乌昌地区麻花鸡禽流感母源抗体消长规律的研究及首免时间的选定

乌鲁木齐市禽流感时有发生,在免疫禽流感的过程中,乌昌两地麻花鸡的免疫抗体水平不能达到有效保护水平,对此我们对麻花鸡的母源抗体水平进行了检测,并确定了乌昌地区麻花鸡的首免时间为7～10日龄。     

三种特色乳粉化学成分和氨基酸组成分析

对采用喷雾干燥法生产的马乳粉、驴乳粉和驼乳粉化学成分、氨基酸含量和氨基酸组成进行测定和分析。结果显示:三者的蛋白质含量依次为20.8%、18.4%和26.4%,脂肪依次为13.6%、10.2%和34.9%,乳糖依次为58.2%、63.6%和31.2%;三种特色乳粉化学成分的实际测定值和按乳粉/生乳干物质比值计算出的理论值基本相符。三种特色乳粉中驼乳粉蛋白质和总氨基酸含量最高,其次为马乳粉和驴乳粉;三种乳粉中8种人体EAA占TAA的比率驼乳粉为44.4%,马乳粉和驴乳粉分别为42.5%和42.3%。     

猪NLRP3单克隆抗体制备及其抗原表位的鉴定

为制备猪炎症小体NLRP3的特异性单克隆抗体(monoclonal antibodies, MAb),本研究将原核表达的可溶性重组蛋白NLRP3作为免疫原免疫BALB/c小鼠,经融合、筛选获得了3株能稳定分泌NLRP3蛋白的杂交瘤细胞株9H5、13E1、15E2,鉴定了抗体亚类,将目的蛋白逐步截短后鉴定出了单克隆抗体识别的抗原表位区域。结果表明,MAb 9H5和15E2识别的抗原表位序列在1～57 aa之间,MAb 13E1识别的表位序列在115～186 aa之间。免疫荧光、Western blot和亚类鉴定试验显示,杂交瘤细胞产生的抗体均可与NLRP3及重组蛋白特异性结合,9H5、13E1、15E2的重链亚型均为IgG 2b,轻链分别为λ、λ和κ链。本研究成功制备了猪NLRP3的单克隆抗体,为进一步研究猪炎症小体NLRP3的功能提供工具。     

蜂胶黄酮对病毒诱导PK-15细胞凋亡的影响

为研究蜂胶黄酮对病毒诱导宿主细胞凋亡的影响,将蜂胶黄酮从最大安全浓度250μg/mL倍比稀释5个浓度,与猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪细小病毒(PPV)分别一起加至单层PK-15细胞培养体系中,用流式细胞仪检测蜂胶黄酮对TGEV和PPV感染PK-15细胞凋亡率的影响。结果显示,与病毒对照组比较,TGEV和PPV感染PK-15细胞后,蜂胶黄酮可以显著降低PPV感染引起的PK-15细胞凋亡率,而对TGEV感染引起的PK-15细胞凋亡率则没有显著影响。说明蜂胶黄酮可以减轻无囊膜的PPV感染对PK-15细胞引起的凋亡。     

两株猪圆环病毒2型的分离及基因组序列分析

为比较猪圆环病毒2型毒株的遗传变异特性,从2009年河南郑州和山东东营的猪场疑似猪断奶后多系统衰弱综合征(PMMS)病料中分离到2株病毒,经PCR检测初步鉴定为猪圆环病毒2型,并对病毒全基因组进行扩增,用DNA Star对序列进行比较分析.结果表明,分离到的河南郑州和山东东营PCV-2毒株全基因组长度均为1 767 b...     

兔血管内皮细胞的体外培养及生物学特性

为研究兔瘟病毒对兔血管内皮细胞的致病性,建立兔血管内皮细胞的体外培养方法.采用消化法和组织块贴壁法分离获得兔子血管内皮细胞,对其进行体外培养,并对细胞进行第Ⅷ因子相关抗原的免疫组织化学鉴定和CD34的间接免疫荧光检测.结果表明,消化法分离的细胞20 h左右贴壁,约1周长成单层,纯度较高;组织块贴壁法分离的细胞两周才开始...     

脱毒马铃薯微型种薯大西洋栽培技术研究

试验采用四元二次旋转回归正交组合设计,研究脱毒马铃薯品种大西洋种植蜜度、肥料种类及施用量与产量之间的优化数学模型,经计算机对模型进行分析模拟,求得脱毒马铃薯原原种大西洋每公顷产量在18 826.5kg以上的组合方案有266个,建立高产栽培技术模型:种植密度为每公顷129 450～133 680株,每公顷纯(N)施用量为109.8～123.75 kg,纯(P2O5)施用量为237.9～260.1 kg,纯(K2O)施用量为254.25～294.3 kg。措施中心值是:每公顷种植密度为131 655株、施纯N 117 kg、P2O5 249 kg、K2O 274.5 kg。N、P2O5、K2O的比例约为1:2.1:2.4。     

PKR基因表达高效阻断Marc-145细胞系建立及其对PRRSV增殖的影响

研究猪繁殖与呼吸障碍综合征(porcine reproductive and respiratory syndrome, PRRS)在Marc-145细胞蛋白激酶R(interferon-induced, double-stranded RNA-activated kinase, PKR)下调表达状态下的感染特性。以Macr-145细胞PKR基因序列设计3个shRNA,并设阳性对照,合成后插入pSilencer^TM 2.1-U6载体构建重组质粒,与Macr-145细胞PKR+EGFP标签融合表达的重组质粒共转染HEK293细胞,以筛选能下调表达PKR的shRNA,并将该shRNA重组质粒转染Marc-145细胞,潮霉素B抗性筛选并克隆纯化获得PKR下调表达的细胞系,感染重组病毒PRRSV XZ06a-EGFP,通过检测病毒结构蛋白M与EGFP表达、观察细胞病变等,研究此状态下感染特性。结果显示筛选获得致使PKR下调表达的shRNA,以及稳定表达shRNA、PKR表达降低90%以上的Marc-145细胞系,重组病毒感染后48 h, M蛋白与EGFP表达均受到抑制,且...     

不同佐剂伪狂犬病病毒主要抗原决定簇gBb亚单位疫苗免疫小鼠安全性及免疫效力测定

为了评价不同佐剂猪伪狂犬病病毒(PRV)SA株gB蛋白主要抗原决定簇gBb亚单位疫苗免疫小鼠的安全性和免疫效力,以PRV SA强毒株基因组为模板扩增gB基因保守区域,连接pET-28a载体构建pET-28a/gB表达质粒,并经基因测序和Western blot鉴定;制备的抗原与不同佐剂配比分别制备亚单位疫苗,开展不同佐剂gB蛋白主要抗原决定簇gBb亚单位疫苗免疫昆明小鼠免疫效力评估,测定免疫后不同时间体液免疫抗体水平,进行免疫攻毒保护试验,测定免疫保护力。结果表明,不同佐剂gB蛋白主要抗原决定簇gBb亚单位疫苗免疫昆明小鼠后能够产生较高的抗体水平,模式动物昆明小鼠攻毒免疫保护率达到60%,为PRV新型亚单位疫苗的研制提供了依据。     

预混合饲料的生产技术

预混合饲料作为配合饲料的核心成分,其质量的优劣直接关系到配合饲料的质量和畜禽的生产性能.要生产出高品质的预混合饲料,不仅要有科学的配方,还需要选用合适的原料、先进的设备、科学的加工工艺以及一整套质量管理措施.其生产技术包括配方技术、原料的选择及加工技术等.