猪产肠毒素性大肠杆菌野生株K88菌毛蛋白结构基因的克隆与序列测定

根据报道的猪产肠毒素性大肠杆菌阳8茵毛结构基因DNA序列，在其保守区用Goldkey软件设计了1对引物，经PCR扩增从20株野生分离株质粒中得到17个大小在815bp左右的阳性产物，经纯化、连接、转化、筛选及核酸序列测定与分析，确认所克隆的外源基因与报道的K88菌毛(亚单位K88ab、K88ac、K88ad)蛋白结构基因序列一致，表明该菌毛蛋白结构基因的保守区间没有发生变异。     

口蹄疫病毒基因工程疫苗研究进展

口蹄疫 (FootandMouthDisease ,FMD)是偶蹄动物的一种急性、热性、高度接触性传染病 ,被国际兽医局列为头号A类传染病。该病传播途径多、传播速度快 ,曾多次在世界发生大流行。虽然该病的死亡率不高 (幼畜除外 ) ,但造成动物生产性能下降 ,扑杀动物花费大量的人力、物力和财力 ,影响国际贸易 ,经济损失惨重。如 1997年我国台湾、2 0 0 0年日本和韩国、2 0 0 1年英国暴发的FMD可以说给该地区或该国畜牧经济以致命的打击[1] 。为此 ,世界各国非常重视FMD的研究。口蹄疫病毒 (FootandMouthDiseaseVirus ,FMDV)属于小RNA病毒科 ,口蹄…     

马立克氏病肿瘤细胞核基质蛋白成分的变化

用高盐缓冲液分别抽提马立克氏病（MD）肿瘤肝细胞及正常肝细胞的核 基质蛋白（NMP），通过高分辨二维凝胶电泳分析比较了两者NMP成分的变化。结果表明，两者之间在NMP成分上存在明显的差异。马立克氏病病毒（MDV）感染的肝细胞有8个NMP斑点有表达，有4个NMP斑点在MD样品的图谱中消失，有2个NMP斑点表达强度明显降低。有变化的蛋白斑点约占总斑点的28％。SDS－PAGE蛋白图谱同样表现明显的区别。MD肝细胞NMP以及Western blotting分析，其核纤层蛋白Lamin A的表达明显下降。本研究结果证明，MDV致肿瘤发生与NMP有密切关系，提示MD肿瘤细胞NMP作为特异性标记蛋白的能性。     

JEV分子生物学与新型疫苗研究进展

流行性乙型脑炎病毒（Japanese encephalitis virus,JEV)是一种严惩危害人畜健康的虫媒病毒。本文对JEV的基因组结构、结构蛋白、非结构蛋白及其功能、重组活疫苗和核酸疫苗的研究现状以及与常规疫苗相比所具有的优缺点等方面进行了较为详尽的综述，并且提出JEV复制的确切机制及其蛋白尤其是非结构蛋白的结构与功能尚需深入研究，以期为坦步改良JE新型疫苗打下基础。     

疱疹病毒潜伏感染与细胞凋亡关系的研究进展

能在神经系统建立潜伏感染是嗜神经性疱疹病的一个主要特征。大量的研究表明，潜伏相关基因的表达物是建立潜伏感染所不可缺少的因素外界刺激、宿主免疫力的降低等因素都可以使宿主由潜伏感染状态发病，成为带毒者和传播源，因此，对潜伏感染建立及维持机理的研究就显得尤为重要。潜伏期病毒的基因产物以及由病毒所激起宿主基因产物的改变及其相互作用，对病毒的潜伏感染是至关重要的。处于潜伏期的病毒在不导致病理性细胞死亡的条件下，是否抑制了细胞凋亡以达到延长细胞的生命而利于自身的生存还需要进一步研究。     

猪白细胞介素-2在甲醇酵母中的表达

将猪白细胞介素-2(pIL-2)的完整cDNA序列克隆到甲醇酵母(Pichiapastoris)表达载体pPIC3 5K中,在E.coli体系中鉴定得到阳性克隆子pPIC3 5K-IL2。将pPIC3 5K-IL2经SacI线性化后,转化入经LiC1致敏的P.PastorisGS115菌株中,得到的重组菌株经1%浓度甲醇诱导后,利用SDS-PAGE电泳,斑点杂交及去糖基化酶消化证实,在培养上清中获得了分泌型表达的猪白细胞介素-2(蛋白分子量约为20KD),其表达量可达到80mg/L。用CTLL-2细胞进行活性检测,生物学活性可达2×106IU/ml。对其表达情况进行时间梯度分析,确定第5天表达量达到最高点,为最佳诱导时间;分析连续4个批次的重组菌株表达情况,结果表明重组菌株在适当菌体浓度下连续培养均能稳定、高效的表达外源蛋白pIL-2。本实验为进一步大规模生产pIL-2提供了理论依据。     

猪细小病毒及其鉴别诊断研究

猪细小病毒是全世界猪群繁殖障碍最常见的病原之一。本病于1967年在英国报道以来，目前已广泛流行于世界各地(见表1)。我国于80年代初开始研究此病，中国兽药监察所1982年在国内率先分离到该病毒。相关统计资料显示猪细小病毒病已在我国普遍存在和流行(见表2)。     

猪圆环病毒研究进展

猪圆环病毒(Porcine circovirus，PCV)是断奶猪多系统衰竭综合(Postweaning pigs multisystemic wasting sndrom，PMWS)的病原。随着该病的不断出现，人们越来越注意到猪圆环病毒的危害性。为了更加全面地本质地认识该病毒，本文对其流性病学、理化特性、致病机理、诊断方法及分子生物学作了较为全面的综述。     

特异性抑制伪狂犬病毒EP0基因表达的siRNA分子的合成与筛选

EP0基因是伪狂犬病毒（Pseudorabiesvirus，PEV）的早期基因，可能与病毒复制及潜伏感染等有关。为了筛选特异性抑制EP0基因表达的siENA序列，本研究按照Ambion公司公布的siENA分子设计原则，设计并合成了3个针对PEVEa株EP0基因的siENA模板EP04、EP08和EP12，分别克隆到以CMV启动子的siENA表达载体pSilencer4．1-CMVneo中，构建相应的重组表达质粒p4．1-EP04、p4．1-EP08和p4．1-EP12。同时，将EP0基因的编码区克隆到真核表达载体pEGFP-N3中，按照读码框架与EGFP基因的5′端融合，获得重组表达质粒pEP0-EGFP。将p4-1EP04、p4-1-EP08、p4-1-EP12和阴性对照质粒p4．1-NK分别与pEP0—EGFP共转染IBES-2细胞，荧光显微镜观察、流式细胞仪和半定量RT—PCE检测结果表明，三个siENA分子均能不同程度地抑制EP0基因的表达，抑制效率从高到低依次为EP08、EP12和EP04；在进一步的病毒感染实验中也得到了与细胞转染模型一致的结论。这为深入研究EP0基因在PEV复制和潜伏感染中的作用奠定了基础。     

新常态下中国高等农业教育发展的战略取向

中国高等农业教育旨在促进和引领农业产业发展,在中国强国建设和乡村振兴战略中举足轻重。新常态下,我国农业产业呈现出新的业态,我国高等农业教育发展的优势和劣势同在,机遇和挑战共存,中国政府亟需引导和支持高等农业教育围绕农业产业的当下需求和未来趋势进行战略再谋划。