C型产气荚膜梭菌α、β1、β2毒素基因融合及免疫原性研究

为了构建具有良好免疫原性的α-β1-β2融合蛋白,利用PCR技术,从含C型产气荚膜梭菌α毒素基因的克隆质粒pETXAl中扩增出0.95 kb α毒素基因,将其连接到经Nco I单酶切并用碱性磷酸酶处理的含1.65 kb β1-β2融合基因的重组质粒pETXB1B2上,构建含2.6 kb α-β1-β2融合基因的表达质粒重组菌株BL21(DE3)(pETXAB1B2).经酶切鉴定和序列测定证实.构建的重组质粒pETXAB1B2含有α-β1-β2融合基因,且基因序列和阅读框架正确.经ELISA检测,重组菌株表达的α-β1-β2融合蛋白能够被α、β1和β2毒素抗体识别.表达优化结果表明,以IPTG为诱导荆诱导α-β1-β2融合基因表达的优化条件是:培养基PH 7.5,培养温度37℃,IPTG浓度0.4 mmol.L-1,菌体生长密度OD600达到1.0时加入IPTG,诱导时间5 h,此时α-β1-β2融合蛋白表达量为31.2%.免疫试验结果表明,α-β1-β2融合蛋白免疫的小鼠可以抵抗1MLD(最小致死量,minimum lethal dose)C型产气荚膜梭菌标准株C59-44毒素攻击,表明构建的重组菌株可以作为预防仔猪红痢基因工程亚单位苗的候选菌株.     

高等职业学院汽车检测与维修专业理论实践一体化教学探究

高职汽车检测与维修专业中的"理实一体化"教学指的就是理论和实践一体化教学模式,这不仅体现了高职汽车维修专业新的教学发展方向,同时也反映了社会对汽修专业毕业生的客观能力要求。北京农业职业学院机电工程学院汽车教研室尝试对"汽车发动机构造及检修"这门课运用"理实一体化"教学,通过3个轮次的实践,已经在汽车底盘构造及维修、汽车电器、汽车自动变速器等课程中实施,取得了较好效果。     

图解柴油发动机供油提前角检查调整

现在,我国的新型拖拉机保有量逐年递增,但在使用上还是许多的老机手在操作。由于他们的文化水平不高,对于新型发动机的使用保养不甚明了,我们用图解的方法加以介绍,以方便广大农机手的操作使用。本期介绍拖拉机用柴油发动机供油提前角检查调整方法。     

软枣猕猴桃酱的制作技术

<正> 软枣猕猴桃(Aclinidia arguta Planch.)是我国猕猴桃属的一个种。东北三省分布量很大,吉林省年产量1000万kg以上。其果实营养丰富、维生素C含量高,具有浓郁的果香、独特的风味和翠绿色泽。但果实采收后很快变软,不耐贮运,影响了它的发展速度。为了开发利用这一果品资源,从60年代初开始研制软枣猕猴桃系列产品的加工工艺。先后试制了糖水软枣、软枣汁、软枣糖和软枣酱等。现将软枣猕猴桃酱的制作方法报告如下。     

甘肃河西走廊甜菜象虫种类分布及防治研究

据1986～1989年的调查研究,甘肃河西走廊危害甜菜的象虫种类有:甜菜象,甜菜毛足象,甜菜碗额象,粉红锥喙象,黄褐纤毛象,黑斜纹象,欧洲方喙象等19种。其中以甜菜象和甜菜毛足象为优势种,已成为甜菜生产上的重要害虫。药剂处理种子防治甜菜象虫的试验结果表明:用35％甲基硫环磷乳油、种子和水以2.2～3.0:100:100的配方处理甜菜种子的防治效果较佳,其毒苗杀虫率达90.0～92.0％,且残效期较长,田间保苗率达83.5～92.5％,挽回甜菜块根产量损失29.7～39.1％。此项措施在生产示范和推广应用中也取得了显著的防治效果。     

香菇菌砖栽培新法

1981年,我们进行了一种香菇菌砖的新法栽培,收到了较好的效果。材料为锯末90斤,麸皮10斤,糖1斤,石膏1斤,河砂100～200斤。将锯末、麸皮混匀,入锅炒3～4小时,停火后在20～32℃下保持4～6小时,再炒2～3小时起锅。在拌料室将石膏、白糖溶于开水中,再与料拌匀,加适量的水。待温度降至32℃,将栽培种拌入培养料。制砖时,先将河砂入锅猛火炒数小时,起锅铺入60×30     

新疆典型流域水土资源与生态环境现状分析

根据和田河流域水土资源开发利用现状及气候条件,研究流域水土资源开发利用与生态环境的相互影响关系,并从社会经济与自然环境协调发展的角度,提出切合实际的干旱区绿洲可持续发展的策略与建议。     

视网膜色素上皮细胞光损伤模型的建立与评估

目的 通过不同光照时间和光照强度,探索建立最佳视网膜色素上皮细胞光损伤模型,为视网膜光损伤细胞造模方法提供理论依据。方法 选取原代大鼠视网膜色素上皮细胞和大鼠视网膜色素上皮细胞系,LED白色冷光灯模拟自然光源,选取（2 500、5 000、7 500、10 000 Lux）作为光照强度,以不同光照时间（6、12 h） 对细胞进行照射,建立光损伤模型,镜下观察细胞形态,采用MTT法检测细胞活力。结果 光照处理后,RPE细胞活力受到抑制,随着光照强度及时间增强,细胞活力降低明显,原代细胞6 h 7 500、10 000 Lux和12 h 5 000、7 500、10 000 Lux,细胞系6 h 10 000 Lux和12 h 7 500、10 000 Lux,视网膜色素上皮细胞活力均低于空白组（P<0.01）,差异有统计学意义。结论 RPE细胞活力受光照时间及强度抑制,原代细胞较细胞系对光损伤更敏感。     

球形棕囊藻溶藻菌的分离鉴定及溶藻作用研究

【目的】从广西北部湾海域分离筛选和鉴定针对球形棕囊藻的溶藻细菌，研究其溶藻特性。【方法】采用梯度稀释和平板划线法从海水水样中分离纯化溶藻菌，菌藻共培养后，通过观察颜色和测定叶绿素a含量筛选溶藻菌，形态观察和细菌16S rDNA测序鉴定溶藻菌；通过光学显微镜观察溶藻菌的溶藻过程，测定溶藻菌菌液、菌体重悬液、无菌滤液的溶藻率，分析其主要溶藻方式，通过测定菌藻共培养后藻液的叶绿素a含量，研究溶藻菌的生长时期、菌液添加量、球形棕囊藻的生长阶段、光照等对溶藻效果的影响。【结果】分离筛选出一株具有高效溶藻作用的溶藻菌PG47，鉴定为高地芽孢杆菌。PG47间接抑藻，溶藻活性物质可以破坏藻细胞的细胞壁和细胞膜。对数期以后的菌液均具有较好的溶藻活性，且当菌液与藻液体积比达到5%以后，溶藻率就高达80%，对处于延迟期、对数期、平台期的球形棕囊藻均具有高效的溶藻效果，在不同光照条件下，溶藻率均维持在60%以上，适用性广。【结论】筛选得到高地芽孢杆菌PG47是一株高效溶球形棕囊藻菌，为治理球形棕囊藻赤潮提供了一种新思路。