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21.
2019年河南某猪场暴发疑似猪伪狂犬病疫情,本试验采集发病猪的病料组织,进行伪狂犬病病毒(PRV)毒株的分离鉴定,并分析分离毒株的生物学特性。结果显示:分离毒株HNCY的TCID50为10-8.48/0.1 mL;一步生长曲线显示,分离毒株在12~24 h复制较快,48 h到达最高峰;分离毒株对小鼠具有较强的致死性,且肺脏中病毒含量最高;序列分析显示,HNCY株gC基因核苷酸序列与国内外PRV分离毒株的同源性为95.9%~100.0%,gD基因同源性为98.9%~100.0%;gC氨基酸序列与国内外PRV分离毒株的同源性为92.9%~100.0%,gD氨基酸同源性为97.5%~100.0%,且国内同源性高于国外;遗传进化分析显示,HNCY分离株gC、gD基因与欧美毒株在不同的大分支上,亲缘关系远;与国内分离株在同一分支上,且与2011年之前分离的PRV毒株在不同的小分支上,表明HNCY分离株属于国内变异毒株。 相似文献
22.
23.
PCR法对伪狂犬病病猪不同部位的检测及敏感性试验 总被引:8,自引:0,他引:8
应用PCR方法对PRV感染细胞及自然发病猪不同组织样品进行检测,感染细胞毒最低检出是为10^5个TCID50病料组织样最低取样0.1mg时,仍能得阳性结果其敏感性显著高于微量血清中和试验。PRV在自然发病猪体分布很广,脑,三叉神经节(三叉N节)。嗅球,扁桃体,心脏,肝,脾肺,肾均有PRV在存在的,PRV的检出率最高的组织为三叉神经节,其检了率为100%,其它对照病毒及传代细胞PCR反应产物电泳结果 相似文献
24.
人类一方面要保护野生动物及其生存环境,另一方面,对野生动物相关产品的需求(如裘皮、肉类、滋补品等)却日益增加,同时,人类也不能为消费动物资源而牺牲自身的健康。缓解其中矛盾的唯一办法是开展合法健康的人工养殖,也就是理性保护与科学利用动物资源。 相似文献
25.
伪狂犬病病毒Bartha株TK-/LacZ+突变株的构建及其生物学特性研究 总被引:3,自引:1,他引:2
本研究将伪狂犬病病毒Bartha株基因组与含有LacZ标志基因的TK基因转移质料pUEKPZ共转染猪肾传代细胞PK-5,细胞出现病变后,反复冻融3次收毒,按1:5稀释接种于IBRS-2细胞。在X-gal存在下挑取蓝斑,蓝斑筛选3次,再进行空斑试验,同时用PCR扩增LacZ基因,经3次空斑纯化,随机挑取的空斑均能扩增出LacZ基因,证实所获得的重组病毒为伪狂犬病病毒Bartha株TK^-/LacZ^ 突变株。TCID50试验表明,TK失活对Bartha株在细胞上增殖无影响;Balb/C小鼠试验表明,该突变对Balb/C小鼠的安全性明显高于Bartha亲本毒株。 相似文献
26.
牛流行热(Bovine Ephemeral Fever),又叫三日热,暂时热,是由弹状病毒科水疱病毒属的病毒引起的牛的一种急性、热性传染病。临床上,以高热、流泪、流涎、鼻漏,呼吸困难和四肢关节疼痛而引起跛行为其特征。病程较短,预后良好。但是能造成部分牛的死亡,怀孕母牛的流产,以及奶牛产奶量下降或淘汰,治疗费用高,治疗期间抗生素残留乳的废弃,经济损失相当严重。因此,对于该病的及时诊断和防治,显得尤为重要。现将该病的诊断和防治作一简介,以供参考。 相似文献
27.
28.
表达猪繁殖与呼吸综合征病毒修饰型GP5m蛋白的重组伪狂犬病毒的构建及其在小鼠的免疫反应 总被引:3,自引:0,他引:3
猪伪狂犬病毒(PRV)是一种良好的兽用活病毒疫苗载体。但以PRY基因缺失疫苗株TK^-/gE^-/LacZ^+为载体表达PRRSV GP5的重组病毒TK^-/gE^-/GP5^+免疫实验动物后难以激发抗PRRSV的中和抗体。为了进一步增强这种重组病毒的免疫效力,本研究用具有更好免疫原性的修饰的ORF5基因(ORF5m)代替天然ORF5基因,构建了表达PRRSV的修饰型GP5m蛋白的重组伪狂犬病毒TK^-/gE^-/GP5m^+。经PCR、Southem Blot、Western blot证实构建正确,并能表达具有活性的GP5m蛋白。将TX^-/gE^-/GP5m^+与TK^-/gE^-/GP5^+分别免疫Balb/c小鼠,结果TK^-/gE^-/GP5m^+免疫小鼠不仅产生了较高水平的抗PRRSV的中和抗体(3/6只达到了1:16),而且在诱导PRRSV特异性细胞免疫方面也显著优于TK^-/gE^-/GP5^+,表明TX^-/gE^-/GP5m^+是一种极有希望的PRRSV和PRV二价基因工程候选疫苗。 相似文献
29.
胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumoniae, APP)是一种严重危害世界养猪业的重要病原菌,至少有15种血清型,根据所有血清型菌株仅在感染猪体内产生外毒素ApxIV的特点,建立了一种能够区分感染猪与免疫猪的鉴别诊断方法ApxIV-ELISA。本研究将该诊断方法进一步研制成试剂盒,对其特异性、敏感性、重复性和稳定性进行了测试,与间接血凝试验及IDEXX公司的CHEKIT-APP-APXIV试剂盒进行了对比研究,并用该试剂盒检测了来自中国、英国、丹麦、美国、加拿大和澳大利亚的临床猪血清1453份。结果表明ApxIV-ELISA试剂盒具有很高的特异性和敏感性,与CHEKIT-APP-APXIV试剂盒的检测符合率为91.37%;三批试剂盒的批内和批间的重复性良好(变异系数均<15%);试剂盒在2~8℃保存9个月内稳定性良好;ApxIV-ELISA试剂盒能够有效区分APP感染猪与三价灭活疫苗或亚单位疫苗免疫猪。 相似文献
30.
基于西门利克森林病毒复制子的"自杀性"DNA疫苗载体的构建及其体外表达特性 总被引:2,自引:0,他引:2
对西门利克森林病毒(SFV)复制子质粒型表达载体pSfV1进行改造,即在SFV非结构蛋白(nSPs)上游插入依赖于RNA聚合酶Ⅱ的人巨细胞病毒立即早期启动子/增强子序列(hCMV IE Pro/Enh),同时在pS-FV1的多克隆位点下游插入SV40 poly(A)终止信号序列,获得可以完全在DNA水平上操作并具有自主复制功能的表达载体pSFV-DNA。为了进一步探讨改造载体的转染效率、表达能力以及是否能诱导细胞凋亡等特性,将报告基因EGFP插入pSFV-DNA中亚基因组启动子下游,构建的重组表达质粒pSFV-EGFP转染BHK-21细胞,转染后12h即可观察到荧光,但转染效率明显低于直接由hCMV IE Pro/Enh驱动的EGFP真核表达质粒pEGFP-C1;提取转染后48h的细胞基因组DNA,电泳发现pSFV-EGFP转染细胞均呈典型的DNA断裂(ladder),而pEGFP-C1转染细胞未观察到这种现象。上述结果表明:改造的载体不仅可完全在DNA水平上操作,而且能正确表达外源基因和诱导细胞凋亡,为开展各种病原微生物的“自杀性”DNA疫苗研究提供了良好的工具。 相似文献