猪细小病毒6型SYBR Green I real-time PCR检测方法的建立

采用PCR方法扩增PPV6保守区域基因252bp,将其克隆到pClon007载体,构建重组质粒作为标准阳性质粒。以质粒模板建立PPV6的SYBR GreenⅠreal-time PCR检测方法,并进行敏感性、特异性和重复性等验证。结果表明,重组质粒特异性好;建立的real-time PCR方法Ct值与标准品模板在8.80×109~8.80×101 copies/μL范围内呈良好的线性关系,相关系数为0.993,斜率为-4.320。该方法检测灵敏度可达8.80×101 copies/μL。该方法对JEV、PRV、PRRSV、PCV2、FMDV等猪常见病原检测均无特异性扩增;对临床样品的检测结果表明,所建立的荧光定量PCR阳性检测率为40.63%。本试验成功建立了PPV6SYBR Green I real-time PCR检测方法,可实现对PPV6快速灵敏的诊断。     

血清钙、磷和葡萄糖水平对奶牛胎衣不下的影响

奶牛产后胎衣在12h内不能自然完全脱落者称为胎衣不下(Retention Fetal Membrane，简称RFM)，它是奶牛的常见病之一。对于此病国内外均有大量文献报道。我国有关资料显示，在一般的奶牛场中，此病的发病率为10％～25％，个别地区高达40％以上。     

番茄青枯病的综合防治技术

青枯病(Pseudomonas solanacearum Smith．)是浙江省番茄种植区域的主要病害之一,是典型的细菌性维管束病害。近年来随着蔬菜设施栽培的不断完善和高山蔬菜的迅速发展,番茄栽培由季节性向全年性发展,造成青枯病菌源累积,病害暴发流行趋重,危害逐年加大,导致产量下降,经济效益降低。为探索番茄青枯病的有效防治途径,笔者通过3年多的探索实践,提出了抗病品种的选择和利用,结合石     

羊凋亡细胞因子Fas、FasL、TNFR1和TNF-α实时荧光定量检测方法的建立

为探讨羊痘病毒感染后机体的凋亡细胞因子mRNA表达水平的变化,深入探讨羊痘病毒免疫机制,本研究设计针对羊凋亡细胞因子Fas、FasL、TNFR1和TNF-α特异性引物,建立羊凋亡细胞因子实时荧光定量方法。分别建立荧光定量PCR反应体系并进行优化。结果表明:Fas、FasL、TNFR1和TNF-α的SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR各基因的溶解曲线均呈单一溶解峰。组内变异系数均小于2.00%。本研究建立的羊凋亡细胞因子SYBR Green Ⅰ荧光定量RT-PCR检测方法为凋亡细胞因子mRNA表达水平提供了技术平台。     

文化立企 精彩纷呈——江苏省弶港农场“文明五月 甜美弶农”主题月活动掠影

正为进一步加大文明单位创建力度,提升职工居民文明素质,加强品牌和企业文化建设,5月8日,"文明五月甜美弶农"主题月活动正式拉开帷幕。主题月通过开展"文明弶农、争做先锋"主题宣传教育、"欢乐弶农溢彩流金"专场文艺演出、"幸福弶农醉享生态"全民健身瓜乡骑行、"美丽弶农精彩瞬间"手机摄影作品征集、"魅力弶农和谐社区"专题书画展、"激情燃烧红五月     

我发现了青蛙的秘密

本文选材颇有新意．以跟随父母参与劳动实践开头，探究过程娓娓道来。结尾简炼自然，呼应开头，点明中心。     

错季栽培防治西瓜枯萎病

西瓜枯萎病(Fusarium oxysporumf.sp.niveum)是浙江省西部地区春季西瓜生产最严重的土传病害之一,属于中温性病害。病菌萌发和生长期间适宜土温24~30℃,5℃以下、35℃以上则不易活动。经过多年观测,病菌田间侵染发病最适温度为18~23℃,苗期一般在18℃发病最严重,成株期以23℃发     

浅谈旋挖钻进成孔灌注桩施工技术

旋挖钻进成为近年来发展最快的一种新型桩孔施工方法。其工作效率高,施工质量好,污染小,噪音低;旋挖钻机设备性能先进,自动化程度高,劳动强度低。旋挖钻进工艺代表现今基础施工的先进水平,是今后基础施工工的发展方向之一。     

猪德尔塔冠状病毒SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR方法的建立及应用

为建立一种猪德尔塔病毒(PDCoV)的快速检测方法,本研究根据NCBI公布的PDCoV序列设计了1对特异性引物,利用RT-PCR方法扩增PDCoV的S基因,将其连接至pMD 19-T载体上,以构建正确的重组质粒作为标准品,建立SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测方法,并对该方法的敏感性、特异性及重复性进行了验...