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试验旨在研究过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator-activated receptors γ,PPARγ)对猪血管内皮细胞增殖、迁移及小管形成的影响,并探讨PPARγ在猪体外血管生成中的作用。设置PPARγ激动剂组(5、10、15、20 μmol/L罗格列酮)、抑制剂组(5、10、15、20 μmol/L T0070907)及对照组,通过iCelligence细胞功能分析、划痕试验和Matrigel基质胶三维培养,构建猪体外血管生成的模型,模拟猪体内血管生成的环境,分别对猪血管内皮细胞的增殖、迁移、小管形成能力进行测定,同时根据NCBI已有的相关序列,应用Primer Premier 5.0软件设计PPARγ基因特异性引物,利用SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR检测PPARγ基因mRNA相对表达量,对PPARγ的体外作用效果进行验证。结果显示,5、10 μmol/L罗格列酮能促进猪血管内皮细胞增殖、迁移及小管形成,T0070907的抑制效果在试验浓度区间内(5~15 μmol/L)随浓度升高而加强,较高浓度(20 μmol/L)的两种药物均由于药物毒性的影响对细胞活动产生干扰。此外,5~20 μmol/L罗格列酮和5~20 μmol/L T0070907能分别提高和降低PPARγ基因mRNA相对表达量,且浓度趋势与增殖、迁移、小管形成的试验结果一致。综上所述,通过激活PPARγ可以对猪血管内皮细胞的增殖、迁移及小管形成产生促进效果,提示其在猪体外血管生成中具有积极作用,可为研究PPARγ对猪胎盘血管发生的影响提供参考依据。 相似文献
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鸭免疫H5N1亚型禽流感油乳剂灭活苗的免疫动态研究 总被引:2,自引:0,他引:2
本研究用不同剂量禽流感H5N1油乳剂灭活疫苗对各种周龄肉鸭、种鸭进行免疫接种,检测其相应的HI抗体水平,用酸性α-醋酸萘酯酶(ANAE)反应标记淋巴细胞的细胞化学方法测定其外周血中T、B淋巴细胞比值.探索肉、种鸭体液免疫和细胞免疫动态规律,为免疫防制禽流感制定最佳免疫程序提供科学依据.研究结果表明免疫接种小鸭,1周龄免疫接种效果不良,2、3周龄二次免疫效果优于2周龄一次免疫.种鸭对禽流感免疫应答反应良好;雏鸭H5N1母源抗体在出雏后3日龄达到峰值,5日龄开始下降,直至19日龄消失. 相似文献
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用放射免疫分析法,对9头持久黄体病牛中的7头子宫内灌注15甲PGF_2α2~8 mg/头(另2头不用药作对照)和8头卵巢静止病牛中的5头肌注LRH-I 400~600μg/头(另3头不用药作对照)的监测结果表明,持久黄体病牛血浆孕酮浓变为5.54±3.18 ng/ml,灌注15甲PGF_2α后1~3 d,血浆孕酮迅速下降,当降至<0.5 ng/ml时,母牛出现发情;卵巢静止病牛血浆17β-雌二醇浓度为55.91±18.29 pg/ml,肌注LRH-I后,17β-雌二醇浓度缓慢下降,1~3 d后回升,7~15 d达到峰值,母牛出现发情。 相似文献
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玉米赤霉烯酮对猪卵巢颗粒细胞毒性的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
以体外培养的猪卵巢颗粒细胞为模板,研究了玉米赤霉烯酮(ZEA)对该细胞的毒性作用.结果表明,在所测浓度范围内,ZEA对卵巢颗粒细胞活性具有明显的抑制作用,且抑制作用随着浓度的增强而加大,并呈现剂量效应关系;60、90和120 μmol/L的ZEA使细胞中的MDA含量均升高,呈现剂量效应关系;ZEA作用后,细胞中GSH-Px酶活力下降;TUNE检测发现凋亡细胞呈棕褐色,凋亡细胞间间隙明显加大,随着ZEA剂量的加大,棕褐色细胞逐渐增多,尤其是高剂量ZEA组,细胞核大部分被染成棕褐色,细胞皱缩,胞间几乎无连接;当Annexin标记FIFC、流式细胞仪检测发现,高剂量组(120 μmol/L) ZEA处理后其凋亡率可达60.83%,坏死率很低,显示ZEA抑制猪卵巢颗粒细胞增殖主要是通过细胞凋亡,并非坏死途径. 相似文献
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Touchdown PCR扩增多样性小鼠Fab抗体基因 总被引:1,自引:1,他引:0
为了扩增多样性Fab抗体基因产物,保证噬菌体抗体库的足够库容。分离C57BL/6鼠的脾脏,并制备脾细胞悬液,提取其总RNA,逆转录为cDNA,利用普通PCR和Touch down(TD)PCR扩增鼠Fab基因产物,通过琼脂糖凝胶电泳验证PCR产物,比较分析2种方法的扩增效果。结果显示:轻链和重链Fd基因的PCR产物大小约为680bp,与理论值相符。电泳结果显示,TD-PCR获得8个重链Fd基因和6个轻链基因条带,普通PCR获得7个重链Fd基因和5个轻链基因条带。在普通PCR产物中,轻链基因引物VkB未能扩增出相应基因,而TD-PCR扩增出该基因。TD-PCR扩增出引物ⅢA和ⅢC的对应基因,而普通PCR却未见对应结果,普通PCR扩增出ⅢB引物的对应基因,TD-PCR未见对应结果。比较分析认为,TD-PCR可以增加抗体基因多样性,有潜力成为保证噬菌体Fab抗体库库容的途径,为Fab抗体基因的扩增及相关研究提供实验参考。 相似文献
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子宫内膜炎是奶牛群发生最广泛、危害最严重的疾病之一,是奶牛最常见的不孕症,临床上表现为屡配不孕、产孕间隔延长和情期受胎率降低。由于产犊数量和产奶量减少而降低了奶牛业的经济效益。配后净宫技术(Cleaninguterusafterinsemination,CUAI)是指对患子宫内膜炎的奶牛在发情后适时输精,输精后12h从子宫灌注治疗子宫内膜炎的药物的一种方法,它可使输精和治疗同期法,能提高子宫内膜炎奶牛的受胎率。把该技术应用于奶牛繁殖,有利于奶牛业的经济效益。1子宫内膜炎对奶牛及奶牛业的影响子宫内… 相似文献