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【目的】 鉴定绵羊趋化因子C-C基序配体19(C-C motif chemokine ligand 19,CCL19)基因启动子的核心启动子区域和关键转录因子,探究该基因在转录调控方面的作用机制。【方法】 选取绵羊CCL19基因5'-侧翼序列1 000 bp,PCR扩增启动子的7个不同长度的截短片段,并连接至pGL3-Basic质粒;将重组质粒与pRL-TK质粒共转染到293T细胞中,结合双荧光素酶报告基因检测系统分析不同截短片段的相对荧光活性。利用在线预测软件分析和筛选CCL19基因核心启动子区域内的转录因子结合位点。采用定点突变技术构建转录因子结合位点缺失的荧光素酶报告载体,与pRL-TK质粒共转染到293T细胞,分析转录因子结合位点缺失质粒的相对荧光活性。【结果】 成功构建了7个不同长度(pGL3-P、pGL3-P1、pGL3-P2、pGL3-P3、pGL3-P4、pGL3-P5及pGL3-P6)的CCL19基因启动子片段的荧光素酶报告载体;采用双荧光素酶报告基因检测系统鉴定出转录起始位点上游-256/-186 bp为CCL19基因启动子核心启动子区域,表明该区域对CCL19基因转录调控有重要作用。生物信息学分析预测到该区域存在POU5F1(-201/-189 bp)、ZBTB26(-228/-217 bp)、FOXI1(-239/-228 bp)、GLI2(-255/-243 bp)和SP2(-219/-211 bp) 5个转录因子的结合位点,并成功构建了转录因子结合位点缺失的荧光素酶报告载体。双荧光素酶报告基因检测系统分析显示,POU5F1转录因子的结合位点缺失后绵羊CCL19基因转录活性极显著降低(P<0.01),FOXI1、ZBTB26、SP2转录因子结合位点缺失后绵羊CCL19基因转录活性均极显著升高(P<0.01)。【结论】 试验成功构建CCL19基因启动子荧光素酶报告载体,确定CCL19基因启动子的核心启动子区域为转录起始位点上游-256/-186 bp,并鉴定出转录因子POU5F1结合位点可能是CCL19基因转录的重要调控位点,为下一步研究绵羊CCL19基因在先天性免疫、适应性免疫和淋巴细胞迁移等方面的功能提供理论基础。 相似文献
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对江苏省丰县426个农业用地和213个蚕桑用地的样本土壤养分进行了调查化验,结果显示:丰县蚕桑用地有机质含量为8.8 g/kg,比一般农业用地低3.2 g/kg;全氮含量为0.99 g/kg,比一般农业用地高0.17 g/kg;速效磷含量为24.2 mg/kg,比一般农业用地低0.4 mg/kg;速效钾含量为66.2 mg/kg,比一般农业用地低40.2 mg/kg.并在此基础上对丰县土壤肥力状况进行了对比分析,指出了丰县蚕农“轻有机、重氮肥,少施磷、不施钾”的不当施肥习惯和合理施肥、平衡施肥的重要性. 相似文献
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1996年我所承担了山东省科委的“青蟹引进技术的研究”项目,经过6年的研究探索,圆满完成课题下达的科研指标,本文就青蟹在北方地区越冬技术总结如下。一、青蟹越冬前的准备工作1.室内工厂化越冬室内越冬池规格为2.75米×4.24米×1.2米,将池底远离排水口端2/3面积铺7~8厘米厚、粒度为0.5毫米的细沙,沙上放置脊瓦用作青蟹越冬的隐蔽物。室内采用黑色塑料布遮光,光照强度控制在1000勒克斯,室内装有暖气片供越冬室内调节气温,备有专用的预热水池,越冬池在越冬前用100克/米3的漂白粉消毒,池底所铺沙层用20克/米3高锰酸钾消毒。2.室外露天土池越… 相似文献
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陇县面积2277 km2,辖10个镇104个行政村,人口27.3万,其中农业人口24.1万,耕地面积353.2 km2,农作物播种面积446.8 km2,农业产值占全县生产总值的24%,是典型的山区农业县.目前,陇县农业发展处于快速上升阶段,因此需要着力调整农业产业结构、扩大种植规模、突出特色农业种植、优化农业发展环境... 相似文献
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<正>一、加强理论学习,提高理论水平目前已进入知识经济时代,光有较高的政治理论水平是不能适应社会主义市场经济发展需要的。必须建设学习型的领导班子,不断用市场经济的新知识、新理论充实自己,提高自己的知识素养,时刻 相似文献
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鸡传染性支气管炎是由冠状病毒属的鸡传染性支气管炎病毒引起的一种鸡的急性、高度接触性传染病,以呼吸道症状、产蛋下降或肾脏病变为主要特征。 传染性支气管炎自然感染仅发生于鸡,各种年龄的鸡均易感染,但以雏鸡发病较为严重。本病一年四季均可发生,但以寒冷季节多发。幼鸡感染可发生死亡;感染耐过的幼雌鸡则可引起输卵管永久性退化给蛋种鸡场带来巨大损失。产蛋鸡感染会发生产蛋下降、蛋的品质降低,传支还可使鸡的增重和饲料报酬降低。若发生继发感染,则会提高鸡群死亡率。因此传支在经济上具有重要地位,可以说产品效益下降所造… 相似文献
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林业技工87级机修民、汉两班是由疆新木材运输公司代办的,于1990年7月在完成教学内容后,学生进行双证考核,后分配生产单位上岗顶班作业.经过几个月的工时定额、实际生产操作测试使用,这些学生全能够胜任本单位技术操作,可望成为企业中的一批生产骨干力量. 相似文献