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31.
一种快速、简便提取大豆油DNA的方法及转基因大豆油的检测 总被引:5,自引:0,他引:5
【目的】DNA的提取是GMO(Genetically modified organism)作物检测中重要步骤,DNA的质量关系到GMO检测的成败。【方法】本研究以大豆油为材料,探索出一种快速、简便的提取大豆油DNA的方法。【结果】该方法能从10 ml大豆油中提取0.4 μg高纯度DNA,可用于PCR检测。提取市场上出售的十几种精练大豆油的DNA, 针对 35S、Nos、EPSPS和Lectin 基因进行了PCR检测,分别扩增出不同的目的片段。【结论】大豆油中有残存的DNA碎片,在转基因大豆油中能扩增出外源基因的片段。本研究为大豆油的外源基因的检测提供了可行方法。 相似文献
32.
33.
34.
植物油体表达体系的研究进展* 总被引:8,自引:1,他引:8
介绍了植物种子中油体和油体蛋白(oleosin)的结构特征及其编码基因的调控,阐述了用植物油体表达体系这一新型植物生物反应器生产目的蛋白的研究进展和前景。 相似文献
35.
中棉光诱导基因Gacab 启动子的克隆及其功能分析 总被引:3,自引:0,他引:3
利用加接头法,从金华中棉(Gossypium arboreum)中分离获得了捕光叶绿素a/b蛋白复合体基因Gacab编码区5′上游的调控序列1009bp,命名为Gacab P,与公布的其它植物cab启动子序列比较,没有明显的同源性。将GacabP和197、504、779bp的5′端缺失体分别与gus(uid A)基因融合,构建植物表达载体。用Gacab P::gus转化烟草(Nicotiana tabacum cv.NC89),GUS组织化学分析发现Gacab P驱动gus基因在转基因烟草的叶片表达。在暗培养的转基因烟草叶片中Gacab P不表现活性,而光能够诱导gus基因的表达,表明Gacab P是一种光诱导型启动子。用基因枪轰击水稻愈伤组织,结果显示,Gacab P及3种不同长度的缺失体均可驱动gus基因的瞬时表达,以504bp的活性最高,瞬时表达水平明显高于35S启动子,197、779和1009bp的表达减弱,由此推测-197~-1bp为Gacab基因的基本启动子,-504~-197bp间包含正调控元件,-1009~-504bp间包含负调控元件。 相似文献
36.
海岛棉 GbRac1基因过量表达提高转基因烟草离体叶片对赤星病的抗性 总被引:4,自引:0,他引:4
利用简并引物PCR和3’RACE,克隆了海岛棉(Gossypium barbadense)GbRac1的编码基因。Northern—blot分析表明,海岛棉GbRac1基因在转录水平上受棉花黄萎病菌(Verticillium dehliae)的诱导,诱导后mRNA表达量显著增加。构建组成型植物表达载体pRac,转化烟草(Nicotiana tabacum)品种NC89,离体叶片抗病性鉴定表明,转GbRac1基因烟草对烟草赤星病(Altemaria altemata)的抗性明显提高。这暗示GbRac1在植物抗病基因工程中具有潜在的应用价值。 相似文献
37.
中棉(Gossypium arboreum)光诱导基因Gacab启动子在转基因烟草中的功能缺失分析 总被引:1,自引:0,他引:1
分离了金华中棉(Gossypiun arboreum var.jinhua)光诱导基因cab 5'上游的调控序列1 009 bp,并对其功能进行了分析,证明获得的这一DNA片段具有驱动光诱导表达的功能.为了进一步分离具有最大转录活性的最小光诱导启动子,根据光诱导表达调控元件所在的位置,构建了Gacab P和197 bp、504 bp、779 bp的5'端缺失体,并将这些缺失体分别与gus(uid A)基因融合,构建植物表达载体.用农杆菌介导法转化烟草,获得转基因烟草.GUS组织化学分析表明,转基因烟草的T1代种子在光下培养时,只有Gacab P驱动gus基因在转基因烟草的叶片表达,其他3个启动子驱动gus基因在转基因烟草的整个植株中均有表达;当转基因烟草的T1代种子在暗中萌发及培养时,GacabP驱动gus基因在转基因烟草中无表达,其他3个启动子驱动gus基因在转基因烟草的整个植株中均有表达.GUS定量分析表明,-504~-1 bp的启动子缺失体启动活性最高,比CaMV35S启动子高0.6倍.上述结果表明只有全长的Gacab启动子具有光诱导和绿色组织特异表达特性,且-504~-1 bp的启动子缺失体启动活性最高. 相似文献
38.
香蕉抗真菌病基因工程策略 总被引:2,自引:0,他引:2
影响香蕉生产的真菌病害有枯萎病、黄叶斑病、黑叶斑病等,尤其是枯萎病4号小种,危害严重,造成毁灭性损失,目前尚无理想的防治药剂,迫切需要培育抗枯萎病的香蕉品种,但是栽培香蕉多为三倍体,难以通过有性杂交的方式改良。抗病基因工程是提高香蕉抗枯萎病能力的途径之一,随着香蕉转基因技术体系的建立和逐步完善,香蕉抗病基因资源的挖掘及植物抗病新基因的不断克隆,利用基因工程技术创造抗病新种质、培育抗病香蕉品种将成为可能。 相似文献
39.
海岛棉GbNPR1基因全长cDNA的克隆及其在烟草中的表达 总被引:9,自引:0,他引:9
【目的】为棉花抗黄萎病基因工程育种提供新的基因源。【方法】以海岛棉为材料,利用同源序列法和RACE技术克隆海岛棉中SAR途径的主要抗病信号元件NPR1(none expresser of PR gene)的全长cDNA序列。【结果】推导的氨基酸序列与已知NPR1的同源性较低(39%~57%),但在功能区的同源性较高(79.2%),GbNPR1蛋白中含有BTB和锚蛋白重复序列结构域,且在起始密码子上游存在2个W框。在拟南芥中,A.tNPR1起始密码子上游有3个W框,对诱导NPR1的表达和激活NPR1介导的植物防卫反应至关重要,锚蛋白重复序列则是NPR1实现其功能必不可少的。构建了组成型植物表达载体,通过农杆菌介导法导入烟草,转基因植株经PCR和Southern杂交检测,表明目的基因已整合到烟草基因组中。离体叶片接种法对转基因烟草进行抗病性鉴定,表明对烟草赤星病菌(Alternaria alternata)的抗性有明显提高。转基因烟草经T1代遗传分析发现,基因以单拷贝插入。【结论】本研究得到的基因为海岛棉中NPR1的同源基因。 相似文献
40.
大豆脂肪氧化酶-1缺失基因(lx_1)的RAPD标记 总被引:9,自引:1,他引:9
采用RAPD技术,以大豆脂肪氧化酶缺失近等基因系Century(分别含有Lx、lx1、lx2、lx3、lx1.3、lx2.3基因)为材料,筛选了520个随机引物,发现13个引物在6个近等基因系材料中具有多态性,其中针对lx1、lx1.3基因的多态性引物有6个,分别为OPG061300、S352900、S370900、S377780、S287950、和S389300。引物S352经多次重复和组合96P11×Century-1的F2代分离群体检测,χ2测验符合1∶2∶1分离比率,表明S352与lx1基因紧密连锁 相似文献