天蚕抗菌肽B基因在广霍香抗病育种中的应用

用天蚕抗菌肽Ｂ基因转化广霍香,以期产生抗广霍香青枯病的转基因株系。通过农杆菌介导的叶盘法将抗菌肽Ｂ基因转入了广霍香的组织细胞,在Ｋａｎ的筛选培养基上经过丛芽途径获得转基因植株;采用ＤＮＡ Ｄｏｔ ｂｌｏｔ,Ｓｏｕｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ,ＲＮＡ Ｄｏｔ ｂｌｏｔ和大田攻毒试验证实的抗菌肽Ｂ基因已整合到再生植株的核基因组中,获得了高水平的表达,产生较强的抗病效果。     

cDNA文库和PCR技术相结合的方法克隆目的基因

建立了一个以ＰＣＲ为基础,结合ｃＤＮＡ文库构建来克隆基因的方法。即通过寻找基因的保过区段,设计合成一对特异性引物。以双链ｃＮＡ－ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔⅡＳＫ载体连接物为模板,利用载体上的标准测序引物和基因的特异引物,ＰＣＲ扩增出包含ｃＤＮＡ两末端部分的基因。运用该方法我们克隆了稻瘟病菌的３－磷酸甘油醛脱氢酶基因。与其它克隆方法相比,该方法不但稳定而且有快速与简便的优点。     

分子标记技术在荔枝研究中的应用

详细论述了分子标记技术在荔枝研究中的应用,主要涉及三个方面:荔枝品种鉴定和分类、种质问遗传多样性及亲缘关系分析;荔枝分子标记遗传连锁图谱的构建;与优良性状相关的分子标记的获得.并对其应用前景和存在问题进行了评述.     

番茄种质的随机扩增多态性DNA指纹分析

建立番茄的ＲＡＰＤ反应体系。从６５个随机引物中筛选出５个（Ｈ１１,Ｈ１５,Ｋ６,Ｇ３,Ｇ５）建立１０个番茄种质的ＲＡＰＤ指纹图谱,共产生４８条带,大小在３００－３０００ｂｐ之间,其中,２３条带（４８％）为公共带,２５条带（５２％）具有多态性。结果表明,Ｇ１与Ｓ２,Ｇ３与Ｇ９亲缘关系较近。     

异戊烯基转移酶基因(ipt基因)的克隆、序列分析及植物表达载体的构建

从Agrobacteriumtumefaciens(strainAKE10)中分离其质粒并以质粒DNA为模板进行多聚酶链式反应,特异扩增出一条长约720bp的DNA片段,经克隆及序列测定表明,为根癌农杆菌AKE10质粒异戊烯基转移酶基因的完整编码序列,与Genebank中公布的核苷酸序列具有100%的同源性。与A.tumefaciensPO22、Tm-4、BO542菌株和A.vitisCG474、Tm4菌株质粒中异戊烯基转移酶基因进行序列比较,同源性分别为90%、89%、86%、89%和89%;推导氨基酸序列的同源性分别为90.42%、88.23%、90.10%、89.58%和89.12%。成功构建了异戊烯基转移酶基因植物表达载体pBT,为探索植物细胞分裂素生物合成的分子机制、作用机理及激素互作等研究打下了基础。      

哈密瓜ACC氧化酶cDNA克隆及其序列分析

以哈密瓜成熟果实为材料,用改进的异硫氰酸胍一步法提取总ＲＮＡ,通过ＲＴ－ＰＣＲ方法和ＤＮＡ序列测定证实获得了甜瓜ＡＣＣ氧化酶多基因家族中一个与果实后熟有关的基因ＣＭ－ＡＣＯ１的ｃＤＮＡ克隆ｐＣＭ－ＡＣ０１,序列分析结果表明该序列与国外以罗马甜瓜为材料获得的相同基因的ｃＤＮＡ序列完全相符。推断该基因在甜瓜种内可能是完全或高度保守的,不同类群之间无进化上的分歧。     

寒露蜜桃采后呼吸变化规律

研究寒露蜜桃不同贮藏条件下其呼吸生理的变化规律。结果表明：在室温（２５ ℃±２ ℃） 和低温（０ ℃～１ ℃） 条件下,均出现两个呼吸高峰。适宜的成熟度,预冷温度,包装及乙烯吸收剂均能降低其呼吸强度,推迟两次呼吸高峰出现。     

Noni基因组DNA提取及RAPD分析

针对Noni含有大量的多糖、多酚等次生代谢物设计其DNA的提取方法,得到的Noni基因组DNA纯度高、完整性好。对5个Noni品种进行RAPD分析,结果表明,国外品种(库克、泰国、马来西亚)和国内品种(西沙、三亚)各聚为一类。     

杏43个品种资源的RAPD分类

对 43个杏品种进行RAPD扩增 ,根据相似系数进行UPGMA法聚类 ,结果发现 ,品种间表现出较强的地理分布集中性 ,也有广泛遗传信息交流。个别古老品种地缘关系很近 ,却与其他当地品种差距很大 ,可能是其基因较为原始保守所致。     

福建稻瘟菌群体遗传多样性RAPD分析

以 OPG、 OPH、 OPK等 3个系列 6 0个引物对福建稻瘟菌进行了 DNA随机扩增多态性 (RAPD)分析 .6 0个引物中有 2 1个扩增出多态性条带 ,表明福建省稻瘟菌群体有丰富的 RAPD多态性 ,可为该菌的遗传分析提供大量的遗传标记 .对 RAPD条带多样性分析发现龙岩江山病圃稻瘟菌群体遗传多样性较简单 ,有明显优势种群 ,可能影响其抗瘟评定的代表性 ,说明多点进行品种抗性鉴定是必要的