关于甜菜暖菜保藏技术的初步分析

在甜菜制糖加工期中,合理的保藏技术措施,是当前生产迫切需要解决的实际问题。我们在1984～1986年的二个生产期中,参加了哈尔滨糖厂暖菜大堆保藏试验,分析了暖菜不经劈堆散热。直接转为冻藏的可行性。保藏试验及管理方法大堆积量长期暖菜保藏的成堆 试验分大堆试验与对照堆试验。大堆试验堆,采用底宽20米,上宽12米,高3.1米,长74米,堆积量为2270吨,堆顶呈拱形。对照堆规格为底宽9米,上宽4米,高2.2米,堆长45米,堆积量是424吨。     

香蕉ACC合成酶cDNA5‘末端的快速扩增

采用cDNA末端快速扩增（Rapid amplification of cDNA ends,RACE）的方法对香蕉ACC合成酶的cDNA5'末端进行了扩增，获得677bp的产物，序列测定的结果表明，其中一个连续编码149个氨基酸，其序列含有ACC合成酶的第一和第二保守区和一段长230bp的非翻译区。     

无核荔枝MYB转录因子基因克隆及进化分析

为获得在无核荔枝中胚珠退化过程中差异表达全长MYB转录因子基因,并为其功能研究打下基础,根据从已构建的无核荔枝胚珠败育SSH消减文库中得到的差异表达的MYB转录因子EST序列,提取高质量的总RNA,运用SMART RACE技术,获得一个1177bp的MYB基因核苷酸序列。生物信息学分析表明,该序列含有879 bp的开放阅读框,推测的蛋白质为292个氨基酸,具有2个SANT结构功能域,在系统发育树上与大豆MYB基因亲缘关系最近。该基因为MYB基因家族中的新成员。     

抗真菌蛋白Rs-AFPs生物学特性的研究

采用浸渗法制备萝卜种子抗真菌蛋白Rs－AFPs粗提液进行抑菌试验,结果表明：在萝卜种子发育过程中,Rs－AFPs是在一定时期（约开花后45d）开始合成并逐步积累的,因此充分成熟的萝卜种子Rs－AFPs粗提液具有较强的抑菌活性。Rs－AFPs的耐酸性、耐碱性、热稳定性及对不同病原真菌的抗性研究结果表明,在pH为4和10时．Rs－AFPs能保持90％的活性;在80℃水浴60min其活性仍为100％,在100℃水浴30min和45min,分别具有80％和50％的活性;在4℃下存放5、20、35、45d,Rs－AFPs的活性分别保持100％、90％、80％和70％。Rs－AFPs对植物丝状病原真菌具有广谱抗性,如对供试病原菌镰刀菌、疫霉菌、芭蕉炭疽菌和稻瘟菌均表现出颇强的抑菌活性,Rs－AFPs无抗细菌活性。     

海南岛土著药用木本植物的区系组成与特征

对海南岛野生的土著药用木本植物区系进行研究,发现该区系由332种206属70科组成,区系特点为热带北缘特征,物种主要集中在本岛的南部、中南部和东南部地区.探讨了海南岛药用植物资源应用的现状与将来发展的思路.     

荔枝SRAP—PCR反应体系的优化

SRAP（sequence-related amplified polymorphism）是基于基因的内含子和外显子区域进行检测的新型分子标记技术,具有多态性高、重复性好、易测序、便于克隆目标片段等特点,在荔枝（Litchi chinensis Sonn）中还没有相关的研究报道。为了建立适合荔枝的SRAP反应体系,对反应体系中的DNA模板、Mg^2＋、dNTP、引物、砌DNA聚合酶诸因子的用量进行了探索,确立了适合荔枝的SRAP反应体系为：在20μL反应体系中,模板DNA为40ng,Mg^2＋浓度2．5mmol／L,dNTP0．3mmol／L,引物5mmol／L,TaqDNA聚合酶1．0U。扩增程序为：94℃预变性3min,反应前5个循环在94℃1min、35℃1min、72℃1 min的条件下运行;随后的35个循环退火温度提高到50℃;最后72℃延伸10min。利用该反应体系对荔枝10个不同品系进行SRAP反应,用5％的变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测,结果显示：不同品系间DNA谱带多态性丰富。证实该体系稳定可靠,可以用于荔枝的分子标记研究。     

PRSV-CP转基因番木瓜表达与抗病能力关系的研究

利用ＲＮＡｄｏｔｂｌｏｔ（点杂交）和Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ（分子杂交）等技术，分析了ＰＲＳＶ－ＣＰ转基因番木瓜转录水平（ｍＲＮＡ）的表达，再通过ＲＮＡ斑点杂交和间接斑点ＥＬＩＳＡ等技术估测了ＲＮＡ、蛋白质在ＰＲＳＶ－ＣＰ转基因番木瓜中的表达量，最后通过大田攻毒试验检测了ＲＮＡ、蛋白质的表达量与抗病能力的关系。     

利用mRNA差别显示技术分离红树植物许树耐盐相关cDNA

选用适应甜土种植10余年的红树植物许树分株,在室内分别以盐水与自来水进行沙培.分别提取叶片的总RNA.通过oligo（dT）12CA反转录合成cDNA第1链,以此为模板,用4组10核苷酸随机引物与锚引物o1igo（dT）12CA组成的引物对,进行PCR扩增,选择差异表达片段,发现3个稳定的差异cDNA只存在盐水培养下许树叶片中,而自来水培养条件下却没有.这3个差异cDNA片段分别命名为colb1,colb2,colb3.对3个cDNA采用DIG High Prime DNA Labeling and Detection Starter KitI进行RNA杂交检测,只有colb1在盐培许树叶中呈现稳定的显色信号,在自来水浇灌的许树叶中却无显色信号,colb2和colb3均无显色.可见colbl（463 bp）是耐盐相关cDNA.将片段colb1克隆,并进行序列分析,其AT碱基对占全序列的61.74%.将序列提交NCBI进行BLASTN和BLASTX查询,未发现相关同源cDNA.耐盐相关cDNA的获得将为分离全长耐盐基因和其耐盐机制的研究奠定了基础.