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在25℃室温和37℃恒温台条件下,利用玻璃化冷冻溶液EFS30、EFS40、EDFS30或EDFS40,对小鼠4-细胞胚胎进行玻璃化冷冻保存.以解冻后培养72h的囊胚发育率为其体外发育能力的考核指标,同时对解冻后培养1~3h的胚胎进行移植以判定其体内发育潜力。开放式拉长塑料细管(OPS)二步法冷冻保存,即胚胎首先移入预处理液(10%EG或10%EG+10%DMSO)中平衡30s,再移入玻璃化溶液中洗涤后吸入OPS管中,分别经35、30或25s后直接投入液氮中冷冻保存。一步法冷冻保存则无需预处理液处理。结果表明,小鼠胚胎4-细胞一步法和二步法冷冻后囊胚最高发育率分别为87.7%和88.6%,与对照组(93.0%)差异不显著(P〉0.05)。利用最佳冷冻组获得的143枚胚胎移植于12只假妊娠50~60h的受体母鼠,结果有4只妊娠产仔17只,妊娠产仔率为42.5%(17/40),与对照组59.4%(19/32)差并不显著(P〉0.05)。 相似文献
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牛卵母细胞体外成熟技术研究进展 总被引:1,自引:0,他引:1
牛卵母细胞体外成熟是一项重要的繁殖生物技术,但是由于卵母细胞没有经历体内促黄体激素(LH)峰启动前的生长过程及生物事件干扰了胞质成熟,导致体外发育能力低于体内成熟的卵母细胞。卵母细胞成熟过程复杂,涉及细胞核、细胞质及分子成熟。牛卵母细胞体外成熟受多种因素影响,其中包括卵母细胞来源、颗粒细胞与卵母细胞间相互作用及体外培养环境等。迄今为止,为了提高牛卵母细胞的体外发育能力,许多学者模拟卵母细胞体内环境发展了一些新的体外成熟技术,诸如体外延迟自发恢复减数分裂成熟、外源卵母细胞分泌因子促进卵母细胞体外成熟及模拟生理条件下卵母细胞成熟等方法。本文综述了牛卵母细胞成熟过程、影响卵母细胞体外成熟因素及近年来提高牛卵母细胞体外成熟的新方法。 相似文献
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猪体外受精(in vitro fertilization,IVF)技术效率的不稳定性限制了该技术在畜牧生产中的应用。本研究比较了精子获能前后的状态和活精子数之间的关系;精子获能后的浓度和状态对IVF后胚胎卵裂率、囊胚率的影响;不同个体来源的精子混合后对IVF卵裂率、囊胚率的影响。结果表明:精子获能前后,活精子数无显著性差异(P>0.05);检测精子的浓度与状态与卵裂率、囊胚率无直接关联;利用混合精子进行IVF,单一精子所得到的IVF囊胚率分别是A17.00%、B 12.24%、C 33.00%、D 4.81%、E 10.00%、F 22.00%,混合精子的囊胚率分别是A+B 77.00%、C+D 67.01%、E+F 35.50%,混合精子和单一精子的囊胚率差异不显著。 相似文献
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为了比较CIDR+PG与CIDR+PG+PMSG两种激素处理方法对于受体同期发情以及胚胎移植的效果,将103只小尾寒羊作为胚胎移植受体分为两组,分别使用上述两种方法进行同期发情处理。其中,CIDR+PG组83只,CIDR+PG+PMSG组20只。在对供体羊人工输精后第6.5天获取移植囊胚,分别移植到两组受体子宫内。统计受体的发情率、黄体生成情况,以及移植后的妊娠情况。CIDR+PG组与CIDR+PG+PMSG组受体羊发情率分别为87.95%、90.00%;有黄体羊的比例分别为37.35%和75.00%,平均黄体数为1.81和1.93个;两组受体胚胎移植后妊娠率分别为77.41%和86.67%。结果表明,使用CIDR+PG+PMSG进行同期发情效果较好,且胚胎移植后妊娠效果较好。 相似文献
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蓝狐卵母细胞的体内外成熟 总被引:1,自引:0,他引:1
对蓝狐卵母细胞成熟时间和超数排卵后卵母细胞的发育阶段进行了研究。采集间情期 (11~ 12月份 )蓝狐卵巢 ,用切割法回收卵泡中的卵母细胞 ,每个卵巢平均获得 8个卵丘卵母细胞复合体 (COCs:cumulus oocyte complexes,480个卵 / 6 0个卵巢 )。COCs在成熟液 (TCMI99+10 %FCS+10 μg/ L EGF+10 IU/ m L PMSG+10 IU/ m L h CG)培养 ,并在不同时间将卵母细胞固定、染色观察其成熟阶段。结果表明 ,核网期卵母细胞在培养前的比例为 80 .70 %(P<0 .0 1) ;GV期卵母细胞在培养 2 4h比例最高 (34 .0 4%,P<0 .0 1) ;GVBD期卵母细胞也是在培养 2 4h比例较高(4 4.6 8%,P<0 .0 5 ) ;M 期卵母细胞在培养 48~ 12 0 h比例较高 (P<0 .0 5 ) ,48h最高 (30 .0 0 %) ;M 期卵细胞在培养 72~ 96 h比例较高 (P<0 .0 5 ) ,72 h比例最高 (2 9.41%) ;卵母细胞在培养 12 0 h退化比例最高 (2 2 .2 2 %,P<0 .0 1)。因此 ,间情期卵母细胞体外培养 72~ 96 h为最佳。对繁殖季节 (3月份 )蓝狐进行超排处理 ,回收卵巢卵泡中卵母细胞及输卵管、子宫角的卵母细胞 ,固定、染色 ,观察其所处的发育阶段。母狐皮下注射 5 0 0 IU PMSG,48h后皮下注射 2 5 0 IU h CG,一组在 72 h后屠宰 ,结果表明 ,母狐卵巢体积虽然有所增大 ,但没有排卵 ,将卵泡中 相似文献