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71.
以猪胸膜肺炎放线杆菌血清7型25-4株基因组DNA为模板,PCR方法扩增外膜蛋白(OMP)5′末端保守区基因片段(OMPc),酶切及核苷酸序列分析鉴定后,与原核表达载体质粒pGEX-6P-1进行连接,构建成重组表达载体pGEX-OM-Pc,转入大肠杆菌BL21中,以IPTG进行诱导,SDS-PAGE电泳分析发现,转化了重组质粒的菌株所表达的融合蛋白相对分子量为34 kD,与实际预测相符,命名为GST-OMPc.GST亲和层析柱进行纯化,ELISA方法对纯化蛋白进行检测.结果表明:纯化蛋白GST-OMPc能够与兔抗猪胸膜肺炎放线杆菌血清7型的阳性血清反应.OMPc蛋白的成功表达为其功能的研究打下基础. 相似文献
72.
结核分枝杆菌分泌蛋白ESAT-6、CFP10基因的克隆、鉴定及其原核表达 总被引:3,自引:0,他引:3
以人型结核分枝杆菌 H37RV株基因组 DNA为模板 ,应用 PCR法对 ESAT- 6和 CFP10基因进行扩增 ,产物经纯化后与载体 PMD18- T连接、转化及酶切鉴定 ,亚克隆到原核表达载体 PGEX- 6 P- 1,构建原核重组表达质粒 ,转化入大肠杆菌 BL2 1中 ,以 1mmol/L IPTG诱导 ,进行 SDS- PAGE电泳。结果表明 ,ESAT- 6和 CFP10基因表达的融合蛋白相对分子质量分别为 32 0 0 0和 36 0 0 0 ,与实测相符。重组结核杆菌分泌蛋白 ESAT- 6和 CFP10的成功表达为结核病诊断及重组疫苗的构建打下了基础 相似文献
73.
74.
我国首例小反刍兽疫诊断报告 总被引:30,自引:10,他引:30
2007年7月我国西藏发生不明山羊疫情,国家外来动物病诊断中心对当地动物疫病控制中心送检的14只病死山羊病料和一批血清样品分别进行病原学和血清学检测。利用较敏感的小反刍兽疫病毒(PPRV)特异性荧光定量RT-PCR方法,在11只病羊组织中检测到小反刍兽疫病毒核酸。利用次敏感的PPRV普通RT-PCR方法,从8只病羊组织中检测到PPRV核酸。针对1号样本病原核酸N基因和F基因片段进行遗传发生分析,该病原属于4系。利用竞争ELISA试剂盒对送检的13份血清样本进行抗体检测,结果全部阳性。将1号组织样本接种Vero细胞分离病毒,透射电镜观察下,发现了500纳米左右的病毒粒子。对分离毒株进行PCR检测同样证实其为PPRV。 相似文献
75.
76.
77.
饲料质量和营养平衡是广大养兔户面对的一个实际问题,因为饲料质量差(特别是霉变现象严重)和营养不平衡引起的消化道疾病甚多,给养兔者造成极大的损失。饲料原料中出问题最多的是粗饲料(草粉)。只有粗饲料质量得到保证时,家兔采食后才能少发病不发病。 相似文献
78.
79.
二型圆环病毒ORF2基因的序列分析 总被引:1,自引:0,他引:1
通过PCR扩增,对两株分离到的2型猪圆环病毒的ORF2基因进行了扩增,将获得的PCR产物分别与T载体连接,获得了两个毒株的ORF2基因阳性克隆。序列分析表明,与其它中国分离株同源性高达99%,同处于一个基因簇,但和中国BF分离株同源性却只有92.3%。而荷兰分离的NL-PMWS-2株与中国分离株的同源性却在99%以上,表明中国流行的PCV-2和国外分离株有密切关系。 相似文献
80.
2005年10月,山东省青州市弥河镇某养殖场饲养番鸭8000只,饲养至35日龄时,出现了以呼吸困难、并发出“吭哧”“、吭哧”的声音、眼睛流泪、排黄白色稀便、头部震颤、瘫痪为主要症状的传染病。日死亡率达0.3%。我公司技术服务人员遂从该养殖场带来3只病鸭,经我公司技术人员分离细菌和作药敏实验,很快控制了病情。现将情况总结如下:1临床症状主要表现精神沉郁、呼吸困难、眼睛流泪且有分泌物、排黄白色稀便、头部震颤、腿瘫痪等临床症状。2剖检变化主要的病理变化为:心包炎、肝周炎、拨去肝脏上面的纤维蛋白膜可见肝脏肿大,肝脏边缘钝圆,肝脏呈… 相似文献