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101.
为建立动物源性食品中沙拉沙星(SAR)残留的快速检测方法,本试验通过对盐酸沙拉沙星进行分子改造和偶联蛋白合成完全免疫原,免疫小鼠制备SAR单克隆抗体。通过棋盘法确定最佳包被原浓度及一抗稀释度,优化确定最佳反应条件,从而建立间接竞争化学发光酶联免疫(ic-CLEIA)检测方法,并通过灵敏度、精密度、交叉反应率、添加回收试验对该方法进行评价。紫外扫描结果显示,完全免疫原偶联成功;制备的SAR单克隆抗体效价达1:4×106;包被原浓度为0.25 μg/mL,抗体稀释比为1:750 000,4 ℃包被过夜,5%脱脂乳封闭,竞争孵育1 h,酶标二抗稀释比为1:10 000,孵育1 h为ic-CLEIA最佳反应条件;建立的ic-CLEIA方法标准曲线呈线性,线性范围为0.0625~10 ng/mL,R2=0.995,灵敏度IC50为1.45 ng/mL;其平均批内和批间变异系数均<10%;除与二氟沙星的交叉反应率达到98.08%以外,与其他氟喹诺酮类药物的交叉反应率均<8%,与其他非氟喹诺酮类药物均无交叉反应;SAR标准溶液的最低检测限(LOD)为0.32 ng/mL,SAR在鸡肉样品中的LOD为0.46 μg/kg;添加回收率在88.3%~106.7%范围内,其变异系数≤12.2%。结果表明,本研究建立的ic-CLEIA方法检测速度快、灵敏度高,适用于动物源性食品中SAR残留的大量检测,为SAR残留检测提供了新的方法。 相似文献
102.
己烯雌酚单克隆抗体的制备及鉴定 总被引:4,自引:1,他引:4
用人工合成的己烯雌酚-牛血清白蛋白(DES-BSA)作为抗原免疫Balb/c小鼠,利用杂交瘤技术建立了1株稳定分泌己烯雌酚单克隆抗体的杂交瘤细胞1F5,经鉴定:杂交瘤细胞染色体数为99.24±2.5,其分泌的抗体亚型为IgG2α。该细胞株体外传代和冻存复苏后抗体分泌稳定。间接ELISA测定培养上清效价为1∶640,诱生腹水效价3.2×106。ciELISA检测显示其DES 50%抑制质量浓度(IC50)为24μg/L,与水产养殖中常见禁用激素和抗菌药物的交叉反应小,表明该单抗具有较好的敏感性和特异性。 相似文献
103.
104.
为构建表达新孢子虫重组蛋白SRS2原核表达系统,本研究以新孢子虫基因组为模板PCR扩增SRS2蛋白部分基因,获得大小约为998bp的目的片段,并克隆到大肠杆菌PET-32a载体中,IPTG诱导重组大肠杆菌,通过SDS-PAGE和免疫印迹分析表达产物并鉴定其生物学活性。经SDS-PAGE分析,表达的重组SRS2蛋白分子量约为54kD,免疫印迹结果表明,表达的重组蛋白与牛抗新孢子虫阳性血清反应形成一条特异性蛋白条带。本实验为进一步研究诊断和治疗新孢子虫病奠定了基础。 相似文献
105.
大麻,具有毒品和工业原料的双重属性。作为毒品,大麻被世界各国严格管制;作为工业原料,大麻全身是宝,其产业发展前景十分广阔。加快发展工业大麻产业,是替代国内传统有毒大麻种植的有效途经。是调整农业产业结构和推动农民脱贫致富的有力举措。是建设新型工业产业的最佳选择。 相似文献
106.
大麻,具有毒品和工业原料的双重属性。作为毒品,大麻被世界各国严格管制;作为工业原料,大麻全身是宝,其产业发展前景十分广阔。加快发展工业大麻产业,是替代国内传统有毒大麻种植的有效途经,是调整农业产业结构和推动农民脱贫致富的有力举措,是建设新型工业产业的最佳选择。1大麻与工业大麻大麻,我国俗称火麻,部分地区又称为线麻、寒麻、露麻、汉麻、魁麻等,是大麻科大麻属的一年生草本植物。大麻为短日照作物,多为雌雄异株,耐贫瘠、抗逆性强、适生性广,具有喜光照、光合作用效率较高的生物学特性,在长日照或长光照条件下长势旺盛,植株可高… 相似文献
107.
108.
109.
西畴县林地保护利用现状及对策 总被引:1,自引:0,他引:1
从西畴县林地保护利用现状入手,分析了林地保护利用中存在的林地保护与利用矛盾突出、对林业的重要性认识不足、需要统一规划管理、林业管理体制与机制有待进一步完善、商品林地经营水平依然不高等问题,提出了林地分级保护、森林分类区划、林地用途管制的对策措施。 相似文献
110.