表达传染性法氏囊病病毒VP2蛋白的重组复制缺陷型HAdV-5的构建及鉴定

【目的】采用AdEasy系统构建能表达传染性法氏囊病病毒（Infectious bursal disease virus，IBDV） VP2蛋白的重组复制缺陷型人5型腺病毒（Human adenovirus serotype-5，HAdV-5），以期为IBDV活载体疫苗的研发提供新的思路。【方法】通过同源重组将VP2基因克隆至穿梭质粒pAdTrack-GOI构建重组穿梭质粒pAdTrack-VP2；PmeⅠ酶线性化pAdTrack-VP2后热击转化大肠杆菌BJ5183-AD-1感受态细胞，利用菌内同源重组构建重组腺病毒质粒pAd-VP2；将pAd-VP2经PacⅠ酶线性化和纯化后转染HEK293A细胞，包装表达VP2蛋白的重组复制缺陷型HAdV-5（rAd5-VP2），将鉴定正确的重组病毒感染非复制型细胞（Vero、CEF和DF1细胞）并分析目的蛋白的表达情况。【结果】将rAd5-VP2通过HEK293A细胞扩大培养，测得第10代病毒的滴度为7.9×10⁹ IFU/mL；RT-PCR结果显示，VP2基因在重组腺病毒中能稳定翻译；Western blotting和间接免疫荧光试验均检测到VP2蛋白的表达，蛋白分子质量为41 ku；将rAd5-VP2感染Vero、CEF和DF1细胞也检测到VP2蛋白的表达，表明HAdV-5有作为IBDV活载体疫苗研发的可能性。【结论】本研究构建了重组复制缺陷型HAdV-5，该毒株能感染部分哺乳动物细胞和家禽细胞并能检测到目的蛋白的表达。     

猪病毒性腹泻灭活疫苗对仔猪保护力研究

PEDV引起的产房仔猪腹泻是目前危害养猪业的主要三大传染病（ASF、PRRS、PED）之一，给养猪业造成巨大的经济损失。疫苗免疫仍然是防控PEDV的主要手段。为了提高疫苗的保护效果，本研究小组对PEDV疫苗在病毒含量、佐剂等方面进行了大幅改进，本文总结了改进后的疫苗免疫怀孕母猪，初生仔猪从母猪乳汁获得被动保护的研究结果，表明该疫苗为产房仔猪PED的防控提供了更有效的措施。     

非洲猪瘟病毒B602L蛋白的真核表达及多克隆抗体的制备

为表达非洲猪瘟病毒B602L重组蛋白，制备相应的多克隆抗体，根据NCBI网站上公布的非洲猪瘟病毒(Pig/HLJ/2018株)B602L基因序列进行密码子优化和基因合成，随后克隆至杆状病毒转移载体pFastBac1中，获得重组杆状病毒质粒，再把重组杆粒转染昆虫细胞Sf9,拯救重组B602L基因的杆状病毒。经间接免疫荧光和western blots鉴定结果显示，B602L重组蛋白与His标签抗体、非洲猪瘟标准阳性血清均能发生特异性反应，并且B602L重组蛋白可以细胞分泌上清的形式进行表达。通过His镍株亲和纯化的方式纯化重组蛋白，B602L蛋白大小约70 ku,与预期相符。将B602L重组蛋白与弗氏佐剂配比免疫BALB/c小鼠，制备小鼠多克隆抗体，经间接ELISA检测，该抗体效价可达1∶512000,并且与B602L重组蛋白具有良好的反应性。本研究可为进一步研究非洲猪瘟B602L蛋白的结构与功能、研制非洲猪瘟诊断制品提供生物材料。     

不同药剂防治小麦赤霉病药效试验

为明确杭州地区目前市场上主要几种小麦赤霉病防治药剂的防治效果，在余杭区瓶窑镇安排了杭州市主栽小麦品种的田间药效试验。试验结果表明，几种药剂处理对小麦赤霉病防治均有较明显效果，病穗防效最低为66.5%,最高90.4%,病情指数防效均在83%以上，最低为83.1%,最高达95.4%。其中25%氰烯菌酯悬浮剂+250 g·L^-1丙环唑乳油+5%d-柠檬烯可溶液剂处理的病穗防效和病情指数防效均最高，分别达90.4%和95.4%;20%氟唑菌酰羟胺悬浮剂+250 g·L^-1丙环唑乳油处理，病穗防效和病情指数防效都是第2,分别为87.1%和93.8%;10%叶菌唑悬浮剂处理，病穗防效和病情指数防效都位列第3,分别为85.3%和93.2%;而240 g·L^-1氯氟醚·吡唑酯乳油处理无论是病穗防效还是病情指数防效都是最差的。本试验选取杭州地区市场上的几种主要小麦赤霉病防治药剂，并进行一定组合的复配，筛选有效的药剂及药剂组合，以期为小麦赤霉病防治提供科学依据，并为大面积防治提供参考。     

母树种源与砧木地径对青钱柳嫁接成活率及嫁接苗生长的影响

以湖南省石门县、江华县、双牌县以及江西省修水县、庐山等5地的青钱柳大树或古树为嫁接穗条采集母树，以2年生青钱柳实生苗为砧木，研究母树种源、砧木地径对青钱柳嫁接成活率及嫁接苗生长的影响。结果表明：不同种源青钱柳嫁接成活率大小排序为双牌的﹥修水的﹥江华的﹥庐山的﹥石门的，其中石门种源的最小，为48.69%;双牌种源的最大，达65.23%。嫁接苗的新梢基径、新梢长、新梢节数与砧木地径有一定的相关性，其相关系数分别为0.772、0.457、0.422,其大小排序为新梢基径的﹥新梢长的﹥新梢节数的；嫁接苗的新梢基径、新梢长、新梢节数与母树的年龄、胸径、树高及枝下高均不存在明显的相关性。说明青钱柳嫁接对砧木地径有一定的要求，实际生产中应选择适宜粗度的砧木进行嫁接；母树的年龄对嫁接苗的生长没有显著影响。     

玉米籽粒脱水及机收籽粒研究进展

为了探明玉米籽粒机收质量的关键因素,解决收获期籽粒含水率偏高的问题,总结与分析了国内外玉米籽粒脱水相关研究,笔者提出未来玉米籽粒机收推广过程中,选用适宜籽粒机械化直收优良品种,不断改进种植模式、优化养分和水分施用方式,研发高效促脱水化学调控产品等关键栽培技术途径,是推动中国玉米籽粒机收的重要途径。笔者结合玉米生产实际,提出了加快籽粒机收推广的建议：加快早熟、籽粒脱水快、适宜机收品种的选育;明确各生态区域影响籽粒脱水动态的因素和机制;综合运用粒收品种选育、品种熟期配置、延迟收获期、栽培技术配套。同时,应加强农艺措施相配套的轻简化农机装备的有效研制,农艺农机有机融合,推动玉米籽粒机收技术应用,提升玉米产业整体竞争力。     

蜜源植物对虫害绿色防控促进作用的研究进展

本文就近年来蜜源植物对虫害绿色防控促进作用的研究进展进行综述，梳理了国内蜜源植物对虫害绿色防控作用相关的研究概况，发现国内研究比较多的蜜源植物包括豆科的紫花苜蓿和长柔毛野豌豆，十字花科的油菜，菊科的孔雀草和万寿菊，唇形科的罗勒和紫苏以及芝麻科的芝麻这8种蜜源植物。我们分析了蜜源植物对天敌昆虫提供的支持，包括提供生境、营养支持，对生殖能力的影响和提供生物多样性等，同时对蜜源植物的局限性如蜜源植物对害虫的支持、控害距离和控害能力等问题进行了探讨，最后对目前国内蜜源植物对虫害绿色防控作用相关研究存在的问题进行了探讨，以期进一步加强相关的基础研究工作。