种猪群伪狂犬病野毒感染的监测

伪狂犬病(Pseudorabies或Aujeszky's disease)是由伪狂犬病病毒引起的多种畜禽的一种传染病.猪是伪狂犬病病毒的天然宿主,该病对猪危害性大,临床上因猪的感染年(日)龄不同,出现的症状有所不同.两周内仔猪感染后多为急性、致死性发病,具明显的神经症状,呈非化脓性脑炎,死亡率最高可达100%;20日龄到断奶猪、育肥猪以呼吸系统症状为主;成年猪多呈隐性感染,感染后可导致妊娠母猪流产、死产、产木乃伊胎、产弱仔.伪狂犬病是严重危害猪群的原发性疾病之一.据报道,世界上有40多个国家有本病发生,我国至少有20多个省(市、自治区)发生本病.该病的控制与净化关系到猪群其它疫病的发生与防控,关系到集约化养猪业的发展.其中潜伏感染是该病病毒传播过程中不可忽视的环节,也是该病发生与流行的重要因素,应予以充分的重视.     

布氏杆菌微滴数字PCR方法的建立

为建立一种布氏杆菌微滴数字PCR qPCR方法,对布氏杆菌病的定量诊断提供技术支持,在实时荧光PCR (qPCR)检测方法(T/CVMA 20-2020)的基础上,建立了布氏杆菌微滴数字PCR方法,并对方法的反应条件进行了优化,同时对其敏感性、特异性、重复性进行了评估.结果 显示:本方法的最低检测下限为2.6 copi...     

猪圆环病毒3型感染的流行情况与检测方法研究进展

猪圆环病毒3型(porcine circovirus 3,PCV3)是猪群中流行的一种新型猪圆环病毒。2016—2017年,世界范围陆续报道在猪群中发现PCV3,包括美国、中国、美国、韩国、巴西、波兰和意大利等。PCV3感染多见于具有皮炎肾病综合征(PDNS)和繁殖障碍症状的猪群,目前病毒尚未分离成功。本文综述了已报道的PCV3在世界范围内的流行情况,介绍了当前研究的PCV3分子和血清学诊断方法。     

羊血清中口蹄疫病毒非结构蛋白3A-3B1-3B2抗体ELISA检测方法的建立

为建立检测羊血清中口蹄疫病毒非结构蛋白抗体的间接ELISA方法,通过优化抗原表达条件,在大肠杆菌原核表达系统中获得了可溶性的3A-3B1-3B2融合蛋白,基于纯化的可溶性融合蛋白建立了口蹄疫病毒非结构蛋白抗体间接ELISA检测试剂盒。该方法对其他相关的羊类病毒病原无交叉反应,其重复性组内与组间变异系数均低于10%,具有良好的重复性。对300份临床血清样品进行检测,与国内市售的口蹄疫非结构蛋白抗体检测试剂盒进行比较,阳性样品符合率为96.67%,阴性样品符合率为94%,总符合率为95.33%。本研究建立的羊血清中口蹄疫病毒3A-3B1-3B2蛋白抗体间接ELISA检测方法,特异性高、敏感性强,操作简单快速,具有较高的应用推广价值。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒欧洲株国家核酸标准物质的研制

为了研制猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)欧洲株国家核酸标准物质,将PRRSV欧洲株代表毒株LV接种Marc145细胞,待出现细胞病变后,反复冻融收集病毒液,并灭活分装。制备后进行均匀性评估、稳定性评估、数字PCR法定值、不确定度分析和临床试用。结果显示,制备的标准物质的定值为(1.83±0.22)×10~4 copies/μL;样品均匀;-20℃稳定保存12个月以上,4℃稳定2个月以上。经全国标准物质管理委员会的专家评审,该制备物达到了国家二级标准物质的要求,可以作为核酸扩增检测的PRRSV核酸标准物质。     

今日链球菌病为何如此耐药

1.治疗与耐药性的产生 猪链球菌病可以使用疫苗预防,发病时可以采用抗生素治疗.但近年来,由于抗生素的普遍滥用,如在动物饲料中长期添加抗生素用于促进生长及预防和治疗疾病、发生疾病后未经兽医诊断就盲目大量使用多种抗生素等等.这些做法的后果是,动物中大量存在耐药菌,一方面使得原有的抗生素失去作用.     

猪O型口蹄疫3种抗体检测方法的比较

用液相阻断ELISA、正向间接血凝试验、VP1结构蛋白ELISA3种抗体检测方法同时检测来自全国10个省25个规模猪场、18个屠宰场及散养户的937份猪血清中的O型口蹄疫抗体。结果表明,这3种方法检测的抗体阳性率分别为75.9%、81.8%和62%。与液相阻断ELISA相比,正向间接血凝试验比VP1结构蛋白ELISA的符合率高,前者的敏感性为94.9%,特异性为59.3%,后者的敏感性为75.2%,特异性为79.6%。研究为猪O型口蹄疫免疫抗体监测工作的实施提供了较好的参考。     

口蹄疫病毒非结构蛋白VPg1-2、VPg2-3、VPg3基因的克隆、表达及VPg1-2抗体持续时间的研究

【目的】表达口蹄疫病毒（Foot-and-Mouth Disease Virus，FMDV）非结构蛋白VPg1-2、VPg2-3、VPg3，用于FMDV感染与灭活疫苗动物鉴别诊断和其蛋白功能研究。【方法】对O 型口蹄疫病毒太保毒株3ABC 基因片段中的 VPg1-2 (3B1-2)、VPg2-3 (3B2-3)、VPg3 (3B3)基因进行扩增和亚克隆，并将它们分别插入pGEX-4T-1 表达载体构建了重组表达质粒，经IPTG诱导后，进行Western blotting 分析。以纯化的VPg1-2表达蛋白为抗原建立间接ELISA，对背景清楚的实验牛血清进行检测。【结果】表达的VPg1-2、VPg2-3蛋白可与FMDV阳性血清发生特异性反应，表达的VPg3蛋白没有反应。VPg1-2表达蛋白与对照组（C组）和灭活疫苗反复免疫组（CI组）牛血清均不发生反应，与未免疫直接攻毒组（D组）血清均发生反应，与部分免疫后攻毒组（I组）（4/7）血清发生反应，与部分I组（3/7）血清不发生反应；D组和I组VPg1-2表达蛋白抗体持续时间最长可达90 d以上，最早检出相应抗体的时间为攻毒后第10天。【结论】表达的VPg1-2抗原用于健康牛群、免疫后未感染牛群以及未免疫感染牛群的鉴别诊断的特异性、敏感性达到100%，对免疫后感染牛群进行检测时可能有一定的漏检现象。     

口蹄疫病毒3ABC、3AB、3BC基因克隆、表达及其抗体消长规律的研究

 成功克隆了FMDV太保毒株3ABC全基因片段,并将ABC、3AB、3BC片段插入pGEX-4T-1表达载体构建了重组表达质粒,经Western blotting 分析表明,表达的3ABC、3AB蛋白与FMDV阳性血清有反应性,表达的3BC蛋白反应性差。以纯化的3ABC、3AB表达蛋白为抗原建立间接ELISA方法,对背景清楚的试验牛血清进行检测。结果3ABC、3AB表达蛋白与空白对照组(C组)、灭活疫苗反复免疫组(CI组)和部分免疫后攻毒组(I组)牛血清均不发生反应,与未免疫直接攻毒组(D组)和部分I组血清均