口蹄疫病毒VPg2基因克隆表达及VPg2-ELISA检测抗体评价

 成功亚克隆了口蹄疫病毒（FMDV）太保毒株3ABC中VPg2基因，并将其插入pGEX-4T-1表达载体构建重组表达质粒，Western blotting分析表明，表达的VPg2蛋白与FMDV阳性血清发生反应。以VPg2表达蛋白为抗原建立间接ELISA方法，对背景清楚的试验牛血清进行检测，结果VPg2表达蛋白与空白对照组（C组）和灭活疫苗反复免疫组（CI组）牛血清均不发生反应，与未免疫直接攻毒组（D组）和免疫后攻毒组（I组）血清均发生反应；对D组和I组，VPg2表达蛋白抗体持续时间最长，可达90d，最早呈阳性反应时间为攻毒后第10天。VPg2表达蛋白抗体持续时间与先前测定的3ABC表达蛋白抗体几乎相同。用VPg2-ELISA方法检测2 170份进口阴性牛血清，12份出现假阳性，假阳性率为0.55%，而用3ABC-ELISA方法检测，48份出现假阳性，假阳性率为2.21%。     

H9N2禽流感病毒分离株NS基因同源性分析

经RT-PCR扩增了三株国内H9N2亚型禽流感病毒(ATV)分离株的非结构(NS)蛋白基因,并把扩增的基因片段克隆到pGEM-T载体中测序,获得了NS1和NS2蛋白的完整编码序列.经与GenBank中发表的核苷酸序列比较表明,这三株病毒的NS基因之间的同源性为96%～98%;与1994年以来香港、韩国H9N2亚型分离株NS基因的同源性均在90%以上;其NSI蛋白的C-末端都缺失13个氨基酸,不同于香港分离株;在AIV NS基因系统发育进化树中,三者都处于等位基因A类的亚洲禽-猪群分枝.     

非洲猪瘟病毒微芯片荧光PCR快速检测技术的建立及初步应用

非洲猪瘟缺乏安全有效的疫苗,其防控有赖于及时、准确的诊断和消毒灭源.本研究在对非洲猪瘟病毒(Afri-can swine fever virus,ASFV)B646L基因序列进行分析的基础上设计引物、探针,建立了基于微芯片的ASFV免提取荧光PCR检测技术.特异性试验结果显示,微芯片PCR可用于我国不同地区ASFV毒株...     

不同方法检测鸡白痢沙门氏菌抗体消长规律的比较研究

为比较不同方法检测鸡白痢沙门氏菌抗体消长的规律,以便为种鸡场净化提供科学指导,本研究以鸡白痢沙门氏菌活菌和灭活免疫原分别接种SPF鸡,采用平板凝集、微量凝集和ELISA试验定期检测血清中的特异性抗体,并以Kappa检验判定不同检测方法之间的一致性程度。结果显示,平板凝集试验在接种后检出抗体阳转的时间早于ELISA,但ELISA检出抗体阳性的持续时间更长,且更符合抗体消长规律;3种检测方法的结果之间仅具有微弱一致性(Kappa系数为0.002~0.295)。本研究结果表明,不同鸡白痢沙门氏菌抗体检测方法之间存在较大差异,但从总体来看,ELISA无假阳性干扰,检出抗体的持续时间较长,更符合抗体消长规律,在单一鸡白痢沙门氏菌感染的情况下,更有利于种鸡场对该病进行净化。     

今年上半年规模化养猪场猪病的特点

养猪生产中，由于亚临床感染、非典型感染及混合感染的存在，许多猪病若单凭临床症状分析则很难确诊。采用实验室检测、诊断技术对猪病的确诊就显得尤为重要。适时的、准确的诊断是猪病预防和控制的关键。通过实验室检测、诊断，一方面可以确定病原和猪体之间的关系，明确猪体（群）疫病存在状况，进而达到疫情监测的目的。     

江苏农业发展的现状特征与模式转型

文章通过对江苏徐州市现代农业发展的实证分析,揭示江苏农业现代化发展的现状、特点及存在的差距和现实问题,探讨新常态下江苏农业现代化改革的模式、方向及相应的政策建议,为推动江苏乃至中国农业发展转型升级提供理论指导和政策依据。     

禽白血病病毒p27抗原ELISA检测试剂盒的比较与评估

为了更好地进行禽白血病监测与净化,研究使用由蛋清、细胞培养物、胎粪等多种样品组成的样品盘对7种禽白血病病毒（Avian leukosis virus,ALV）p27抗原ELISA检测试剂盒（国产试剂盒DA、DB、DC,进口试剂盒IA、IB、IC、IDEXX）进行比较。结果显示：从分析特性上看,试剂盒分析特异性均较好,未观察到与其他常见禽源病毒的交叉反应;与IDEXX相比,DA、IA的分析敏感性较高,DB、IC其次,DC、IB较低,对于ALV不同亚群,各种试剂盒分析敏感性差异可达2～3个稀释度;从诊断特性上看,与IDEXX相比,DB、DC和IC的诊断敏感性和诊断特异性均高于90%;DA、IA和IB与IDEXX的诊断敏感性和诊断特异性均高于80%;各试剂盒对于不同类型样品（DF-1细胞培养物、蛋清、胎粪）的诊断敏感性和诊断特异性存在差异;从重复性上看,DA和IA的批内变异系数均在15%以内。综上所述,与IDEXX相比,当前国产p27抗原ELISA检测试剂盒DA和DB、进口p27抗原ELISA检测试剂盒IA和IC的各项性能可满足禽白血病净化各阶段对不同类型样品的检测需求。     

百菌消—30对猪繁殖呼吸障碍综合征病毒消毒效果试验

猪繁殖呼吸障碍综合征 (PRRS)给养猪业造成了巨大的经济损失。该病的控制有赖于采取综合防制措施 ,其中采用适宜的消毒剂定期消毒是防制该病的有效措施之一。因此 ,通过实验确定一种对PRRSV有良好杀灭作用的消毒剂 ,对生产实践具有重要的指导作用。百菌消 - 30是美国辉瑞公司开发的新型消毒药 ,本文试验了其对猪繁殖呼吸障碍综合征病毒的消毒效果 ,报告如下。1　材料与方法1 .1　试验材料　百菌消 - 30 (Biocid- 30 )由美国辉瑞公司提供 ,批号 7461 2 9。 PRRS病毒 ATCC VR-2 332及 Marc- 1 45细胞为本中心保存。将 PRRS病毒接种 …     

猪圆环病毒1型和2型核酸定性标准样品的研制

为了研制猪圆环病毒1型(PCV1)、猪圆环病毒2型(PCV2)核酸定性标准样品,分别将PCV1和PCV2病毒全序列克隆至pMD18-T载体中并进行稀释分装。制备后进行均匀性评估、稳定性评估、定值和临床试用。结果:制备的标准样品的参考值分别为:1.33×10⁴ copies/μL(PCV1)和1.11×10⁴ copies/μL(PCV2);样品均匀;-20℃可稳定保存24个月以上,4℃可稳定2个月以上。经国家标准化管理委员会组织的专家评审,达到了国家标准样品的要求,可作为核酸扩增检测的猪圆环病毒核酸标准样品。     

种猪群伪狂犬病野毒感染的监测

伪狂犬病(Pseudorabies或Aujeszky’s disease)是由伪狂犬病病毒引起的多种畜禽的一种传染病。猪是伪狂犬病病毒的天然宿主,该病对猪危害性大,临床上因猪的感染年(日)龄不同,出现的症状有所不同。两周内仔猪感染后多为急性、致死性发病,具明显的神经症状,呈非化脓性脑炎,死亡率