烟草绒毡层特异启动子pTA29在棉花中的表达特性

烟草绒毡层特异启动子pTA29 (TA29 promoter)已用于多种植物雄性不育和花粉发育的研究。作为外源特异表达启动子pTA29在棉花中的表达特性尚不清楚,为了研究该启动子在棉花中的表达特异性,本文构建了pTA29:gus融合基因,并将其转入棉花。研究发现在GUS染液中添加10%的乙醇可以抑制棉花花药内源GUS活性。用改良的GUS染液进行组织化学染色表明,pTA29:gus转化植株的GUS活性主要存在于花药中,并在花蕾长为6 mm和15 mm的花药中有2个活性高峰,而在根、茎、胚珠、花瓣、苞叶中未被检测到。与烟草不同,在pTA29:gus棉花转化植株的叶片表皮毛和花粉中也能检测到GUS活性。定量RT-PCR分析表明转化子中gus基因的转录水平与GUS活性一致。上述结果表明,烟草绒毡层特异启动子pTA29可以控制下游基因在棉花花药中优势表达;在利用该启动子进行棉花基因功能以及雄性不育研究时,应注意该启动子在棉花中的表达范围和组织特异性。     

利用FBP7::iaaM转基因材料同步改良短季棉品种晋棉11纤维产量 和品质

棉花在我国国民经济中具有举足轻重的地位。短季棉品种有利于提高土地利用率, 对于人多地少的中国来说, 发展短季棉对棉花的可持续发展具有重要意义。因此, 提高短季棉品种的产量和品质成为当前棉花育种的重要课题。前期工作中我们通过时空精确调控iaaM基因, 适当增加生长素在棉花胚珠种皮中的水平, 获得了纤维产量和细度同步改良的转基因棉花材料IF1-1 (FBP7::iaaM)。本文通过回交育种, 将FBP7::iaaM基因导入低衣分、高马克隆值的短季棉品种晋棉11, 获得了衣分提高、马克隆值降低、同时保留早熟特点的回交后代JBC4。连续2年的田间试验表明, JBC4的衣分比回交亲本提高了12.8%, 小区纤维产量增加56.3%, 马克隆值降低10.7%。说明该转基因性状能在杂交和回交过程中稳定遗传, 可用于棉花产量和马克隆值的定向改良。     

抗菌肽和几丁质酶基因提高烟草对黑胫病菌和赤星病菌的抗性研究

 通过农杆菌介导法将加信号肽修饰的人工合成杂合抗菌肽CEMA基因(SPCEMA),苜蓿防御素基因(AFP),苦瓜几丁质酶基因(CHI)以及SPCEMA-CHI、AFP-CHI、AFP-SPCEMA双价基因导入本明烟(Nicotiana benthamiana),并对转基因烟草T₀和T₁代进行了抗病性检测,比较了不同转基因植株的抗病效果。研究结果表明,转基因烟草对黑胫病菌(Phytophthora parasitica var.nicotianae)、赤星病菌(Alternaria alternata)的抗性均强于非转基因烟草,病情指数差异达极显著水平,其中转AFP-CHI双价基因烟草具有较强的抗性,与单价转基因烟草的抗性差异达显著水平。但各单价转基因以及双价转基因烟草之间对上述病菌并未表现出显著的抗病性差异。结果表明植物源的抗菌肽基因与几丁质酶基因在抗植物真菌病害中具有协同增效作用。     

中药虻虫纤溶成分(TFC)及其性质

虻虫生药浸提液经７５％饱和度（ＮＨ４）２ＳＯ４沉淀、Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ－７５凝胶过滤层析得虻虫纤溶成分（ＴＦＣ）;ＴＦＣ的最适作用温度为５０℃,最适作用ｐＨ为７．５;０．５２ｍｍｏｌ／Ｌ ＰＭＳＦ能完全抑制ＴＦＣ的纤溶活性。金属离子Ｃａ＾＋,Ｍｇ＾＋＋,Ｚｎ＾＋＋,Ｃｕ＾＋＋,Ｍｎ＾＋＋,Ｈｇ＾＋＋对ＴＦＣ活性有部分抑制作用,ＴＦＣ既上有纤溶酶活性,又具有激活纤溶酶原的活性,既可以降解纤维蛋白又     

应用RAPD分析川西北高原青棵的遗传背景

 利用ＲＡＰＤ分子标记，探讨了四川西北部青稞４２个农家品种及２个育成品种的遗传背景。筛选出了１７个１０ 碱基随机引物．共扩增出７９条稳定的多态性谱带，据之建立１，０型数据，计算各品种间的ＮＬ相似系数，再转化为相应的遗传距离矩阵．采用离差平方和法进行聚类分析．获得聚类图；取距离值Ｔ＝０．６，可将４４个品种分为４个大类。分析了各大类内品种地理来源、主要品种特性等，发现大部分品种在各类内表现出一定规律性分布。通过不同多态性位点数的遗传距离的标准差和变异系数变化趋势的分析，表明所得到的位点数已能可靠地对研究群体的遗传关系进行估计。     

棉花总RNA的快速提取方法

介绍了一种适合于棉花各种组织的RNA提取方法。它具有简便、快速等特点，且所提取的RNA样品质量较高，可直接用于cDNA合成、RNA dut blot等分子生物学操作。