重组K88黏附素亚单位蛋白在大肠杆菌中的诱导表达

采用响应面分析方法,对肠毒素大肠杆菌(EnterotoxigenicEscherichiacoli)K88黏附素亚单位重组蛋白FaeG诱导表达的主要影响因素进行了优化研究。响应面分析结果表明:不同的诱导时机、IPTG浓度及诱导时间对目的蛋白表达量均有显著影响(P<0.01),三因素之间的交互作用对目的蛋白表达量也有极显著的影响(P<0.01)。通过进一步的模拟优化,得到了最佳诱导表达条件为培养BL21(K88ac)重组菌株2.5h后,加入IPTG至终浓度0.8mmol/L,37℃诱导培养5h。采用以上参数进行验证实验,得到目的蛋白在全菌蛋白中的表达含量为35.4%;与单次单因子法得到的最佳表达条件下的表达量(27.5%)相比,提高了28.7%。采用响应面分析法可以确定IPTG的诱导时机、诱导浓度及诱导时间等多个因素对重组蛋白在大肠杆菌中表达的最佳作用条件,有利于提高目的蛋白的表达量。     

昆明地区几种混播草坪质量评价及组合优化

为优化、筛选适合昆明地区观赏及运动场草坪混播组合,对当地表现良好的草坪草进行混播建坪,在幼坪和成坪阶段分别观测相关指标,用模糊数学综合评判法评定草坪质量,按照5级分级法评定标准,评判结果为:Z5组合(草地早熟禾肯塔基60%+紫羊茅宝瑞40%),草坪质量较好,达到I级标准;Z4组合(草地早熟禾肯塔基70%+匍匐翦股颖普特30%)、Z1组合(草地早熟禾肯塔基40%+高羊茅红象30%+多年生黑麦草匹克威30%)、Z2组合(高羊茅红象80%+草地早熟禾肯塔基20%)和Z6组合(草地早熟禾优异25%+草地早熟禾蓝月25%+草地早熟禾新哥来德25%+草地早熟禾肯塔基25%),草坪质量尚可,达到Ⅲ级标准;Z3组合(草地早熟禾肯塔基50%+普通狗牙根30%+多年生黑麦草匹克威20%),草坪质量差,仅达到Ⅳ级标准。其中,Z1组合是运动场草坪的最优组合,Z5组合是观赏草坪的最优组合,其草坪质量综合评价值分别达到0.677和0.881,高于实际应用值0.600。     

卵泡刺激素受体基因作为产仔数候选基因的研究

分析了FSHR基因2个位点（FSHRA、FSHRB）的PCR－SSCP、PCR－RFLPs多态性，利用SAS软件分析了多态性与母猪产仔数间连锁关系。找到了1个影响产仔数的新的变异位点FSHRB，该位点多态性显著地影响猪产仔数性状，即基因型BB的产仔数显著地高于AB、AA基因型。结果显示出该位点具有作为常规选育的辅助选择的有效的分子标记潜力。     

浅析草鱼养殖技术及病害防治技术

草鱼因营养丰富、肉质鲜美、生长速度快而受到大众青睐,如今,更多的人选择养殖草鱼。草鱼养殖不仅要全面保障草鱼鱼苗的品质,还要采用合理、有效的养殖技术与病害防治技术,有助于降低病害出现的概率,减少养殖户的经济损失,确保草鱼养殖行业的健康、稳定发展。基于此,充分结合草鱼常见病的特点和诱因,提出有效的草鱼养殖与病害防治技术,旨在有效减少病虫害所导致的经济损失,提高草鱼的养殖水平。     

家蚕法尼酸甲基转移酶(FAMeT)基因的鉴定及表达模式分析

保幼激素(JH)是昆虫生长、发育、变态和生殖等一系列生理生化过程中必不可少的一类激素。法尼酸甲基转移酶(farnesoic acid O-methyltransferase,FAMeT)被认为是昆虫及其它节肢动物催化合成保幼激素前体甲基法尼酸(methyl farne-soate,MF)的关键酶。通过生物信息学分析,从家蚕全基因组数据中共鉴定了7个编码家蚕FAMeT的基因(BmFAMeT1～BmFAMeT7)。系统进化分析暗示BmFAMeT2可能是家蚕FAMeT家族成员的最原始拷贝。对其中位于6号染色体上的BmFAMeT5、BmFAMeT6和BmFAMeT7的时空表达谱分析显示,3个基因从家蚕胚胎发育后期至成虫期持续性表达;在5龄第3天幼虫中肠组织特异性高水平表达。利用RACE技术克隆获得了这3个基因的全长cDNA序列,并发现BmFAMeT5及BmFAMeT6分别存在2种不同的选择性拼接形式。上述结果为进一步研究家蚕FAMeT的生物学功能提供了线索。     

肠道营养物质代谢的仔猪动-静脉插管技术的建立

选用28日龄断奶仔猪10头,分别在其颈动脉、肝门静脉和肠系膜静脉安装插管,待仔猪恢复1周后,通过肠系膜静脉连续灌注1%对氨基马尿酸测定仔猪采食后0～6 h内门静脉的血流速度.结果显示,体质量为9.97 kg的仔猪在采食前的血流速度为1.78 L·kg-1·h-1或295 mL/min,采食后1 h内血流速度快速上升,比采食前的血流速度提高了23.6%,1～5 h内血流速度的变化趋于平缓,6 h血流速度达到最高(2.52 L·kg-1·h-1或419mL/min);10头试猪中的6头可成功用于肠道营养物质代谢研究.本试验建立的仔猪颈动脉-门静脉-肠系膜静脉插管系统为肠道营养物质代谢的研究提供了技术支持.     

纳罗克非洲狗尾草光合生理日变化研究

在昆明市利用Ci-310便携式光合测定仪测定了纳罗克非洲狗尾草（Setaria sphacelata stapf cv.Narok）种子田夏季光合生理参数的日变化.对大气温度、CO2浓度、相对湿度、植物气孔导度、胞间CO2浓度、蒸腾速率、瞬时水分利用率、光合有效辐射、净光合速率等参数进行分析,结果表明：纳罗克非洲狗尾草光合生理特性受环境影响呈规律性变化,光合速率、光合有效辐射、气孔导度和蒸腾速率的日变化呈双峰曲线,存在“午睡”现象.非气孔限制为引起光合“午睡”的主要原因,其中净光合速率降低为叶肉光合活性下降所致.     

新清平猪母系选育研究进展

在清平猪中导入50%杜洛克猪血统,经过4个世代的选育,新清平猪母系生长速度、饲料利用率和瘦肉率比清平猪均有大幅度提高,达到了育种目标。新清平猪母系保持了清平猪妊娠期短的特点,平均妊娠期110.69d,头胎产仔数10头以上,乳头数7对以上;育肥期日增重662g,料重比3.09,瘦肉率55.77%。以新清平猪母系为母本,大白猪和长白猪为父本生产的杂种猪日增重678～759g、瘦肉率(57%～59%)和肌内脂肪(3.19%～3.21%)含量高,肉质优良。     

猪HSD11B1和MyoG基因多态性与妊娠期长短的关系

选择HSD11B1和MyoG2个基因作为影响妊娠期长短的候选基因。在7个中外猪群体中采用PCR-RFLP技术研究了HSD11B1和MyoG2个基因多态性与妊娠期长短的关系。HSD11B1基因的PCR-Bsh1236Ⅰ-RFLP分析结果表明：清平猪、新清平猪母系、大白猪、长白猪、杜洛克猪、中国瘦肉猪新品系DIV1和DIV2系猪群中A等位基因的频率分别为0.538、0.752、0.522、0.941、1.000、0.889和0.594;除DIV2外,HSD11B1不同基因型与妊娠期长短无显著关系（P〉0.05）。MyoG基因的PCR-MspⅠ-RFLP分析结果表明：清平猪、新清平猪母系、大白猪、长白猪、杜洛克猪、中国瘦肉猪新品系DIV1和DIV2系猪群中M等位基因的频率分别为1.000、0.534、0.370、0.115、0.094、0.382和0.243;清平猪中只存在MM基因型,其他群体中3种基因型皆有分布;新清平猪母系MM比NN基因型母猪妊娠期要短,且在经产长白猪中差异极显著（P〈0.01）。     

复合处理对纳罗克非洲狗尾草种子休眠的破除效果

纳罗克非洲狗尾草(Setaria sphacelata cv.Narok)是南方广大地区草地建设和环境治理最优秀的禾草之一。但其种子产量低,休眠程度深。以云南省生产的纳罗克非洲狗尾草商品种子为研究对象,通过机械方法去除稃片后,采用化学处理、温水浸种、液氮冷冻提高种子活力,结果表明:机械处理去除稃片后,再用0.4%KNO3溶液浸种12min是最好的处理方法。处理后,种子发芽势为34%,发芽率达到42%,发芽指数为9.88,而活力指数则达到了0.0130,种子活力几乎是对照的4倍(P0.05)。