土壤磷素高效利用转基因大豆特异性PCR检测方法

华南农业大学根系生物学研究中心采用拟南芥的紫色酸性磷酸酶基因AtPAP15转化大豆品系粤春03－3（YC03-3）,获得了酸性磷酸酶活性明显提高、可高效利用土壤磷素的转基因大豆新品系AP15-1。以AP15-1为研究对象,应用TAIL－PCR技术,根据载体序列设计特异引物,获得了转化载体左侧插入的旁邻序列。设计事件特异性检测引物,进行PCR扩增,只能在AP15-1的样品中扩增出特异性条带,进一步用实时荧光定量PCR作分析,结果显示,该引物对重复性好,融解曲线显示只有一个特异峰值。本实验应用该引物对建立的检测方法,检测的灵敏度可以达到0.01%,实时荧光定量PCR检测的极限值可以达到9个基因组的拷贝数,能够满足对转基因大豆新品系AP15-1及其衍生品种检测的需要。     

培养条件对烟草细胞生长和CoQ10含量的影响

双红花大金元品种的烟草为材料,采用细胞悬浮培养方法,对影响烟草生长和ＣｏＱ１０含量的细胞培养条件、ＰＨ、温度、接种量、扔床转速及装液量等进行了研究。结果表明,烟草细胞在培养基原始ＰＨ４．０～８．０下均能生长,但在ＰＨ６．０时细胞生长最地,ＣｏＱ１０含量最高;接种量仅能影响细胞培养周期,而不影响ＣｏＱ１０的形成,但超过２８℃则不利于烟草细胞的生长,ＣｏＱ１０总量并不增加;摇床转速和装液量对细胞生长和     

九华毛峰矿质元素的含量特点

座落在安徽省南部青阳县境内的九华山是国家级重点风景名胜旅游区之一。茶园多建在海拔800m以下500m左右的沟谷地带。优越的自然条件和精工巧作的制茶技术,使九华毛峰独具风格。为了解九华毛峰中与人体健康关系密切的矿质元素的含量及其特点,我们对茶样中16种矿质元素进行了测定。1材料与方法1.1茶样采集与蒸青固样4月15日、20日分别采集鹰山、龙岗及道僧洞茶园3个点的一芽二叶茶树新梢。待蒸锅有足够蒸汽时,将鲜叶均匀薄摊在蒸隔上的白纱布上,计时1min,迅速取出蒸青叶,摊凉,在烘笼上烘干,并严防灰尘污染。为比较九华毛峰的特点,还…     

3个水稻RNAi载体的构建与应用

利用RNAi(RNA interference)干扰技术,构建了启动子和干涉区域不同的3种水稻干涉载体,通过农杆菌介导转化水稻粳稻品种中花11。表型和分子分析表明,3种载体都能有效降解靶基因OsUGP2,暗示pRNAi-ubi-UGP2载体能同时沉默OsUGP2家族基因,pRNAi-ubi-UGP2PRO载体能特异沉默OsUGP2,pRNAi-IP-UGP2载体对OsUGP2基因的沉默不具特异性,但其沉默具有人为可调控性。     

高粘油水两相水平管流的压降研究

通过三种高粘度油品的油水水平管流试验,对各种流型的压降规律进行了研究,以试验数据和理论分析为基础,建立了有效粘度的经验相关式,并通过含有有效粘度与混合流速的压降公式估算各流型的管路压降.采用的方法适用于稠油和水的两相流研究.提出应建立有效粘度的理论预测模型,使高粘油与水的两相流的研究更具有实用性.     

烟叶超氧物歧化酶的研究

从烟叶中提取的超氧物歧化酶（ＳＯＤ），经ＰＡＧＥ垂直板电泳后，用氮蓝四唑（ＮＢＴ）法活性染色，并经凝胶薄层扫描（λ＝５９５ｎｍ），结果显示粗酶液有６条同工酶谱带，经纯化后的酶只有一条谱带。此纯酶液置冰箱３６ｈ后，可获得长方形结晶。结晶酶液用ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１００柱层析（１．５ｃｍ×１００ｃｍ）和ＳＤＳ－和ＳＤＳ－ＰＡＧＥ测得其分子量分别为２４８３０和２８９００。用等电聚焦电泳测得该酶等电点为６．８０。该酶在ｐＨ５～９范围内活性较稳定，在７５℃保温１５ｍｉｎ活性尚保留５４％。此酶对ＫＣＮ、氯仿－乙醇不敏感，但受到ＥＤＴＡ，Ｈ_２Ｏ_２的强烈抑制，表明烟叶中分离纯化得到的ＳＯＤ为酶分子中结合Ｆｅ的Ｆｅ－ＳＯＤ。     

用启动子融合GUS的方法分析OsUgP1基因的表达模式

克隆水稻尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶基因(OsUgp1)的启动子,并与大肠杆菌β-葡萄糖苷酸酶(β-glucuronidase,GUS)报告基因连接后转化水稻,采用GUS组织化学染色检测启动子驱动GUS基因在水稻转化植株中的表达情况,发现在水稻的根、茎、叶、内外稃、子房、柱头等组织,以及减数分裂时期的花药及不同发育时期的...