猪带绦虫45W-4BX和TSOL18的高效表达及免疫效果研究

RT-PCR扩增45W-4B和TSOL18基因,PCR截去45W-4B基因的N端信号肽和C端疏水氨基酸序列形成45W-4BX。将45W-4BX和TSOL18 PCR产物分别亚克隆人pGEX-4T-1,用IPTG诱导表达,取产物进行SDS-PAGE和Western blot分析。纯化表达产物制成油佐剂疫苗分别免疫家猪,用25000枚猪带绦虫成熟虫卵进行攻击感染,ELISA检测各组的抗体水平,90d后剖检计算各组的减虫率。结果表明,45W-4BX和TSOL18基因在大肠杆菌中分别以可溶性和包涵体形式获得高效表达,并能被囊虫病人血清所识别。重组蛋白免疫猪15d血清抗体即为阳性,30d左右达到峰值。2种重组抗原的减虫率均在88％以上,与囊虫粗抗原免疫效果相当。这为进一步研制基于45W-4BX和TSOL18的猪囊虫重组基因工程疫苗奠定了基础。     

猪带绦虫六钩蚴TSOL18基因疫苗表达载体的构建及其免疫原性研究

为研制新型猪囊尾蚴疫苗,将猪带绦虫六钩蚴阶段编码 TSOL18 的基因定向克隆于真核表达质粒 pVAX1, 经筛选、鉴定及 DNA序列分析正确后,将重组质粒 pVAX1/TSOL18 转染 BHK-21 细胞,通过 SDS-PAGE、Western blotting、免疫荧光试验等方法检测细胞中表达的 TSOL18 抗原。结果表明,重组真核质粒 pVAX1/TSOL18 可在 BHK-21 细胞中表达TSOL18 目的蛋白,表达蛋白能被猪囊尾蚴病阳性血清所识别。动物免疫试验表明,真核表达载体能有效地诱导机体产生细胞免疫和体液免疫应答,这为猪囊尾蚴病基因疫苗的研究奠定了良好基础。     

南方大口鲶夏花培育阶段适宜饵料研究

随着养鲶业的兴起,南方大口鲶（SilurusMeridtonalischefi）由于具有个体大、生长快、肉质鲜嫩无细刺、广温耐寒等特点,越来越成为名优养殖对象。在北方地区,随着市场驱动,施苗尤其夏花苗种供不应求。虽然大口鲶的繁殖问题已经得到解决,但培育苗种的饵料直接影响它们的成活率。本文主要对大口鲶县花培育阶段的适宜饵料及投饵量进行了初步研究,为进一步提高苗种成活率提供一些科学依据。一、材料与方法1．苗种来源1998年9月6日从长江水产所空运试验鱼4日龄水花10万尾。2苗种培育池本试验场两个50m‘圆形水泥地。3．增氧设施170w空气压…     

黄颡鱼高效人工繁殖技术

以人工饲养的2、3冬龄黄颡鱼为研究对象,进行4批次的人工催产和孵化试验。催产雌亲鱼5960尾,平均体重120.6～148.2g,雄亲鱼350尾,平均体重278.6～310.5g。催产药物为LHRH-A2、DOM和HCG合剂。亲鱼注射后放入水泥池暂养,到达效应时间时实施人工采卵、采精液和人工授精,受精卵脱黏后用孵化桶孵化。雌雄亲鱼为20∶1。共收获受精卵4389.6万粒,孵出水花鱼苗3774.2万尾。平均催产率和受精率达到94.6%和84.1%,每尾雌亲鱼平均产受精卵约0.74万粒,孵化出鱼苗约0.63万尾。结果表明,该方法操作简便,亲鱼产卵率、受精卵孵化率和出苗率均较高,同时,节省人力、物力和空间,可大大提高黄颡鱼人工繁殖生产效率。     

兽用黄芪多糖口服液提取工艺研究

为建立黄芪中黄芪多糖提取工艺,本研究采用单因素试验和正交试验相结合的方法,以黄芪多糖为指标,对发酵浓度、发酵时间、发酵pH、发酵温度、醇沉提取时间进行优化。结果表明,6%的接种浓度、pH为7、温度控制在36℃、培养24 h、醇沉提取时间60 min,为黄芪多糖最佳提取工艺。经验证,该工艺方法简单,较传统提取法能耗小、成本低、安全环保、重复性好,能够用于工业化生产。     

松材线虫病防治存在的问题及对策

分析了松材线虫病防治存在的问题,并提出了松材线虫病防控对策,具体包括狠抓病虫害测报工作、进行林相改造、加大防治投入力度、开发天牛幼虫食品等方面内容,以期为松材线虫病的防治提供参考。     

一次成坪轻型屋顶绿化工艺体系

轻型屋顶绿化是改善城市生态环境的重要途径,具有良好的生态和社会效益,但对建设投资方来说一次性投入增加较大,推广难度较大.为此,有必要完善轻型屋顶绿化的技术体系.该文从植物材料、介质材料筛选、植物毯的生产、屋面施工流程等方面进行系统的研究,突破传统的轻型屋顶绿化形式,形成了一套造价低、维护简易,又有良好生态效益的轻型轻型屋顶绿化形式.     

雁鹅遗传多样性的ISSR分析

以安徽省郎溪县雁鹅原种鹅场的雁鹅(Anser)为研究材料,应用ISSR技术对种群的遗传多样性进行研究.筛选出43个ISSR引物,对94个供试样本进行了扩增,共扩增出216个位点,每条引物扩增出的谱带数在2～7之间,平均为5.0条;多态谱带比率在16.67%～100%之间,平均为65.60%,材料间遗传距离为0.2～0.45.用不加权算术平均组对法(UPGMA)构建了雁鹅种群的遗传系谱,结果94个个体可分为3大类群,第1类群由1个个体组成,第2类群由6个个体组成,第3类群由87个个体组成.     

李氏杆菌研究进展

李氏杆菌病是一种重要的人畜共患传染病 ,主要由单核细胞增多性李氏杆菌引起 ,呈世界性分布。文章回顾了李氏杆菌的分离鉴定、培养、分型等生物学特性以及与其毒力有关的基因功能方面的研究进展 ,着重就该病诊断和检测的重要性以及 EL ISA和 PCR检测方法进行了概述 ,同时对该病的免疫预防和今后的研究重点进了探讨     

坡道停车造成事故

近日,广西苍梧县木双镇机手倪某将广西 D-B2403手扶机熄火停在坡道上请人洗车准备 参加年检,因没按安全操作规程在挂档的同时 也要锁紧制动器并采取可靠的防滑措施,自己 也没在旁边看守。在洗车过程中手扶机脱档向 坡下加速溜动,撞在前面的农用车的尾部,造成 了近千元的直接经济损失。幸好没有造成人员伤亡,否则后果将不堪设想。 拖拉机在熄火停车时正确的操作规程应该 是: …