大口黑鲈溃疡综合征病毒MCP基因序列分析及PCR快速检测方法的建立

为了早期快速诊断近年来流行于广东省养殖大口黑鲈(Micropterussalmoides)中的病毒性溃疡综合征,本研究用基因组步移的方法获得了大口黑鲈溃疡综合征病毒(Largemouthbassulcerativesyndromevirus,LBUSV)主要衣壳蛋白(MCP)基因,该基因编码区全长1392bp。通过序列比较分析,在MCP基因内确定了一段241bp的特异性较强的片段作为靶序列,设计并合成引物,经过优化PCR反应条件,建立了可以快速检测大口黑鲈溃疡综合征病毒的PCR方法。实验表明,在PCR进行到30个循环反应时可以检测到的质粒最小浓度是104拷贝数/μL,相当于104个病毒粒子。利用该方法,从天然感染LBUSV的大口黑鲈脾脏组织DNA可扩增出241bp的片段,而健康大口黑鲈和感染了传染性脾肾坏死病毒样病毒的大口黑鲈脾脏组织则没有扩增条带。本研究建立的PCR检测方法具有检测快速、成本低、准确性高的特点,适用于大范围早期病害诊断的推广应用。     

日粮中结构性碳水化合物水平对奶牛瘤胃发酵及生产性能的影响

结构性碳水化合物是反刍动物的一种必需营养素.奶牛日粮中含有适当比例的结构性碳水化合物,对其健康、高产有重要意义.本文总结归纳了国内外有关结构性碳水化合物的相关研究文献和资料,分析了结构性碳水化合物对奶牛瘤胃发酵内环境及终产物的调控作用;对生产性能的影响以及中性洗涤纤维有效性的研究方法等,为科学配制奶牛日粮,实现高效饲养提供依据.     

种花生要因地制宜

2007年花生市场价格大幅攀升,玉米和水稻价格变化不大,加之又是花生丰收年,农民种植花生每亩收入1500～2000元,比种植玉米和水稻多收入300～1000元。因此2008年凌海市花生种植面积大幅度增加,一些不适合种植的土壤和地区也将种上花生.     

大口黑鲈溃疡综合征病毒甲基转移酶基因序列分析与原核表达

为了对新分离到的大口黑鲈溃疡综合征病毒(Largemouth bass ulcerative syndrome virus,LBUSV)的特征作进一步了解,促进LBUSV、DFV(Doctor fish virus)和LMBV(Largemouth bass vires)这类病毒的深入研究,本文克隆了LBUSV DNA甲基转移酶(DNA MTase)基因约200 bp的保守核心片段,用基因组步移的方法扩增到了核心片段的侧翼序列,获得了DNA MTase基因的编码区全长序列.序列分析表明,DNA MTase基因开放阅读框共663 bp(GenBank登录号:GU256634),编码220个氨基酸.结构域分析显示,LBUSV DNA MTase蛋白具有4个保守的DNA MTase结构域Ⅰ、Ⅳ、Ⅵ和Ⅷ,以及辅酶结合位点、底物结合位点和DNA结合位点等DNA MTase活性位点,其中的脯氨酸-脯氨酸-半胱氨酸三肽是潜在的催化位点.另外,本文还根据DNA MTase基因开放阅读框设计引物,PCR扩增和酶切后插入到pBV220载体中,经转化大肠杆菌(Escherichia coli)DH5a,温度诱导和SDS-PAGE检测,重组菌在分子量25 kD处有一条特异蛋白带,重组蛋白约占菌体总蛋白的30%.研究结果推测,该基因编码的蛋白具有DNA甲基化的功能,该病毒的分类地位为虹彩病毒科蛙病毒属.     

鲁棉研25号杂交制种高产栽培技术

<正>一、制种概况杂交制种田设在4连放牧地,土质沙壤土,无枯、黄萎病,无盐碱。制种品种为鲁棉研25号,种植面积1.3公顷,其中父本0.1公顷,母本1.2公顷,父本株行距配置(60+16)×8.5厘米,母本株行距配置     

华南鲤选育品种与地方品种的遗传多样性比较分析

华南鲤(Cyprinus carpio rubrofuscus)作为优质的地方鲤鱼品种禾花鲤在广东省粤北地区有着悠久的稻田养殖历史。为了解人工养殖和选育对华南鲤群体的遗传多样性和遗传结构的影响,为华南鲤的种质资源保存和育种利用等提供依据,本研究采用16对微卫星引物对华南鲤第5代选育群体(F5)和2个地方品种(乳源群体,乐昌群体)的遗传多样性进行了比较分析。结果显示,在3个群体中,16对微卫星引物均表现为多态性,共扩增得到119个等位基因,每个微卫星座位检测到的等位基因数为3~10个,平均每对引物7.44个。3个群体的平均期望杂合度(He)分别为0.636 0、0.698 9和0.775 1,Shannon多样性指数(I)分别为1.206 3、1.402 0和1.612 2,平均多态信息含量(PIC)分别为0.570 1、0.645 8和0.720 7,表明3个群体都具有较高的遗传多态性(PIC0.5000),但地方品种的遗传多样性水平高于选育品种。3个群体各个微卫星位点上的遗传分化指数(Fst)值介于0.044 0~0.246 8,平均值为0.102 8,表明群体间的遗传变异水平中等。群体间遗传分化指数(Fst)配对比较结果显示,选育群体F5与乐昌群体的遗传分化指数值最大(0.182),乳源群体和乐昌群体2个地方群体间则最小(0.058)。实验结果表明,人工选育加快了华南鲤选育品种与地方品种的遗传分化,也导致了选育品种遗传多样性下降,但选育品种遗传多样性水平依然较高,还具有进一步选育的潜力。本研究结果为下一步制定华南鲤新品种选育计划提供基础遗传数据。     

酒泉市网室食葵杂交制种技术

正在酒泉地区,食葵杂交制种技术已形成规模,被深入推广,生产出了许多的高品质种子。网室食葵杂交制种技术面积也越来越大,以下就对食葵网室杂交制种技术做以介绍。1网室的作用利用纱网不但能进行隔离,防止昆虫传粉,增进品质,提高产量,而且随着作物害虫种类的增多和害虫抗性的增强,农药用量增大,农药残留严重,网室栽培越来越受到人们的重视。     

昌吉州农药使用现状及农药减量控害使用对策

为推进昌吉州农药使用量零增长行动进程,本文通过分析近年来昌吉州农药使用情况及存在问题,探索农药减量控害使用对策,合理控制农药使用,推进昌吉州农业可持续发展。     

高效节能日光温室蔬菜栽培技术

本文对高效节能日光温室的建设、蔬菜栽培模武技术、温室蔬菜病虫害发生及防治措施的调查,阐述了高效节能目光温室蔬菜栽培技术。     

杂交尖塘鳢人工繁殖及饲料驯化技术要点

<正>尖塘鳢肉嫩味美、无肌间刺、蛋白质水平高,在高档水产品市场很受欢迎,市场售价在100～300元/千克。目前在广东、海南等地已规模化养殖,年产量达10多万吨。杂交尖塘鳢(云斑尖塘鳢♀×线纹尖塘鳢♂)生长上具有显著的超亲杂交优势,且容易进行饲料驯化,2009年后杂交尖塘鳢苗种陆续扩大其市场占有率,苗种的需求逐年递增。