基于牡蛎疱疹病毒DNA聚合酶基因的巢式PCR检测方法的建立及应用

为了建立适用于Os HV-1不同变异株的检测方法,在牡蛎疱疹病毒(Os HV-1)3个变异株全基因组序列比对的基础上,筛选到牡蛎疱疹病毒基因组中高度保守的DNA聚合酶(DNA polymerase)基因,据此设计巢式PCR引物,优化PCR反应体系和条件,建立了基于Os HV-1 DNA聚合酶基因的巢氏PCR检测方法(P-n PCR检测方法),利用P-n PCR与Cn PCR检测方法对不同年份和宿主来源的Os HV-1疑似感染样本进行检测。结果显示,Pn PCR检测方法能稳定地检出100拷贝/μL的病毒DNA;P-n PCR较C-n PCR检测方法具有更强的特异性和更高的检出率。研究表明,本研究建立的P-n PCR检测方法适用于Os HV-1不同变异株的检测,可为该病毒的检测和流行病学调查提供可靠的技术支持。     

九种药物对斜带石斑鱼受精卵孵化率的影响

以斜带石斑鱼受精卵为试验对象,采用药物浸泡方法,研究了盐酸吗啉胍、利巴韦林、阿昔洛韦、二溴海因、溴氯海因、三氯异氰尿酸、10%的聚维酮碘、37%的甲醛、次氯酸钠等9种药物对斜带石斑鱼受精卵孵化率的影响。试验数据通过SPSS Inc软件进行了单因素方差分析及线性回归分析,研究结果表明,抗病毒药物盐酸吗啉胍、利巴韦林、阿昔洛韦对斜带石斑鱼受精卵孵化影响无差别,三者药物浓度与孵化率无线性相关;6种常用化学消毒剂毒性依次为二溴海因次氯酸钠三氯异氰尿酸溴氯海因甲醛聚维酮碘,石斑鱼受精卵孵化率随着6种常用化学消毒剂质量浓度增加而下降,且药物质量浓度与孵化率呈线性负相关。根据试验结果,建议斜带石斑鱼育苗生产上药物消毒受精卵:盐酸吗啉胍、利巴韦林、阿昔洛韦生产上用药质量浓度为1～3mg/L,10%的聚维酮碘生产上用药质量浓度为20～100mg/L,37%的甲醛生产上用药质量浓度为20mg/L,二溴海因、溴氯海因、三氯异氰尿酸、次氯酸钠生产上慎用。     

稀有鱼句鲫β肌动蛋白启动子的克隆及其驱动活性的初步检测

稀有鮈鲫是一种新型的模式实验鱼,具有利用转基因技术培育开发成为观赏性鱼类的潜在可能。本实验采用PCR方法,从稀有鮈鲫基因组DNA中分离得到大小为1584bp的β肌动蛋白(β-actin)基因片段。序列分析表明,该片段包括长为1507bp的启动调控区和77bp的部分转录区序列。启动调控区包括一段长为109bpβ-actin基因上游调控序列,不翻译的外显子1和内含子1。上游调控序列中含有TATAbox,CAATbox和CArGbox等与转录活性密切相关的作用元件,并且在稀有鮈鲫β-actin基因第一个内含子中也含有1个CArG调控元件。将该启动子片段克隆到绿色荧光表达载体(pAcGFP1-1)上,显微注射入稀有鮈鲫的受精卵中,通过荧光显微镜能观察到绿色荧光蛋白的表达。本实验成功分离了具有驱动活性的稀有鮈鲫β-actin基因启动子。     

牡蛎疱疹病毒魁蚶株交叉引物等温扩增检测方法的建立及初步应用

为建立牡蛎疱疹病毒魁蚶株快速、灵敏、准确和操作简便的检测方法,实验根据已测序完成的OsHV-1-SB全基因组序列,选择其保守区域,建立了交叉引物等温扩增检测方法,并对反应温度、dNTPs、Mg2+浓度和反应时间进行了优化.结果显示,最佳温度为63℃,反应时间为60 min,dNTPs浓度为1.4 mmol/L,Mg2+浓度为6 mmol/L.该方法检测灵敏度为30拷贝的质粒DNA,并且特异性较强,与贝类常见病原急性病毒性坏死病毒、鲍鱼疱疹病毒、派琴虫、包纳米虫、马尔泰虫以及对虾白斑综合征病毒和副溶血弧菌均无交叉反应.使用实验建立的CPA检测方法对2012年分别采自韩国庆尚南道、山东长岛、辽宁大连共计22份OsHV-1-SB感染情况未知的魁蚶样品进行了检测.研究表明,实验所建立的OsHV-1-SB的CPA检测方法简单、快速、灵敏且特异性强.由于其检测结果可通过简单离心或者向反应管中加入核酸荧光染料GeneFinderTM进行肉眼观察,所以可以在沿海贝类养殖厂及条件简陋的实验室使用,具有较好的应用前景.     

刚果12号桉优良无性系早期测定初报

根据无性系早期测定结果,表明热研B号无性系为优良无性系。其平均树高、平均胸径和平均单株材积生长量均显著或极显著地大于实生树(对照);蓄积量极显著地大于其它参试无性系和对照;同时适应性较强,保存率高,风害较轻。建议在海南岛西部地区扩大试种或推广种植热研B号无性系。而在风害较重地区试种或推广种值大坡87号无性系,以及淘汰或限制推广白石岭06号无性系。     

超级黑糯玉米杂交种黑玫瑰1号的选育及应用

濉溪县农科所特种玉米育种课题组,1999年开始以美国普通黑玉米为供体,以自育普通黑糯玉米自交系为授体,在国内率先把美国普通黑玉米特殊黑色遗传性状,导入到自育的具有优良农艺性状和优良品质的普通黑糯玉米自交系中,通过回交选择培育出超级黑糯玉米自交系48份,并以特殊黑色、优质、高产、抗病为育种目标,于2002年夏季从600多个新组配的杂交组合中,在国内首次培育出超级黑糯玉米新品种黑玫瑰1号。1超级黑糯玉米与普通黑糯玉米的主要区别1.1普通黑糯玉米籽粒一般在授粉后20d左右开始由白色(黄白色)→浅紫色→深紫色,籽粒成熟后变为紫黑色,而…     

离底拖网的游泳动物群落特征——以兄弟岛渔场为例

为探究离底拖网对游泳动物的群落结构以及捕捞量的影响,于2019年9月和2020年9月在福建海域兄弟岛渔场开展了36网次的底拖网专项试验,通过调整曳纲长度控制底拖网作业过程中的网位变动,分别保持底拖网作业在贴底或离底1 m的状态,以物种组成、渔获量对数均值、优势度、多度谱、多样性等参数,分析和比较了贴底拖和离底拖的游泳动物群落结构变化。结果显示:贴底拖和离底拖游泳动物的种类数分别为126种和79种,贴底拖游泳动物的总尾数和总体质量均为离底拖的3倍,贴底拖的渔获量对数均值比离底拖要高0.36,表明贴底拖网的渔获物以栖息于底层的游泳动物为主;贴底拖的游泳动物多样性、均匀度和丰富度分别为2.81、0.65和10.01,均高于离底拖(2.29、0.60和8.13),经济幼鱼的比例更高,说明贴底拖会对游泳动物的多样性以及幼鱼造成更大的损害;离底拖游泳动物的优势度指数为0.41,高于贴底拖的0.29,其多度谱曲线更陡,说明近底层游泳动物群落优势种分布更集中、数量分布不均匀。研究结果可以为底拖网渔业的科学管理提供依据。     

中国对虾卵黄蛋白原合成部位的研究

十足目甲壳类卵巢中卵黄的来源,在过去的几十年研究中一直存在争议,内源性合成和外源性合成都有报道。本文以雌性中国对虾为实验材料,根据组织学观察确定其发育阶段,试验虾可以分为:卵巢未发育期;卵黄发生前期;初级卵黄发生期和次级卵黄发生期4个时期。从处于不同卵巢发育期对虾的卵巢和肝胰腺中提取总RNA,用RT-PCR的方法初步探讨不同发育期的中国对虾卵巢和肝胰腺中卵黄蛋白原mRNA的表达,确定是否存在卵黄蛋白原的合成功能。结果发现,从卵巢未发育期到次级卵黄发生期的卵巢和肝胰腺中都有卵黄蛋白原mRNA的表达,说明二者为卵黄蛋白的合成部位。     

湖羊妊娠毒血症的流行病学及防控措施

正湖羊广泛饲养于杭、嘉、地区,桐乡市的湖羊养殖多以家庭小规模圈养模式为主,在饲养方式上极为传统、粗放,平地饲养,羊床潮湿、霉烂、恶臭;饲料基本以草料为主,不供精料,怀孕母羊也少有日粮补     

微生物发酵中药的研究现状及其在养殖业中的应用

发酵法是中药炮制的传统方法,具有提高有效成分含量、增强或产生新的疗效、降低毒性、调整肠道菌群等作用。现代中药发酵技术克服了传统中药发酵技术的菌种驳杂、温度和湿度不可控等缺点,发展出了固体发酵、液体发酵和双向固体发酵的现代工艺技术。近年来国家推行饲料禁抗,微生物发酵中药作为一种微生态制剂,在提高动物生产性能、提高动物机体免疫力、预防和治疗疾病等方面,以其独特的优势成为养殖业中抗生素替代品之一,在畜禽养殖业和水产养殖业有着巨大的潜力和市场。但目前发酵中药仍存在发酵机理不明确、物质基础的改变相对未知、发酵菌种较为单一、缺少一定的质量标准等问题。作者重点介绍了发酵中药的优势并比较了各种发酵技术的优点和缺点,对发酵中药在畜禽养殖和水产养殖中的应用进行了归纳总结,分析了发酵中药的发展潜力以及目前存在的问题、改进方案及发展方向,以期对未来微生物发酵中药的深入研究及其在畜禽、水产养殖业中的应用提供思路与借鉴。