 甲酸)和甲酸铵-甲醇溶液(含0.01% 甲酸),采用苯基色谱柱进行分离,基质匹配标准曲线外标法定量分析。结果表明:目标农药及代谢物在0.001~1 mg/kg添加水平下平均回收率为78.1%~116.0%,相对标准偏差(RSD)为1.6%~20.5%,该方法在0.001~1 mg/kg范围内线性良好(R2≥0.991 1),定量限(LOQ)可达0.001 mg/kg。基于此方法对内蒙古产区的大豆样品进行测定,发现大豆中灭草松、氯虫苯甲酰胺、吡唑醚菌酯有检出,残留量在<0.001~0.024 mg/kg之间,喹禾灵酸、三氟羧草醚、甲氨基阿维菌素苯甲酸盐残留量均<0.002 mg/kg。采集的大豆样品中6种目标农药残留量均符合我国农药最大残留限量标准安全要求。     

胸膜肺炎放线杆菌3种Apx毒素及外膜蛋白Omp2的原核表达及免疫反应性鉴定

猪传染性胸膜肺炎是猪群一种常见的细菌性疾病,给养猪业造成了巨大的经济损失。为了对胸膜肺炎放线杆菌的感染情况进行监测,本研究设计了针对该菌毒素ApxⅠ、ApxⅡ、ApxⅢ和外膜蛋白Omp2的全基因PCR扩增引物,以实验室保存的血清2型和5型菌株基因组DNA作为模板成功扩增出特异性基因片段,分别将目的片段克隆入原核表达载体成功构建重组表达质粒pColdI-omp2、pColdI-ApxⅡ、pET-32am-ApxⅠ、pCold-ProS2-ApxⅢ。将重组质粒转化Rosetta感受态细胞,通过IPTG诱导表达,应用His单克隆抗体和临床阳性猪血清对表达的重组蛋白上清进行Western blot分析,结果表明表达蛋白的分子量大小与预期相符,通过诱导条件的优化可以稳定表达可溶性蛋白,可溶性蛋白能与His单克隆抗体和临床阳性猪血清发生特异性反应,证明重组蛋白具有良好的免疫反应性。该试验为后期建立胸膜肺炎放线杆菌抗体的ELISA检测方法奠定基础。     

黄体期和卵泡期小尾寒羊DIO2与DIO3组织表达

为分析DIO2和DIO3基因在小尾寒羊不同繁殖时期(黄体期和卵泡期)下丘脑-垂体-性腺轴各组织中的表达差异,阐明这2个基因在绵羊发情转换中的表达模式,实验采用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)技术对比分析DIO2和DIO3基因在黄体期和卵泡期小尾寒羊下丘脑-垂体-性腺轴各组织中的表达差异。结果表明:DIO2和DIO3基因在下丘脑、垂体、松果体、大脑、小脑、卵巢、子宫、输卵管、肾脏、肾上腺10种组织中均表达;DIO2基因在黄体期和卵泡期的垂体组织中表达量显著高于其他组织(P<0.05),其中黄体期垂体、子宫、下丘脑、松果体、输卵管和卵巢DIO2的表达量显著高于卵泡期(P<0.05);DIO3在卵泡期松果体、下丘脑、子宫、垂体和输卵管的表达量显著高于黄体期(P<0.05)。综上,DIO2能抑制绵羊发情,而DIO3促进发情。     

奶牛子宫内膜炎诊疗学研究进展

子宫内膜炎是奶牛产后普遍发生的一种生殖疾病,可导致奶牛产犊间期延长、产奶量降低、淘汰率增加、治疗期间奶源废弃、管理及治疗成本增加,也是导致奶牛不孕症的重要原因之一。目前国内外防治奶牛子宫内膜炎的诊断技术和治疗方法众多,主要有阴道镜检查、Metricheck装置评估、子宫细胞学检查、抗生素疗法、中药疗法、中西医结合疗法、激素疗法、臭氧新型疗法等诊疗技术。阴道镜检查是一种可视化检查方法,利用内窥镜直观评估奶牛阴道内分泌物性状确定子宫内膜炎严重程度;Metricheck装置是根据阴道内分泌物含量和性状,设置不同评分值评估产后奶牛子宫内膜炎和繁殖性能;子宫细胞学检查通过子宫细胞刷、灌洗或活检技术确定子宫内膜细胞和中性粒细胞（PMN）的比例,设定奶牛产后不同时期PMN最佳阈值诊断子宫内膜炎;抗生素疗法通过宫内灌注、皮下注射、静脉注射抗生素等途径治疗奶牛子宫内膜炎,治疗成本低,见效快,是目前治疗奶牛临床子宫内膜炎最常用的疗法;中药疗法筛选不同组分的中药复方制剂,通过调节奶牛机体免疫系统,改善子宫内血液循环,抑制致病菌繁殖,促进子宫恢复正常生理机能;中西医结合疗法兼具中药辩证治疗的优点和西药见效快的特点,临床治疗奶牛子宫内膜炎具有广泛应用价值;激素疗法中前列腺素通过诱导黄体溶解,消除黄体酮产生和免疫抑制,刺激子宫复旧,降低产后奶牛长期子宫感染和炎症的风险;臭氧新型疗法是将臭氧制作成泡沫制剂、油制剂等产品通过宫内灌注杀灭病原菌。这些诊疗技术在治疗奶牛子宫内膜炎的过程中均取得了不同程度的效果,对评估产后奶牛繁殖性能和生产性能具有良好的指导作用。文章通过介绍这些诊疗技术在奶牛子宫内膜炎中应用的研究进展,以期为该病的防治提供参考。     

宠物寄养模式的创建

通过一种专业化、可视化宠物寄养模式的创建,探索与动物医院、宠物超市互惠共赢的合作途径,共同探讨确立"全天候、全过程、全方位"的宠物寄养机构的运营策略,以期为宠物寄养市场的有序健康发展提供一个可以参考借鉴的研究思路。     

15N稳定同位素标记副溶血弧菌的培养基制备与培育

为进行蛋白质组学的定量研究,研制一种~(15)N稳定同位素标记的副溶血弧菌培养基并进行~(15)N标记副溶血弧菌培育。方法包括连续多次转接培养副溶弧菌和利用LC-MS/MS验证标记的副溶血弧菌细胞中蛋白质氮原子的标记效率。所述培养基的配方为NH_4Cl(2 g/L)、葡萄糖(10 g/L)、KH_2PO_4(0.6 g/L)、KH_2PO_4(0.9g/L)、MgSO_4(0.2 g/L)、Na Cl(20 g/L)和蒸馏水(1L,pH 7.0~7.5);氮源的氮原子采用~(15)N进行标记,标记效率为91.5%。结果表明,该工艺简单合理,培养基组分简单、成本低,为工业化制备~(15)N标记副溶血弧菌培养基提供了新的制备方法。     

高寒地区捆裹青贮燕麦饲草饲喂绵羊效果的试验研究

在高寒地区选择青海欧拉型藏羊在饲养管理完全相同且同等补饲精饲料［0.25 kg/（只·d）］的情况下,分组饲喂捆裹青贮燕麦饲草、全株玉米青贮饲草、燕麦青干草和小麦秸秆51 d。结果表明,捆裹青贮燕麦饲草（全干物质%）粗蛋白较全株玉米青贮饲草、燕麦青干草和小麦秸秆分别提高13.77%、94.23%和130.13%,粗纤维较全株玉米青贮饲草高52.35%,较燕麦青干草和小麦秸秆分别降低11.14%和26.73%;捆裹青贮燕麦饲草日均饲草采食量较燕麦青干草和小麦秸秆分别提高130.93%和199.58%,差异均极显著（P〈0.01）,较全株玉米青贮饲草提高4.28%,差异显著（P〈0.05）;饲喂捆裹青贮燕麦饲草日增重达197.35 g/（只·d）,较全株玉米青贮饲草提高10.85%,差异不显著（P〉0.05）,较燕麦青干草和小麦秸秆分别提高40.96%和101.71%,差异均极显著（P〈0.01）;捆裹青贮燕麦饲草日均盈利1.71元/（只·d）,较小麦秸秆、燕麦青干草和全株玉米青贮饲草分别多盈利1.17、0.96和0.50元/（只·d）,分别提高216.67%、128.00%和41.32%。捆裹青贮燕麦饲草饲喂绵羊经济效益明显,在高寒地区可进行大力推广应用。     

奶牛乳房炎分离大肠杆菌的耐药性及脉冲场凝胶电泳分型研究

为了解宁夏地区奶牛乳房炎分离大肠杆菌的耐药表型及同源性特征,本试验采用肉汤微量稀释法测定了16种抗菌药物对66株奶牛乳房炎分离大肠杆菌的最低抑菌浓度(MIC),同时进行了脉冲场凝胶电泳(PFGE)分子分型研究.结果显示,66株大肠杆菌对氨苄西林、链霉素、四环素、多西环素、头孢菌素类抗生素和磺胺甲氧嘧啶的耐药率都比较高,而对阿米卡星、卡那霉素、多粘菌素、氟苯尼考及喹诺酮类药物则比较敏感.分离菌株最多耐受15种药,且主要以8耐、5耐和7耐为主.66株大肠杆菌中有54株能被PFGE分型,可分为A-a 27个型.分型结果显示,宁夏地区的奶牛场分离的菌株之间既存在垂直传播也存在水平传播,同一养殖场不同奶牛之间和不同养殖场的奶牛之间存在多重耐药大肠杆菌的克隆传播.     

猕猴桃不同授粉花柱数量对授粉效果的影响

以生产上大面积栽培的猕猴桃品种“海沃德”、“徐香”和“米良”为对象,采用自然授粉和人工授粉的方法,花后1个月调查坐果率,以明确不同授粉花柱数量授粉效果,确定充分授粉的数量级指标.结果表明:不论自然授粉或者人工授粉,3个品种授粉花柱数量≥11,坐果率平均约为80％～89％,与对照87％相比无显著差异.当授粉花柱数量＜8时,随着授粉花柱数量减少,坐果率也随之递减.当减至花授粉丝数量为0时,坐果率为0.单从坐果率上看,猕猴桃充分授粉的数量级指标应≥11.     

山西省栎属树种的特征与地理分布

山西栎属树木共有17种,可归纳成为4种类型,即麻栎类、槲类、枹栎类和其他类。简述这几类品种的主要特征,调查其在山西的主要产地,介绍这些树种在全国其它省份的地理分布。