牦牛ATG5多克隆抗体的制备及应用

为了进一步研究自噬在牦牛生殖活动中发挥的作用，本研究通过合成牦牛自噬相关5(autophagy related 5,ATG5)基因，并将合成的基因插入pET-32a质粒，转化BL21(DE3)感受态细胞，异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(isopropyl-β-D-Thiogalactoside, IPTG)诱导表达ATG5重组蛋白并纯化，免疫日本大耳白兔，制备牦牛ATG5多克隆抗体。采用间接ELISA法检测抗体的效价，蛋白质印迹(Western blot, WB)技术检测多克隆抗体的特异性。通过Western blot、免疫组织化学法(immunohistochemistry, IHC)和免疫荧光技术(immunofluorescence, IF)应用所制备的抗体检测ATG5蛋白在牦牛生殖器官中的表达。结果成功构建了pET-32a-ATG5原核表达质粒，转化大肠杆菌IPTG诱导获得了大小约为53 kDa(含His和Trx标签)的重组蛋白；制备的牦牛ATG5多克隆抗体效价为1∶1 280 000,特异性良好。应用显示，ATG5蛋白在牦牛睾丸和输卵管中均有表达。本研究成功制备了牦牛ATG5多...     

广西辣椒病毒的sRNA深度测序和RT-PCR鉴定

采用小RNA(sRNA)深度测序技术，结合RT-PCR技术对广西9个辣椒主产区具有典型病毒病症状的病样进行检测，共发现10种病毒，其中小米椒内源RNA病毒1(Capsicum frutescens endornavirus 1,CFEV 1)、辣椒潜隐病毒2(pepper cryptic virus 2,PCV 2)、烟草轻型绿花叶病毒（tobacco mild green mosaic virus,TMGMV）和辣椒黄脉病毒（pepper vein yellows virus,PeVYV）是在广西辣椒上首次发现，且CFEV 1在中国是首次发现。10种病毒在75份辣椒病样中的总检出率为8.00%～66.67%，前5位依次为辣椒脉斑驳病毒（chilli veinal mottle virus,ChiVMV,66.67%）、甜椒脉斑驳病毒（pepper veinal mottle virus,PVMV,62.67%）、黄瓜花叶病毒（cucumber mosaic virus,CMV,41.33%）、CFEV 1(32.0%)以及PCV 2(26.67%)。ChiVMV、PVMV、CMV和C...     

小球藻对小麦生长及土壤性质的影响

为了研究小球藻作为生物肥料的潜能，以盆栽小麦为实验材料，探究施用不同浓度的小球藻对小麦生长及土壤质量的影响。结果表明：小麦根部冲施小球藻能提高小麦生长指标，其中株高增加4.01%～11.99%，地上部鲜重增加16.01%～29.42%，叶绿素a增加4.90%～80.72%，叶绿素b增加9.38%，总叶绿素增加11.99%～48.56%。同时，小球藻可以改善土壤质量，其中有机质增加5.26%～6.93%，碱解氮增加2.89%～10.14%，有效磷增加3.79%～13.11%，速效钾增加6.63%～13.08%，土壤pH也提升0.46%～1.62%。综上所述，施用小球藻不仅可以促进小麦的生长，增加小麦的生物量，还可以一定程度上改善土壤质量。     

LRTN4RL1-AS通过miR-27a-3p靶向PPARγ调节奶牛乳腺细胞乳脂合成

旨在探究lncRNA-LRTN4RL1-AS/miR-27a-3p/PPARγ轴在奶牛乳脂合成中的作用及其调控机制。本研究以奶牛乳腺上皮细胞(bovine mammary epithelial cells, BMECs)为试验对象，对处理组与对照组进行3个生物学重复，通过实时荧光定量(real time quantitative PCR, RT-qPCR)、WB(Western blot)、油红O染色和甘油三酯检测、双荧光素酶报告等技术检测lncRNA-LRTN4RL1-AS对BMECs中甘油三酯积累及脂质合成相关基因表达量的影响，验证LRTN4RL1-AS-miR-27a-3p-PPARγ存在内源竞争RNA(competing endogenous RNAs, ceRNA)的靶向关系。结果表明，LRTN4RL1-AS主要在细胞质中表达，干扰LRTN4RL1-AS后显著抑制了BMECs的脂滴形成和甘油三酯积累(P<0.05),显著下调脂质合成相关基因CEBPα(P<0.01)、CEBPβ(P<0.01)和PPARγ(P<0.05)表达，且显著上调脂质分解基因HS...     

大豆种质资源萌发期耐盐性评价和耐盐机理解析

为了筛选耐盐大豆种质资源作为耐盐育种亲本材料和盐碱地种植的依据，用0.4%和0.8%的NaCl处理52份大豆种质，调查萌发指标和部分种质的苗期指标，进行耐盐评价。结果表明，0.8%NaC处理下，群体发芽势、发芽率、下胚轴长和粗等指标较对照和0.4%NaCl处理显著下降，但群体内个体差异较大。在0.4%和0.8%NaCl胁迫条件下，不耐盐大豆种质的叶绿素含量和叶片相对含水量均显著低于耐盐种质；在0.8%NaCl胁迫下，不耐盐种质根中持Na⁺能力降低，茎中的Na⁺含量显著高于耐盐种质。通过隶属函数法综合分析，共筛选出耐盐大豆种质资源18份，中间型种质资源23份，不耐盐种质资源11份。     

基于隶属函数和聚类分析法的广西韭菜地方种质资源耐热性评价

【目的】建立韭菜种质资源耐热性评价方法，为选育耐热韭菜品种及丰富广西耐热韭菜品种资源提供参考依据。【方法】以农业农村部第三次种质资源普查与收集行动(2015—2020)期间收集的广西大叶韭、宽叶韭和细叶韭3类韭菜地方种质资源(分别标记为A、B、C、D、E、F、G、H和I)为试验材料，测定其38℃高温胁迫(实验室组)处理7 d后的生长指标(叶片最大生长长度和地上部新增生物量)和生理指标[叶绿素、脯氨酸(Pro)和丙二醛(MDA)含量],结合田间自然高温胁迫(田间组)实际耐热表现，利用多元统计分析法(主成分分析、隶属函数法和聚类分析法)综合评价不同类型韭菜种质资源的耐热性。【结果】在38℃高温胁迫下，广西大叶韭、宽叶韭和细叶韭3类9份韭菜种质的叶片最大生长长度和地上部新增生物量均较其适温对照(CK)极显著下降(P<0.01),其中，降幅最大的是大叶韭类型，降幅最小的是细叶韭类型；叶绿素含量均有不同程度下降，其中，降幅最大的是大叶韭类型，降幅最小的是细叶韭类型；MDA含量均有不同程度上升，其中，升幅最大的是大叶韭类型，升幅最小的是细叶韭类型；Pro含量均有不同程度上升，其中，升幅最大的...     

不同培养基及生长调节剂添加对丹参微扦插苗的影响

以丹参组培苗茎段为材料，研究不同基本培养基(MS、1/2MS、N6、GS)及MS+6-BA0.05 mg/L+IBA0.02 mg/L(M1)、MS+6-BA0.05 mg/L+IBA0.01 mg/L(M2)对丹参微扦插苗株高、根长、叶片数和苗鲜重等生长指标的影响。结果表明：在基本培养基MS中添加适量低浓度的6-BA、IBA利于丹参微扦插苗茎叶生长，M2处理生根数量和根长优于其他，平均根数达7.97条，根长13.58 cm; M1、MS、N6处理生根指标无显著差异。MS处理的微扦插苗平均鲜重1.28 g/株。综合各项生长特性指标，MS为最优茎段微扦插苗基本培养基。     

基于语音识别处理的植保无人机航行路径控制研究

设计了基于HMM的语音识别处理算法，分析了植保无人机的结构与工作原理，并利用改进人工势场法对植保无人机的飞行控制和航行轨迹规划进行分析了研究。试验结果表明：语音控制控制准确度非常高，达到了90%及以上；植保无人机航行路径控制准确，能够成功避开障碍物，并动态规划最优飞行路径。     

橡胶草Tk-bZIP11转录因子基因的克隆及其表达模式分析

橡胶草(Taraxacum kok-saghyz)种植过程中经常受干旱等胁迫影响，提高品种的抗逆性具有重要意义。为了研究bZIP转录因子在橡胶草逆境响应中的功能，本研究从橡胶草中克隆了Tk-bZIP11基因，其ORF全长468 bp，编码156个氨基酸。蛋白结构分析结果表明，Tk-bZIP11蛋白具有bZIP转录因子特有的保守结构域，同时具有核定位信号。在进化关系上，Tk-bZIP11与莴苣(Lactuca sativa) Ls-bZIP11亲缘关系最近，并具有相同的保守基序。亚细胞定位结果表明，Tk-bZIP11定位在细胞核中。实时荧光定量PCR (RT-qPCR)分析结果表明，Tk-bZIP11在橡胶草的不同组织均有表达，其在叶片中表达量最高，是花梗中表达量的3.28倍。在经甘露醇诱导的渗透压胁迫下，Tk-bZIP11在处理后呈现显著下调表达。在NaCl和PEG-4000模拟的胁迫处理下，Tk-bZIP11在处理后12 h内均呈现上调表达，24 h后呈现下调的规律。在植物激素茉莉酸甲酯、乙烯利和脱落酸处理下，Tk-bZIP11表达量也是在处理的前12 h显著上调表达，之后下调表达。...     

柑橘采后病原菌意大利青霉creA基因的克隆及表达分析

为初步分析柑橘采后病原菌意大利青霉(Penicillium italicum)碳代谢调控因子CreA的功能,克隆到意大利青霉的creA基因。PicreA基因全长1 236 bp,无内含子,PiCreA蛋白由411个氨基酸组成,含有2个转录因子典型的锌指结构域。系统进化分析表明,PiCreA蛋白与扩展青霉(Penicillium expansum)亲缘性最高。采用荧光定量PCR方法,观察到PicreA基因面对不同碳源诱导具有不同的表达响应。对于单糖一般在短时间内诱导得到较高表达,随着时间延长,抑制碳源葡萄糖诱导PicreA呈现先下降再上升的趋势,推测发生了PicreA的自我抑制;而在去抑制碳源木糖环境中,PicreA的表达量略有下降并逐渐保持相当高的水平。对于非糖类的去抑制碳源乙醇,PicreA基本维持稳定的较高表达状态。PicreA基因在整个意大利青霉侵染柑橘过程中稳定表达。