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为了解军曹鱼NHE3与NKAα1a的序列特征、盐度胁迫下的基因表达模式以及相关miRNA的靶向调控作用,实验应用cDNA末端快速扩增技术克隆了NHE3与NKAα1a的全长cDNA序列;应用实时定量PCR (qPCR)技术分析了NHE3和NKAα1a的组织特异性和盐度适应性表达模式;采用双荧光素酶报告实验检测了NHE3和NKAα1a与相关miRNA的靶向调控关系。结果显示,军曹鱼NHE3与NKAα1a基因的开放阅读框长度分别为2 718和3 075 bp,分别编码905和1 024个氨基酸;NHE3、NKAα1a在鳃、肠、心脏等9种组织中均有表达,其中以鳃组织中的表达丰度最高。随着盐度升高,NHE3在鳃中表达量下降,低盐和高盐适应后均呈显著差异。NKAα1a基因表达量随着盐度升高出现不同趋势,在鳃和肠中受低盐和高盐影响后均显著上调,而高盐环境下其在体肾中的表达水平显著下调。在不同盐度适应过程中,NHE3、NKAα1a均以鳃组织中的表达水平最高。NHE3-pmirGLO-WT与miR-1335-3p共转染时,较对照组相对荧光素酶活性下降,并存在极显著差异; NKAα1a-pmirGLO-WT分别与miR-1788-3p和mimic NC (对照组)的共转染结果与上述结果类似。研究表明,miR-1335-3p和miR-1788-3p可分别与NHE3和NKAα1a 3′-UTR序列结合,并下调其mRNA表达水平。NHE3和NKAα1a在物种间高度保守;NHE3主要参与低盐适应,而NKAα1a在低盐和高盐适应中均发挥作用;miR-1335-3p和miR-1788-3p可分别负向调控其靶基因NHE3与NKAα1a,从而参与军曹鱼渗透压调节。以上研究结果为进一步研究军曹鱼miRNA-mRNA渗透压调控网络提供了理论基础。 相似文献
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在城市园林绿地中应用地被植物,不仅可以提高城市的园林绿化水平,还有利于提高居民的生活质量。地被植物在城市园林绿地中的有效应用,还能够在一定程度上改善当前城市生态环境,从而使现有城市建设更好地满足时代发展要求。地被植物在城市园林绿地中的合理应用,还可以更好地发挥其生态功能、景观功能、经济功能,在一定程度上降低城市的绿化成本,从而有效推动城市经济的健康、可持续发展。 相似文献
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四川食用菌栽培历史悠久,是全国的食用菌大省,在西部地区占有举足轻重的地位。丰富的资源和优越的气候条件为发展食用菌提供了巨大的潜力,而西部大开发和加入WTO更将为我省食用菌产业化发展带来前所未有的机遇。一、四川菌业的现状及存在问题在农业生产结构调整的新形势下,食用 相似文献
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107.
应用限制性显示PCR(RD-PCR)技术构建溶藻弧菌poly(A)化mRNA的cDNA文库,筛选,收集巧妙地解决了由于细菌mRNA poly(A)化位点的高度多态性、用常规方法构建原核cDNA文库所遇到的文库大量重复冗余的难题。并进行筛选、收集cDNA片段进行测序,根据测序结果进行生物信息学分析和结果验证。实验结果表明,我们成功地构建了溶藻弧菌poly (A)化mRNA的cDNA文库,获得一百多个基因片段并对其中53个基因片段进行测序分析,获得了如细菌Ⅲ型分泌系统易位蛋白、趋药性传感器、类丝氨酸蛋白酶等毒力相关因子的基因片断。并且在一定程度上证实了poly(A)化在细菌中不是个别和偶然的现象。实验结果说明了我们所构建的溶藻弧菌poly(A)化mRNA的cDNA文库质量高,文库基因片段的重复性低,筛选基因片段效率高、目的性强。本文并探讨了限制性显示PCR技术在细菌poly(A)化mRNA的cDNA1文库构建中的应用价值。 相似文献
108.
油木奈果实β-tubulin cDNA的克隆及表达 总被引:1,自引:1,他引:0
以油木奈果实为材料,应用RT-PCR和RACE技术克隆其β-tubulin cDNA,并采用半定量的方法对该基因进行表达量分析。结果表明,油果实β-tubulin的cDNA全长1606 bp,包含一个1341 bp的开放阅读框,共编码446个氨基酸。对其推导氨基酸序列进行比对分析,表明油果实β-tubulin与众多植物来源的β-tubulin具有很高的相似度。通过设计特异性引物,对果实11个发育时期β-tubulin表达量分析的结果表明,该β-tubulin基因表达量稳定,说明该β-tubulin可作为油果实整个生长发育时期内参基因使用,可以在为进一步应用实时荧光定量PCR技术研究油果实发育相关基因的表达奠定了试验基础。 相似文献
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棚栽业是我市的一项新兴主导产业,为了保证这一产业持续、稳定、快速发展,市农业监测站采取得力措施,以宜川县为基点,大力推广大棚蔬菜测土配方施肥技术,为菜农提供"测、配、施"一体化服务。实践证明,大棚蔬菜测土配方施肥技术具有节省化肥、提高化肥利用率、降低农业成本等作用,达到增产、增收之目的。据宜川县土肥站2006年-2009年对全县1327个大棚蔬菜土样测定及试验结果表明,采用配方施肥技术,棚均增产幅度一般在8%~15%,最高达20%以上,每公顷降低化肥成本150~225元,化肥利用率可提高5%~10%。 相似文献
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