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191.
从分子水平上探讨了鳜解偶联蛋白1、2 (UCP1, 2)基因结构、组织表达水平及与产热、脂肪代谢等生理机能的关系。通过与脊椎动物UCP1、UCP2基因序列进行比对,设计简并引物与特异引物进行PCR和RACE扩增、测序、拼接序列,获得UCP1、UCP2的基因组序列和内含子/外显子结构。基因组步行法克隆鳜肝脏UCP1、UCP2 基因5′侧翼序列。应用半定量RT-PCR的方法,以β-肌动蛋白作为外参照,在其指数期增长的范围内得到鳜不同组织UCP1、UCP2的相对表达水平。结果表明,UCP1基因组全序列为3 146 bp, 5′侧翼调控区为1 333 bp,含有5个内含子和6个外显子,开放阅读框(ORF)长942 bp,编码一个大小为313个氨基酸的蛋白质。UCP2基因组全序列为2 890 bp, 5′侧翼调控区为1 800 bp,含有7个内含子和8个外显子,ORF长939 bp,编码一个大小为312个氨基酸的蛋白质。UCP1、UCP2间隔外显子的内含子皆符合“GT-AG”规则,内含子的数目与哺乳动物一致。系统进化分析表明,鳜UCP1、UCP2氨基酸序列分别与鱼类UCP1、UCP2氨基酸序列聚为一支,且与UCP3、UCP4、UCP5分支区分明显。鳜UCP1、UCP2基因不同组织表达水平的高低可能与鳜本身的生态习性及各器官在产热、脂质代谢中的作用相关,但明确的分子机制尚待进一步研究。 相似文献
192.
鲑鱼生长激素cDNA在大肠杆菌中的表达及表达产物对罗非鱼促?… 总被引:5,自引:0,他引:5
采用聚合酶链反应(PCR)技术在对鲑鱼生长激素cDNA进行改造。将改造后的基因克隆到大肠杆菌表达质粒pBV220,构建重组鲑鱼生长激素基因表达质粒pBVGH18,并在大肠杆菌中获得表达,表达量约占细胞可溶性总蛋白的10%。表达产物经初步纯化和复性后作为饲料添加剂投喂罗非鱼,具有明显的促生长作用。 相似文献
193.
Myf5是生肌调节因子家族成员之一。为研究该基因在大口黑鲈(Micropterus salmoide)肌肉生长发育中的作用,运用RT-PCR和RACE技术获得大口黑鲈Myf5 cDNA序列1093bp,其中开放阅读框长723bp,编码240个氨基酸,经分析该蛋白无信号肽序列,属核蛋白,含有一典型的碱性螺旋-环-螺旋结构域。使用Genome walker技术获得启动子区序列2690bp,预测含有肌肉特异性转录调控相关元件:E-框、肌细胞特异增强子2(MEF2)、核转录因子1(SP1)、上游激活因子(USF)、血清应答因子(SRF)等结合位点。含有早期生长应答因子α(EGRα)、早期快反应生长应答因子1,2(EGR-1,2)等结合位点,它们可能是Myf5能够在体节形成早期表达的主要原因。获得Myf5 3个外显子与2个内含子序列,内含子1中存在一个在不同鱼类中高度保守的长度为123bp的序列,推测参与调节了Myf5基因的时空和组织特异性表达。本研究旨为进一步研究该基因对大口黑鲈肌肉生长发育的作用机理奠定基础。 相似文献
194.
195.
196.
197.
正赵州桥来什么人修?玉石栏杆什么人留……一曲《小放牛》源远流长,使得赵县赵州桥闻名中外。依托赵州桥在世界桥梁史上的重要地位,赵县李春学校开展了独具特色的"桥"文化为主题的校本教材,并把桥文化和学生的动手能力和科技制作联系起来,创作出许多优秀作品。走进教学楼一楼大厅,抬眼望去,一座学生们用几百个易拉罐制成的仿赵州桥的"成才桥"横跨大厅。在李春学校的科技活动室,我们看到了学生们利用易拉罐、冰糕棍、废纸板、木板等制作的各种桥模型。每一座桥模型都体现出制作 相似文献
198.
中华鲟cystatin酵母工程菌的发酵条件和表达产物的纯化 总被引:1,自引:1,他引:1
为进一步开展重组中华鲟(Acipenser sinensis)半胱氨酸蛋白酶抑制剂cystatin功能分析和应用研究,进行了诱导方式、诱导时间和培养基pH值对该重组菌的表达量的影响研究。结果表明,用直接诱导法,在诱导72h、pH值为6.5、甲醇终浓度为0.5%的条件下,对重组酵母进行诱导最为合适,重组cystatin表达量可达每升培养基215mg,约占培养基上清总蛋白量的76.3%。经离子交换层析法纯化,重组cystatin的纯度可达94.2%,生物活性检测试验表明,该方法提取的重组cystatin对木瓜蛋白酶的活性具有明显的抑制作用。 相似文献
199.
200.
【目的】从亲权排除率、鉴别准确率、鉴别成功率等方面评价微卫星标记鉴别草鱼亲权关系的可行性,为草鱼系谱信息的确定奠定基础。【方法】利用8个微卫星标记检测5个草鱼家系亲本(F0)及其子代(F1)的基因型,以Cervus3.0软件进行亲权鉴定,并统计微卫星位点的等位基因数(Na)、多态信息含量(PIC)、观测杂合度(H0)和期望杂合度(He)等;最后通过模拟分析和试验验证,评估8个微卫星位点最多可鉴定的亲本数及其与鉴定率、置信度之间的关系。【结果】8个微卫星位点中,当两个亲本基因型未知时,单个亲本排除率(E-1P)介于0.342-0.668,平均值为0.520;当一个亲本基因型已知时,另一个亲本的排除率(E-2P)介于0.521-0.802,平均值为0.681;一对亲本组合的亲权排除率(E-PP)介于0.711-0.937,平均值为0.847。以95%置信水平和100%鉴定率为标准,模拟分析及试验验证结果表明,所选择的8个微卫星位点最多可以鉴定598个已知性别的亲本或431个未知性别的亲本。【结论】所选的H118、H137、H165、H148、4703、C2489、H57、H81等8对微卫星标记可在生产及科研试验中用于获取草鱼系谱信息。 相似文献