“互联网+”时代下的茶叶企业财会管理研究

经济与科技的进步使互联网得到了迅猛的发展，并广泛的应用到各行各业中。传统茶叶企业财会管理在实际的工作中面临各种问题，所以，在大“互联网+”背景下，需要顺应时代的发展潮流加快茶叶企业财会管理改革工作。本文从“互联网+”时代茶叶企业财会管理创新的必要性出发，深入分析了茶叶企业财会管理发展现状，提出“互联网+”时代背景下提升茶叶企业财会管理的有效途径，旨在为茶叶企业实现现代化财会管理模式提供参考。     

鸡传染性贫血病毒CRISPR/Cas13a检测方法的建立及初步应用

为了快速、准确和简便地检测鸡传染性贫血病毒(chicken infectious anemia virus, CIAV),本研究参照GenBank中CIAV的VP2基因设计了特异的RPA引物和用于LwCas13a反应系统的crRNA,通过优化反应条件建立了检测CIAV的CRISPR/Cas13a方法，并验证了该方法的特异性、敏感性和复合性。结果显示，该法对感染鸡的其他常见病毒的检测均为阴性，特异性良好无交叉反应；灵敏度为50 copies/μL;与PCR的检测结果有很好的符合率。本研究建立的CRISPR/Cas13a检测方法配合试纸条显色在1.5 h内可对CIAV进行快速的鉴别诊断，为该病的诊断及防控净化提供了强有力的技术支撑。     

鸭甲型肝炎病毒3型和鸭圆环病毒双重荧光定量PCR检测方法的建立

为建立同时检测鸭甲型肝炎病毒3型（DHAV-3）和鸭圆环病毒（DuCV）的双重荧光定量PCR方法，试验根据NCBI中收录的DHAV-3 VP1和DuCV cap基因序列，分别设计了1对特异性引物和1条TaqMan探针，建立了同时检测DHAV-3和DuCV的双重荧光定量PCR，对该方法的特异性、敏感性和重复性进行评估，并采用该方法对临床样品进行检测。结果显示：建立的方法不与其他常见鸭病原发生交叉反应，对DHAV-3和DuCV的检测灵敏度分别为3.8 copies/μL和7.3 copies/μL，批内和批间变异系数均小于2%，从65份临床样品中分别检出DHAV-3和DuCV阳性样品11份和28份，与现有地方标准符合率分别为95.4%和90.8%。研究表明，建立的双重荧光定量PCR特异性强、敏感性高、重复性好，可用于DHAV-3和DuCV的快速检测。     

鸭甲肝病毒1型和3型一步法双重RT-PCR鉴别检测方法的建立及其初步应用

为建立一种快速鉴别不同基因型鸭甲肝病毒(DHAV)的检测方法，根据DHAV-1和DHAV-3特异性序列，分别设计合成鉴别检测引物，经一步法双重RT-PCR反应条件的优化，建立了鉴别DHAV-1和DHAV-3的一步法双重RT-PCR方法，并应用该方法对2016—2021年山东地区采集的58份临床病料样品进行病原学检测分析。结果显示：该方法能够分别扩增出DHAV-1的230 bp和DHAV-3的502 bp的特异性条带，而DTMUV、NDV、AIV-H9、FADV、DEV、GPV均无任何扩增条带。该方法最低可检测到0.62 ng DHAV-1 RNA和0.59 ng DHAV-3 RNA。该方法与病毒分离方法的符合率达100%。该方法检测58份临床病料样品，共检测出阳性样品27份，阳性率达46.55%,其中2016—2021年DHAV-1阳性率分别为33.33%,25.00%,22.22%,12.50%,11.11%,0.00%;DHAV-3阳性率分别为8.33%,16.67%,22.22%,37.50%,33.33%,37.50%。表明建立的DHAV-1和DHAV-3一步法双重RT-PC...