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为了研制一种快速、准确诊断大肠杆菌O157:H7的PCR方法,试验根据GenBank收录的大肠杆菌O157:H7全基因组序列,设计并合成了2对可扩增rfbE(O157)和Flic(H7)基因片段的特异性引物,建立双重PCR快速检测大肠杆菌O157:H7的方法,并研制出检测试剂盒。结果表明:该检测试剂盒对大肠杆菌O157:H7能特异性地扩增出rfbE和Flic基因的目的片段;对大肠杆菌O157:H30、O157:H9、O157:H25、O157:H19只能扩增出rfbE而不能扩增出Flic基因的目的片段;对大肠杆菌DH5α、猪链球菌2型和副猪嗜血杆菌没有扩增出任何目的片段;细菌DNA的最低检测极限是50 pg;在-20℃条件下保存1,3,6,9,12个月后,其敏感性都没有发生改变,均能检测到50 pg的大肠杆菌O157:H7DNA模板。 相似文献
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近年来,我国农药施用不合理、水稻病虫害抗药性提升等问题日渐突出,严重影响水稻的产量与品质,绿色防控技术在水稻病虫害防治中的应用,有效实现了农业生产与生态环境的和谐共生,为水稻正常生长提供保障。基于此,对新时期水稻病虫害绿色防控技术的应用进行分析,探索应用思路、目标以及基本要点,推动构建水稻病虫害绿色防控技术应用框架,并在此基础上,探索实践案例,加深对水稻病虫害绿色防控技术具体化应用的理解,以供参考。 相似文献
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为了解广西食蟹猴饲养场鞭虫病的感染情况,并比较饱和蔗糖漂浮离心法和水洗沉淀集卵法对虫卵检出率的影响,笔者采集广西3个饲养场食蟹猴新鲜粪便样品共计457份,采用饱和蔗糖漂浮离心法和水洗沉淀集卵法,取样涂于载玻片上,制片后于显微镜下测量观察。结果:饱和蔗糖漂浮离心法检出鞭虫阳性数分别为10/62、2/80、9/315,阳性率分别为16.13%、2.50%、2.86%,平均为4.60%;水洗沉淀集卵法检出鞭虫阳性数分别为6/62、1/80、4/315,阳性率分别为9.68%、1.25%、1.27%,平均为2.41%。饱和蔗糖漂浮离心法显著提高了鞭虫检出率,并且有镜检视野杂质少,虫卵密集,节约时间等优点,适用于食蟹猴鞭虫病诊断、流行病学调查等检测项目。 相似文献
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[目的]筛选高效分泌纤维素酶的细菌,为纤维素资源利用提供理论依据.[方法]以羧甲基纤维素钠(CMC-Na)为唯一碳源,对通过筛选培养基从森林湿泥样品中分离筛选出的细菌,采用刚果红染色、革兰氏染色和生化特性及16S rDNA进行鉴定,并对菌株产酶性质进行初步研究.[结果]获得一株纤维素酶产生菌L-30,该菌株在pH4.8、50℃条件下的酶活力为4.25 U/mL,经鉴定L-30为蜡样芽孢杆菌.酶学性质研究表明,L-30菌株所产纤维素酶最适反应pH为6.0,最适温度为50℃,该条件下酶活力最高,达4.95 U/mL,该酶对CMC-Na具有较强的分解能力;L-30菌株在最佳生长条件下,于接种后48 h即可达到产酶高峰,L-30菌株的产纤维素酶能力能稳定遗传.[结论]分离到的L-30为一株高产纤维素酶蜡样芽孢杆菌,其酶学性质好,具有进一步开发利用的价值. 相似文献
99.
猪瘟病毒实时荧光定量RT-PCR 总被引:2,自引:1,他引:2
根据GenBank公布的猪瘟病毒基因组5'非编码区基因序列进行同源性比较分析,选择保守序列区作为扩增区域,设计1对特异性扩增引物,通过优化反应条件,建立了一个用于猪瘟病毒快速定量检测的SY13R GreenⅠ荧光定量RT-PC R方法.试验结果表明该方法重复性好,反应批内循环阈值差异不显著.与猪繁殖与呼吸综合征病毒、伪狂犬病病毒和猪圆环病毒2型等猪源病毒无交叉反应,具有高度的特异性,而且灵敏度高,最小检出量为2×10(2)病毒基因组拷贝数.利用此方法对15例临床样本进行检测,其结果与兔体交又免疫试验一致,表明此方法可作为猪瘟实验室快速诊断和疫情监测的一种快速、准确、简便的检测工具. 相似文献
100.
文章阐述了新旧<民用建筑电气设计规范>相关条款对具体设计工作的影响,并总结了在电气施工图设计中须加以注意的有关事项和重点、难点所在. 相似文献