火龙果种子清蛋白的理化性质及其胰蛋白酶抑制活性研究

为阐明火龙果种子清蛋白的理化性质和生物学活性,本研究从红心火龙果中纯化获得种子清蛋白(HPA),分析其分子量、氨基酸组成、同源性及胰蛋白酶抑制活性。结果表明,HPA由两条分子量为12.6、13.2 kDa的多肽链(HPA-1,HPA-2)组成。 HPA富含谷氨酸(6.297 g·100g^-1)、精氨酸(3.992 g·100g^-1) 和天冬氨酸(2.694 g·100g^-1)。 HPA与来自甜菜和菠菜2S种子贮藏蛋白具有高度相似性。HPA-2显示出较高的胰蛋白酶抑制活性,比活力为9.19×10³ TIU· mg^-1,纯化倍数为1.86。经大豆胰蛋白酶抑制剂-琼脂糖凝胶柱纯化的组分HPA-2-1是胰蛋白酶竞争性抑制剂,抑制常数(Ki)为0.62 nmol·L^-1, 具有Kunitz型抑制剂的摩尔比曲线。 HPA-2-1在一定的pH值(2~10)和温度(30~70℃)范围内具有稳定的抑制活性,且抑制活性几乎不受二硫苏糖醇(DTT)的影响。本研究为挖掘火龙果种子资源,丰富胰蛋白酶抑制剂的种类提供了参考。     

沼液无土栽培蕹菜的应用效果

为实现沼液的无害化处理与利用,本试验以猎物沼液为营养液进行蕹莱无土栽培,研究蕹菜的长势、生理指标及对沼液的净化能力。结果表明,与普通土壤培养相比,沼液无土栽培对蕹菜根长、侧根数、总产量影响显著;沼液能显著提高蕹菜中可溶性糖含量,增幅为68.5%,并显著降低蕹菜中硝态氮的含量,降幅为31.5%;无土培养后沼液中氮、磷、钾等大量元素含量明显降低,全氮下降率最高,达到22.03%,而可直接吸收利用的有效氮磷钾含量则降幅约30%~40%,差异极显著;沼液中Cu、Mg、Ca、Fe、Pb、Cd、Cr等微量元素的含量,除了Mg、Ca有显著下降外,其它均无明显变化。本研究为提高蔬菜品质、合理利用沼液提供新途径,并对解决沼液的无公害排放难题具有一定指导意义。     

米曲霉固体发酵降解豆粕植酸及其生长条件的优化

本试验旨在优化豆粕米曲霉(Aspergillus oryzae)固体发酵条件,使豆粕中的植酸降解到最低水平且发酵菌种的生物量达到最大值,同时了解植酸降解和发酵菌种生物量增长的相关性.采用Box-Behnken设计的响应面法来优化料水比、接种量和发酵时间,试验共设17组,共5个发酵条件,每个发酵条件设3个水平(料水比分别...     

羊栖菜硫酸多糖诱导下的人红白血病HEL细胞差异表达基因分析

为探讨人红白血病HEL细胞经羊栖菜硫酸多糖(SFPS Ⅱ)处理后基因表达谱的变化,本研究用SFPS Ⅱ作用HEL细胞24 h,应用转录组技术筛选差异表达基因,分析差异基因富集的GO功能和KEGG信号通路,并通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)对部分差异表达基因进行验证。结果表明,SFPS Ⅱ处理HEL细胞后,HEL细胞活力降低,呈浓度依赖性,但对正常人胚肺成纤维细胞MRC-5几乎无毒性。与对照组相比,共有1 248个基因差异表达,其中219个上调,1 029个下调。GO分析显示,差异表达基因主要改变DNA构象、硫酸盐转运及对肿瘤坏死因子和外在凋亡信号反应等生物学功能。KEGG信号通路分析显示,显著富集的通路与Rap 1信号通路等癌症和免疫密切相关。试验随机选择16个显著差异基因,并通过RT-qPCR进行确认,发现SFPS Ⅱ诱导HEL细胞后,导致表达差异基因与肿瘤生物学进程和通路显著相关。本研究结果为揭示羊栖菜硫酸多糖抗肿瘤机制的提供了理论依据。     

羊栖菜组分多糖对α-葡萄糖苷酶的抑制作用

为高效利用羊栖菜组分多糖(SFPSⅠ),以SFPSⅠ为原料,α-葡萄糖苷酶作为靶标,研究SFPSⅠ对α-葡萄糖苷酶的抑制作用及其结构的影响,建立具有α-葡萄糖苷酶活性的Caco-2细胞模型,并对Caco-2细胞模型上α-葡萄糖苷酶活性的抑制效果进行研究。结果表明,SFPSⅠ对α-葡萄糖苷酶有明显的抑制作用,使得α-葡萄糖苷酶活力下降一半时的抑制剂浓度,即半抑制(IC₅₀)为0.31 mg·mL^-1。SFPSⅠ对α-葡萄糖苷酶的抑制作用是一个可逆过程,抑制类型为混合型抑制。动力学分析结果表明,SFPSⅠ对α-葡萄糖苷酶的抑制常数(K_i)为0.143μmol·L^-1。荧光测定结果表明,SFPSⅠ结合会引起α-葡萄糖苷酶三级结构的明显变化。随着SFPSⅠ浓度的升高,其对Caco-2细胞模型上α-葡萄糖苷酶抑制效果越好。本研究结果为进一步探讨和设计新型α-葡萄糖苷酶抑制剂奠定了科学基础,同时也为开发具有降血糖功能的功能性药品与保健品提供了新资源。     

羊栖菜组分多糖对α-葡萄糖苷酶的抑制作用

为高效利用羊栖菜组分多糖(SFPSⅠ),以SFPSⅠ为原料,α-葡萄糖苷酶作为靶标,研究SFPSⅠ对α-葡萄糖苷酶的抑制作用及其结构的影响,建立具有α-葡萄糖苷酶活性的Caco-2细胞模型,并对Caco-2细胞模型上α-葡萄糖苷酶活性的抑制效果进行研究。结果表明,SFPSⅠ对α-葡萄糖苷酶有明显的抑制作用,使得α-葡萄糖苷酶活力下降一半时的抑制剂浓度,即半抑制(IC₅₀)为0.31 mg·mL^-1。SFPSⅠ对α-葡萄糖苷酶的抑制作用是一个可逆过程,抑制类型为混合型抑制。动力学分析结果表明,SFPSⅠ对α-葡萄糖苷酶的抑制常数(K_i)为0.143 μmol·L^-1。荧光测定结果表明,SFPSⅠ结合会引起α-葡萄糖苷酶三级结构的明显变化。随着SFPSⅠ浓度的升高,其对Caco-2细胞模型上α-葡萄糖苷酶抑制效果越好。本研究结果为进一步探讨和设计新型α-葡萄糖苷酶抑制剂奠定了科学基础,同时也为开发具有降血糖功能的功能性药品与保健品提供了新资源。     

浙江紫山药营养成分及薯蓣皂苷元含量测定

[目的]测定浙江紫山药（Purple Dioscorea batatas Decne.）的营养成分及薯蓣皂苷元含量。[方法]通过常规营养成分测定方法,分析评价浙江江山峡口镇、台州椒江的紫山药粗蛋白、粗脂肪、淀粉、微量元素、氨基酸等主要营养成分的含量,并以硫酸显色法检测紫山药药理活性成分薯蓣皂苷元含量。[结果]浙江江山峡口镇、台州椒江的紫山药粗蛋白平均含量为13.82%,粗脂肪平均含量为1.00%,粗纤维平均含量为25.13%,淀粉平均含量为15.93%,且含有丰富的K、Fe、Zn、Mg、Mn、Ca等微量元素;江山峡口镇、台州椒江的紫山药含有的17种氨基酸中,人体必需氨基酸含量高,且氨基酸组成全面,其中,主要鲜味氨基酸谷氨酸含量最高,为12.3、10.2mg/g干基,其次是天门冬氨酸,含量为10.9、9.8mg/g干基;药理活性成分薯蓣皂苷元含量平均达2.14%。[结论]浙江紫山药为高蛋白、低脂肪、高碳水化合物的绿色食品,并有一定的药理作用,具有较高的开发价值。     

紫山药多糖超声波辅助提取工艺优化及抗氧化性能研究

就常规水提法和超声波辅助提取法提取紫山药多糖的最佳工艺条件与影响因素进行筛选与优化,并对所提取的粗多糖进行了自由基清除能力评价.结果表明,常规水提法的最佳工艺参数为:提取温度80 ℃、提取时间160 min、加水量60 ml/g,粗多糖平均得率为5.65%;超声辅助提取法的最佳工艺参数为:超声功率1 000 W、超声波处理时间10 min、加水量35 ml/g,粗多糖平均得率为8.35%.试验表明,超声波辅助提取法有利于紫山药多糖的提取,且所提取粗多糖的DPPH(1,1-二苯基-2-三硝基苯肼)抗氧化性优于传统水提法提取的粗多糖和维生素C.因此,超声波辅助提取法适用于紫山药多糖的工业生产.     

岩藻黄质对人红白血病HEL细胞的凋亡作用及其机制

为探讨岩藻黄质对人红白血病HEL细胞株增殖抑制作用及其诱导凋亡机制,以岩藻黄质处理人红白血病细胞(HEL细胞),采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡率,分析细胞周期,测定细胞线粒体膜电位,并应用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和Western blot法检测凋亡相关基因及蛋白表达的变化。结果表明,岩藻黄质呈剂量依赖性抑制HEL细胞增殖(P<0.01)。流式细胞术检测显示,岩藻黄质作用24 h后,HEL细胞早期和晚期凋亡的比率极显著增高(P<0.01),G₀/G₁细胞比例增多,S期和G₂/M期细胞比例减少,线粒体膜电位降低;岩藻黄质通过上调促凋亡基因和下调抑凋亡基因的表达引起细胞的凋亡,Bcl-xL蛋白的表达变化不显著(P >0.05),Bcl-2蛋白的表达下调,Caspase-3和Bax蛋白的表达极显著上调(P<0.01)。由此可见,岩藻黄质能诱导HEL细胞凋亡,这为新型抗白血病功能食品的开发及白血病的治疗提供了理论依据。