农抗万隆霉素的急性毒性研究

农用抗生素万隆霉素是广东省农科院植物保护研究所分离筛选出来的新结构农用抗生素,其急性毒性试验结果表明,急性经口LD50雌鼠为2 610 mg/kg、雄鼠1 780 mg/kg;皮肤刺激强度平均分值为2.5、急性眼刺激积分指数(I.A.O.I)最高值为43,眼刺激的平均指数(M.I.O.I)7天后为13.5,对SD大鼠的急性经皮LD50＞2 050 mg/kg.按国家标准GB15670-1995分级,17.5%农用抗生素万隆霉素乳油急性毒性为低毒农药,完全符合低毒农药登记的毒性标准,可以作为低毒农药进行临时登记.     

放线菌GAAS7310高产菌株的选育研究

采用自然选育、紫外线和空间诱变相结合,对抑菌霉素A17(Antimycin A17)的产生菌——放线菌GAAS7310(Streptomycessp.)进行菌种选育。筛选出高产菌株TK1,其产素效价比原始菌株提高了约60%;酯酶同工酶分析表明该突变株在酯酶同工酶的谱带上与出发菌株有差异,但表现不明显。     

近海海泥链霉菌的分离方法

采用稀释涂抹分离法研究了泥样风干处理、土壤悬浮液热处理、培养基种类、培养基内海水浓度和培养基内NaCl浓度对近海海泥链霉菌分离效果的影响。结果表明:土样风干处理可显著减少细菌数量。40℃时处理土壤悬浮液20min,可促进链霉菌孢子的萌发,增加链霉菌分离的数量。高氏1号琼脂培养基和改良HV琼脂培养基对链霉菌的分离效果最好,且细菌干扰小,不影响链霉菌的挑取。当分离培养基的海水浓度在60%~80%或NaCl浓度在2%~3%范围内,适宜链霉菌的分离。     

香蕉枯萎和细菌性软腐病菌的多重PCR检测

香蕉枯萎病菌Fusarium oxysporum f. sp. cubense和细菌性软腐病菌Dickeya zeae的复合侵染为害给香蕉产业发展带来严重挑战, 有必要建立相关病害的多重聚合酶链式反应(multiplex polymerase chain reaction, multiplex PCR)检测技术。本文基于尖孢镰刀菌古巴专化型1号生理小种(F. oxysporum f. sp. cubense race 1, FOC1)基因组contig 438区间(35 631-37 693 bp)(GenBank: AMGP01000438.1)和4号生理小种(F. oxysporum f. sp. cubense race 4, FOC4)基因组contig 195区间(4 028-6 126 bp)(GenBank: AMGQ01000195.1)存在160 bp插入序列差异设计特异扩增引物FOC-F/-R, 同时以香蕉细菌性软腐病菌D. zeae的促旋酶B 亚单位基因(the subunit B of gyrase gene)(GenBank: JQ284039)序列设计特异扩增引物gyrB-F/-R。多重PCR检测结果显示:本技术可在一次PCR扩增反应内同时检测香蕉枯萎病菌1号、4号生理小种和细菌性软腐病菌; 多重PCR的灵敏度结果表明:检测香蕉枯萎病菌的DNA浓度最低限为0.1 ng/μL, 细菌性软腐病菌的灵敏度为10 3cfu/mL;检测结果稳定可靠。因此, 本研究建立的多重PCR检测方法可有效应用于检测香蕉发病组织中的香蕉枯萎病菌和细菌性软腐病菌, 也可用于香蕉种苗和田间土壤带病菌的监测, 为香蕉种植保驾护航。     

防治香蕉枯萎病胶囊药剂研制与应用

香蕉枯萎病是由尖孢镰刀菌古巴专化型(Fusarium oxysporumf.sp.cubense)引起的维管束系统性的毁灭性病害,给香蕉产业造成巨大损失。为有效控制该病害的发生危害,本实验室研制出一种胶囊杀菌剂绿茵2号,有效成分为噁霉灵。采用香蕉叶鞘内注入胶囊剂,2009年和2010年分别在广州市番禺区和东莞市麻涌镇进行了该药剂防治‘粉蕉’和‘巴西蕉’枯萎病的田间药效试验,防治效果分别达到58.00%和63.77%,获得利润分别为6 005.0元/667m2和1 420.0元/667m2,取得了较好的防治效果和经济效益。     

香蕉细菌性软腐病菌细胞壁降解酶pelD、pelE 基因的克隆表达及活性分析

细胞壁降解酶与植物病害症状有重要的相关性。根据已知软腐病细菌细胞壁降解酶基因序列,设计两对特异性引物,对香蕉细菌性软腐病菌进行PCR克隆,获得具有完整阅读框的基因pelD、pelE序列。通过构建重组表达载体pET28b(+)-pelD和pET28b(+)-pelE,重组表达载体转化子在IPTG诱导下,经SDSPAG分析,获得了pelD和pelE的表达蛋白。将两种表达蛋白接种于7~8片叶的粉蕉假茎和离体叶片上,发现接种pelE表达蛋白的粉蕉假茎和叶片出现了腐烂症状,但接种pelD表达蛋白没有引起发病症状。     

农抗抑霉菌素A17对茄褐纹病菌的抑制作用

为探讨农抗抑霉菌素A17对植物病原真菌的作用机理,测定了抑霉菌素An对茄褐纹病菌菌丝生长和孢子萌发的抑制作用.结果表明:抑霉菌素A17处理后可使病菌菌丝产生皱褶、龟裂、裂缝等形态变化,较低浓度的抑霉菌素A17就可明显抑制病菌菌丝生长和孢子形成,其抑制中浓度分别为0.1μg/mL和0.0166μg/mL,抑霉菌素A17具有开发成高效生物农药的巨大潜力.     

星形孢菌素产生菌的选育研究

用紫外线和微波复合诱变星形孢菌素产生菌(Stretomyces sp.4138),以硫酸链霉素抗性偶联进行筛选。结果表明:紫外线处理50s后,在含硫酸链霉素0.8μg/ml的分离培养基上筛选到突变株HZ-09,比原始菌株H-0效价提高了30.46%;再以HZ-09为出发菌株进行微波处理30s后,硫酸链霉素抗性筛选获得突变株HW-25,比原始菌株H-0效价提高了284.20%。菌株HW-25经多次传代,遗传性状稳定。     

蜘蛛兰红斑病的病原鉴定

蜘蛛兰具有较好的观赏和药用价值.在广州市区绿化带发现蜘蛛兰叶部红斑病发生严重,影响其正常生长和美观.为了探清该病害的致病菌,采用病原物组织分离法、柯赫氏法则致病性测定、病原菌培养性状、形态特征及β-微管蛋白(β-tubulin)序列分析等进行分类鉴定,确定了该致病菌为水仙花壳多孢(Stagonosporacurtisii).该病原菌的确定,可为有效防控该病害提供理论依据.     

海南菠萝心腐病菌烟草疫霉的生物学特性研究

为明确海南菠萝心腐病菌烟草疫霉的生物学特性,研究不同培养基、温度pH值和光照对病菌菌体生长和孢 子囊产生的影响。结果表明,V8汁胡萝卜两种培养基适宜菌丝生长,而V8汁玉米粉和番茄3 种培养基适合病菌产生孢 子囊尤其是番茄琼脂培养基,可诱导病菌产生大量孢子囊病菌在10,35益范围内均可生长,最适温度范围是24,32最适pH值为5,8,在pH值7,8稍偏碱时菌丝生长速度最快。光照条件对菌丝生长影响不明显,但明显促进孢子囊的产生。